17 de agosto de 2018
Este protocolo mede respostas gosto humano e inclui uma breve avaliação anatômica, um teste de gosto curto e um método de validação usando relatado sensação e gosto do receptor genótipo do assunto.
Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo médico e sensorial sobre o paladar de cada pessoa. A principal vantagem desta técnica é sua brevidade e adequação para pesquisas biomédicas. As implicações dessa técnica se estendem ao diagnóstico e tratamento da rinossinusite crônica, pois os receptores gustativos fazem parte do sistema imunológico inato.
Estarei demonstrando o procedimento em nosso membro do laboratório David e Lauren fará as soluções de sabor. Comece instruindo o sujeito a abrir a boca. Use uma luz para iluminar a cavidade oral e examine os sete sublocais da área.
Aqui a língua dorsal é facilmente visível. Usando um abaixador de língua para deprimir a língua, a faringe posterior torna-se visível. Em seguida, a lateralização da língua permite a exposição do trígono retromolar esquerdo e da mucosa bucal esquerda.
Aqui a gengiva anterior e a mucosa labial são visualizadas. À medida que a língua do sujeito é levantada, a superfície ventral da língua torna-se visível. E isso permite o exame do assoalho da boca dos sujeitos.
A língua é então lateralizada novamente para examinar o trígono retromolar direito e a mucosa bucal direita. E, por último, o palato duro e mole são visualizados. Observe lesões, escoriações e massas ou sinais de inflamação.
Use uma fonte de luz para visualizar a superfície dorsal da língua e identificar a presença ou ausência de papilas fungiformes ou superfície lisa da língua. Por fim, anote os resultados do exame da cavidade oral antes de prosseguir com o teste de sabor. Comece preparando as soluções gustativas usando um balão volumétrico para cada uma para garantir a precisão das concentrações.
Dissolva as amostras usando água ultrapura. Envolva todas as soluções sensíveis à luz com papel alumínio para reduzir a exposição à luz. Em seguida, armazene as soluções gustativas a quatro graus Celsius.
Para identificar erros comuns na preparação da solução, encha um copo de degustação com a solução antiga e outro com a solução nova. Prove cada solução para verificar se são idênticas em força. Em seguida, rotule as tampas dos frascos com um adesivo circular de acordo com a ordem de apresentação e um código de cores.
Para combinar os rótulos dos frascos com os rótulos do questionário de sabor. Embale as amostras colocando-as em seus respectivos transportadores. Em seguida, prepare o questionário de sabor usando uma escala de categoria para avaliar a intensidade do sabor e uma escolha forçada para identificar a qualidade do sabor de cada sabor.
Por fim, coloque rótulos circulares da cor e número apropriados ao lado da amostra apropriada no questionário de sabor. Forneça ao sujeito a caixa de amostra, uma garrafa de água, um copo vazio, caneta e questionário de sabor contendo entradas para 12 amostras. Explique o procedimento de teste e informe ao sujeito que ele será solicitado a avaliar a intensidade e a qualidade de cada sabor.
Deixe-os saber que eles podem não experimentar todas as qualidades. Comece o teste pedindo ao sujeito que enxágue a boca duas vezes com água e cuspa no copo fornecido. Peça-lhes que despejem toda a amostra um na boca e segurem-na por cinco segundos antes de cuspir a solução no copo.
Diga-lhes para não gargarejar ou engolir a solução. Em seguida, instrua o sujeito a circular uma das 13 linhas verticais correspondentes à intensidade da amostra. Em uma escala de 0 a 12.
De nenhuma intensidade a extremamente intensa. E escolha uma única qualidade para descrever o sabor. Em seguida, peça ao sujeito para enxaguar a boca com água duas vezes antes de prosseguir para a próxima amostra.
Observe o assunto provando e classificando a amostra de água. Se a classificação se desviar de nenhuma intensidade e nenhum sabor, repita as instruções do questionário antes de permitir que o teste prossiga. Depois que todas as amostras forem degustadas, revise o questionário finalizado quanto à integridade.
Por fim, marque as classificações de intensidade em uma escala de 0 a 12 a partir das linhas verticais que o sujeito circulou. E calcule a média das duas classificações de intensidade para cada saborizante para análise posterior. Os resultados do teste de sabor confirmam a existência de diferenças perceptivas de sabor para o composto amargo, feniltiocarbamida ou PTC entre os indivíduos agrupados pelo genótipo do receptor TAS2R38.
As classificações de intensidade do PTC são significativamente diferentes entre três genótipos. A motivação por trás deste estudo foi tentar avaliar ou desenvolver um exame rápido no ponto de serviço que pudéssemos fazer na clínica que avaliasse a função desse receptor que acreditamos desempenhar um papel no desenvolvimento da sinusite crônica. A ideia aqui é que poderíamos usar esse teste de sabor para prever quais de nossos pacientes estão em alto risco de desenvolver sinusite e, mais importante, quais pacientes são bons candidatos cirúrgicos para fazermos nossa cirurgia sinusal, ou quais se sairão mal com nossa cirurgia sinusal.
Então, estamos tentando usar esse teste de sabor para prognosticar a doença sinal-nasal do paciente. Depois de passarmos por todos os testes de sabor, confirmamos isso genotipando os pacientes. E como você pode ver na figura três, na maioria das vezes, o genótipo do paciente segue o padrão de seu fenótipo.
Ou seja, quanto mais amargos eles provavam, eles tendiam a ser dominantes para esse receptor. No entanto, existem alguns valores discrepantes. Mostrando que existem homozigotos funcionais, PAV / PAVs que disseram que não provaram PTC e, por outro lado, houve alguns indivíduos AVI / AVI não funcionais que provaram PTC com amargor.
Isso significa que, seja qual for o teste de sabor que desenvolvermos, se houver pacientes que não estejam atendendo às nossas expectativas, provavelmente desejaremos confirmar o teste de sabor genotipando-os para T2R38. Uma vez dominado, o exame e o teste de sabor podem ser realizados em menos de 30 minutos. Depois de assistir a este vídeo, você deve entender como realizar um exame oral, observar evidências de doenças e realizar um breve teste de sabor.
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Este protocolo mede as respostas gustativas humanas e inclui uma breve avaliação anatômica, um teste gustativo rápido e um método de validação utilizando a sensação relatada pelo sujeito e seu genótipo do receptor gustativo. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais nas áreas médica e sensorial sobre o paladar de cada indivíduo.
Este método permite uma avaliação rápida e na assistência direta ao paciente da função dos receptores gustativos, que atua como um indicador da sensibilidade tecidual em pesquisas biomédicas. Ao associar a percepção subjetiva do sabor a dados objetivos de genótipo, ele contribui para a redução de riscos mecanicistas na validação de alvos em vias sensoriais e relacionadas ao sistema imunológico. A brevidade e reprodutibilidade do teste facilitam sua integração em fluxos de descoberta nos quais a modulação dos receptores gustativos constitui uma hipótese terapêutica.
O método se insere na fase inicial de descoberta para validar alvos de receptores do paladar, auxilia a preparação para triagem por meio da administração padronizada de substâncias com sabor e orienta decisões translacionais por meio da correlação entre genótipo e fenótipo.