Name: Um modelo do rato de leve hipoperfusão intra-uterino com estenose Microcoil (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: Aprenda a induzir hipoperfusão intra-uterina leve em ratas usando microcois metálicos nas artérias uterinas e ovarianas. Este método padroniza a restrição de fluxo sanguíneo em toda a ninhada para estudar lesões cerebrais fetais.

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Este trabalho foi financiado pelo programa de intercâmbio FY 2013 pesquisa entre JSPS e CNRS, JSPS KAKENHI Grant número 26860858 e a neurociência Narishige Research Foundation. Agradecemos os Drs Mariko Harada-Shiba e Kyoko Shioya discussões úteis. Agradecemos a Mari Furuta, Mutsumi Sakamoto, Ritsuko Maki e Dr. Emi Tanaka pela excelente assistência técnica.

Todos os experimentos foram realizados em conformidade com os protocolos aprovados pelo Comitê de uso do nacional Cerebral e o centro do sistema circulatório, Suita, Japão e cuidado de Animal Experimental.
1. prepare os seguintes animais e materiais para cirurgia MIUH
<ol><li>Preparar a grávida cronometrado Sprague-Dawley ratos no dia gestacional 17, ou seja, a embrionário dia 17 (E17). Pesos de corpo médio a barragens são 307.0 ± 40,7 g (média ± DP, n = 9).</li>
	<li>Prepare-se suportes metálicos; diâmetro interno 0,24 mm, feito de aço revestido de ouro.</li>
	<li>Prepare todos os materiais de acordo com a tabela de materiais.</li>
</ol>2. preparar para a cirurgia MIUH
<ol><li>Aquecer uma almofada de aquecimento a 37 ° C, para a colocação de rato</li>
	<li>Coloque uma fralda estéril sobre a almofada de aquecimento</li>
	<li>Solução salina estéril aquecida a 37 ° C em banho-maria</li>
</ol>3. realizar cirurgia MIUH
<ol><li>Realize procedimentos cirúrgicos sob condição estéril. Esterilize as bobinas, pinça, agulha com etanol a 70% antes do uso. Usar luvas estéreis e ocasionalmente desinfete aplicando spray de etanol.</li>
	<li>Coloque o rato na caixa de indução de anestesia. Introduza a 4% de isoflurano em caixa (aproximadamente 5 min).</li>
	<li>Coloque o rato sobre uma fralda estéril sobre a almofada de aquecimento em uma posição supina depois que o animal é completamente anestesiado na caixa de indução. Verifique a profundidade da anestesia pela falta de uma resposta a uma pitada de dedo do pé. Manter o isoflurano 1,5-2,0% com um cone de nariz.</li>
	<li>Aplicam-se desde o umbigo até a região do arco pélvica depilatório espuma sobre o abdômen. Após vários minutos, limpe a espuma depilatório com uma toalha de papel. Uma máquina de barbear pode ser usada como um substituto para a espuma depilatório.</li>
	<li>Aplica gaze embebida em solução desinfetante iodo à região depilada da pele.</li>
	<li>Coloque um pano cirúrgico com uma abertura redonda para cobrir o abdômen que não seja a área da incisão cirúrgica. Vários pedaços de gaze podem ser usados como um substituto para a cortina.</li>
	<li>Usando um bisturi cirúrgico, faça uma incisão de aproximadamente 2,5 cm comprimento na parte inferior do abdome da borda superior do osso púbico para cima em direção ao umbigo. Em seguida, fazer uma incisão através da camada muscular por baixo.</li>
	<li>Coloque vários pedaços de gaze estéril ao redor da abertura da cortina e molhar a gaze com solução salina aquecida.</li>
	<li>Empurre a ambas as partes laterais do abdômen suavemente, para que uma porção do corno uterino emerge a incisão.</li>
	<li>Desinfecte as mãos do cirurgião com etanol a 70%.</li>
	<li>Puxe delicadamente o todo corno uterino da cavidade abdominal manualmente sem o uso de fórceps. Usando a pinça cirúrgica não é aconselhável, pois pode facilmente danificar útero frágil, fetos e vasos sanguíneos compactando-os fortemente e desigualmente.</li>
	<li>Coloque o corno uterino sobre a gaze molhada.</li>
	<li>Execute o mesmo procedimento para o outro corno uterino.</li>
	<li>Conte o número de fetos.</li>
	<li>Aplica a solução salina aquecida com frequência para manter o útero quente e úmido durante a cirurgia.<ol>
<li>Mude a fralda quando ele tem absorvido muito soro fisiológico. Para manter a estabilidade, repita as luvas de desinfecção com 70% de etanol e dicas do instrumento com iodo. Manter os dedos não estéreis longe as pontas estéril do instrumento é crucial.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Identifica a parte proximal da arcada principal das artérias uterinas e dos ovários sob um estereomicroscópio. Nota: É fundamental distinguir os ramos a arcada principal para as placentas. Note-se que a intervenção cirúrgica pode ser mais fácil quando o corno uterino é invertido. Ocasionalmente, aplicar uma bobina na parte proximal muito do arcade é difícil, porque está localizado profundamente na cavidade abdominal e artérias da placenta são muito próximas a parte proximal do arcade. Neste caso, uma bobina pode ser aplicada a uma parte da arcada após os garfos de filial primeiros fora.</li>
	<li>Separar a artéria de veia correndo paralela a ela com a pinça e fazer o espaço entre eles.</li>
	<li>Coloque um pedaço de corda (seda sutura 4.0, 5 cm de comprimento) embaixo da artéria.</li>
	<li>Levante ambas as extremidades da cadeia de caracteres com pinças para que a artéria é levantada e separou a veia frágil.</li>
	<li>Segurando a borda do microcoil com pinça fina na outra mão, coloque um microcoil ao lado da artéria levantada (Figura 2.1).</li>
	<li>Gire a artéria levantada usando a corda em torno do microcoil para embrulhar o microcoil ao redor da artéria. É mais fácil girar a artéria em torno da bobina do que ao girar a bobina em torno da artéria (Figura 2.2).</li>
	<li>Depois de girar a artéria 3 ou 4 espiras (bobinas tem 5 voltas), alterar o local no qual a bobina é realizada para a outra borda. Segure a borda da bobina que tem sido envolvida em torno da artéria com fórceps. Altere o local no qual a sequência de caracteres levanta a artéria para o outro lado da bobina. Girar a artéria em torno da bobina para que a bobina completamente (5 voltas) envolve a artéria (Figura 2.3, 2.4).</li>
	<li>Remova a sequência de caracteres.</li>
	<li>Execute o mesmo procedimento para as outras três artérias.</li>
	<li>Observe que, frequentemente, aplicando soro aquecido para o útero é crucial; caso contrário, aumenta a taxa de mortalidade de fetos e hipotermia pode ser neuroprotective.</li>
	<li>Retorne suavemente o corno uterino na cavidade abdominal. Levantamento de uma borda da incisão da parede abdominal com fórceps pode facilitar este procedimento.</li>
	<li>Stich o músculo abdominal e em seguida stich a pele abdominal com sutura (sutura de seda 4.0). Amarre a sutura após cada stich, ou seja, interrompidas suturas simples.</li>
	<li>Aplica gaze embebida em solução desinfetante iodo em e ao redor da incisão cirúrgica.</li>
	<li>Administre o analgésico meloxicam em 0,5 mg/kg de peso corporal por via subcutânea.</li>
	<li>Permitem a 30 min de recuperação em uma gaiola aquecida. Seleção de animais se totalmente acordado e andando ao redor da gaiola, retornam a gaiola em casa.</li>
</ol>

<ol><li>Ohshima, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+intrauterine+hypoperfusion+reproduces+neurodevelopmental+disorders+observed+in+prematurity%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity.</a> Sci Rep. 6, 39377(2016).</li>
<li>Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html">http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html</a> (2010).</li>
<li>Anderson, P., Doyle, L. W., Victorian Infant Collaborative Study, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobehavioral+outcomes+of+school-age+children+born+extremely+low+birth+weight+or+very+preterm+in+the+1990s%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Neurobehavioral outcomes of school-age children born extremely low birth weight or very preterm in the 1990s.</a> JAMA. 289 (24), 3264-3272 (2003).</li>
<li>Levine, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+childhood+neurodevelopment+after+intrauterine+growth+restriction%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Early childhood neurodevelopment after intrauterine growth restriction: a systematic review.</a> Pediatrics. 135 (1), 126-141 (2015).</li>
<li>Sucksdorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preterm+Birth+and+Poor+Fetal+Growth+as+Risk+Factors+of+Attention-Deficit%2F+Hyperactivity+Disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Preterm Birth and Poor Fetal Growth as Risk Factors of Attention-Deficit/ Hyperactivity Disorder.</a> Pediatrics. 136 (3), e599-e608 (2015).</li>
<li>Volpe, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+injury+in+premature+infants%3A+a+complex+amalgam+of+destructive+and+developmental+disturbances%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Brain injury in premature infants: a complex amalgam of destructive and developmental disturbances.</a> Lancet Neurol. 8 (1), 110-124 (2009).</li>
<li>Nardozza, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+growth+restriction%3A+current+knowledge%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Gynecol+Obstet%22%5BJournal%5D)">Fetal growth restriction: current knowledge.</a> Arch Gynecol Obstet. 295 (5), 1061-1077 (2017).</li>
<li>Chang, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preterm+birth+and+the+role+of+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Bmj%22%5BJournal%5D)">Preterm birth and the role of neuroprotection.</a> Bmj. 350, g6661(2015).</li>
<li>Coq, J. O., Delcour, M., Massicotte, V. S., Baud, O., Barbe, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+ischemia+deteriorates+white+matter%2C+brain+organization%2C+and+function%3A+implications+for+prematurity+and+cerebral+palsy%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Prenatal ischemia deteriorates white matter, brain organization, and function: implications for prematurity and cerebral palsy.</a> Dev Med Child Neurol. 58, Suppl 4. 7-11 (2016).</li>
<li>Jantzie, L. L., Corbett, C. J., Firl, D. J., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+Erythropoietin+Mitigates+Impaired+Cerebral+Cortical+Development+Following+Subplate+Loss+from+Prenatal+Hypoxia-Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">Postnatal Erythropoietin Mitigates Impaired Cerebral Cortical Development Following Subplate Loss from Prenatal Hypoxia-Ischemia.</a> Cereb Cortex. 25 (9), 2683-2695 (2015).</li>
<li>Kubo, K. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+impaired+neuronal+migration+with+cognitive+deficits+in+extremely+preterm+infants%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Association of impaired neuronal migration with cognitive deficits in extremely preterm infants.</a> JCI Insight. 2 (10), (2017).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+musculoskeletal+and+locomotor+alterations+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Dev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mild musculoskeletal and locomotor alterations in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Int J Dev Neurosci. 29 (6), 593-607 (2011).</li>
<li>Gilbert, J. S., Babcock, S. A., Granger, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension+produced+by+reduced+uterine+perfusion+in+pregnant+rats+is+associated+with+increased+soluble+fms-like+tyrosine+kinase-1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Hypertension produced by reduced uterine perfusion in pregnant rats is associated with increased soluble fms-like tyrosine kinase-1 expression.</a> Hypertension. 50 (6), 1142-1147 (2007).</li>
<li>Granger, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+uterine+perfusion+pressure+%28RUPP%29+model+for+studying+cardiovascular-renal+dysfunction+in+response+to+placental+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Reduced uterine perfusion pressure (RUPP) model for studying cardiovascular-renal dysfunction in response to placental ischemia.</a> Methods Mol Med. 122, 383-392 (2006).</li>
<li>Mazur, M., Miller, R. H., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+erythropoietin+treatment+mitigates+neural+cell+loss+after+systemic+prenatal+hypoxic-ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Postnatal erythropoietin treatment mitigates neural cell loss after systemic prenatal hypoxic-ischemic injury.</a> J Neurosurg Pediatr. 6 (3), 206-221 (2010).</li>
<li>Olivier, P., Baud, O., Evrard, P., Gressens, P., Verney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+ischemia+and+white+matter+damage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuropathol+Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Prenatal ischemia and white matter damage in rats.</a> J Neuropathol Exp Neurol. 64 (11), 998-1006 (2005).</li>
<li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+changes+induced+by+graded+prenatal+systemic+hypoxic-ischemic+insults+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Developmental changes induced by graded prenatal systemic hypoxic-ischemic insults in rats.</a> Neurobiol Dis. 18 (3), 568-581 (2005).</li>
<li>Rice, D., Barone, S. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+periods+of+vulnerability+for+the+developing+nervous+system%3A+evidence+from+humans+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Critical periods of vulnerability for the developing nervous system: evidence from humans and animal models.</a> Environ Health Perspect. 108, Suppl 3. 511-533 (2000).</li>
<li>Basilious, A., Yager, J., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+outcomes+of+animal+models+of+uterine+artery+ligation+and+relevance+to+human+intrauterine+growth+restriction%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Neurological outcomes of animal models of uterine artery ligation and relevance to human intrauterine growth restriction: a systematic review.</a> Dev Med Child Neurol. 57 (5), 420-430 (2015).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroanatomical%2C+sensorimotor+and+cognitive+deficits+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neuroanatomical, sensorimotor and cognitive deficits in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Brain Pathol. 22 (1), 1-16 (2012).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

A microcoil estenose das artérias ovarianos e uterinas em ambos os cornos uterinos produz hipoperfusão intra-uterino consistente e reprodutível em todas as placentas e fetos. O nível de hipoperfusão pode ser modificado usando suportes com diferentes diâmetros internos. Filhotes nascidos de uma represa em que foi executada estenose da artéria com suportes 0,24 mm de diâmetro interno demonstram IUGR e parto prematuro (ver referência 1 para obter detalhes). Os filhotes apresentam alterações comportamentais e neuroanatômica ...

Lactentes com restrição de crescimento intra-uterino (IUGR) (também conhecido como restrição de crescimento fetal) (peso de nascimento < 10th percentil para a idade gestacional), parto prematuro (nascido em < 37 semanas de gestação), e/ou baixa conta peso (< 2500 g) para a luz quase 10% de todos os recém-nascidos 2,3. Muitas destas crianças apresentam problemas neurológicos, como paralisia cerebral e transtornos globais do desenvolvimento (por exemplo, transtorno déficit/hiperatividade (TDAH) e distúrbios de aprendizagem) 3,4,5. Essas condições têm semelhanças e diferenças em sua etiologia e os resultados. A etiologia da IUGR é multifatorial, e insuficiência placentária, associada com hipoperfusão intra-uterina é considerada a causa mais comum em fetos não-anômala 7. A etiologia do prematuro também é multifatorial, e Corioamnionite é a causa mais frequente 8.
Desconhece-se a influência de leve hipoperfusão intra-uterino (MIUH) no encéfalo em desenvolvimento. Atualmente disponíveis modelos animais de hipoperfusão/isquemia intra-uterina envolvem principalmente a hipoperfusão severa ou grau gradiente de hipoperfusão com ou sem reperfusão 9,10,11. Em ambientes clínicos, no entanto, casos de MIUH são considerados muito mais frequentes do que aqueles que envolvem tais condições severas. Os modelos atualmente disponíveis de MIUH são um modelo roedor envolvendo ligadura de sutura de útero ou a artéria ovárica e um modelo de roedor que envolvem as artérias de ovário bilaterais e aorta tendo patência 12,13, de recorte 14,15,16,17. Uma das desvantagens destes modelos é a extensa variabilidade inter feto, variando de fetos com hipoperfusão profunda para fetos com perfusão quase intacto, dependendo da posição do feto dentro da arcada arterial do útero e artérias dos ovários. Outra desvantagem destes modelos é sua incapacidade de distinguir a posição de cada feto após o nascimento; daí, os pesquisadores não consegue distinguir a gravidade de hipoperfusão intra-uterino experimentada por um cachorro individual após o seu nascimento.
Nós desenvolvemos um modelo do rato de MIUH envolvendo múltiplos de estenose de artéria 1. Envolvimento de metais microbobinas com diâmetro interno de 0,24 mm ao redor das artérias uterinas e dos ovários provoca estenose, mas não de obstrução, dos vasos sanguíneos (Figura 1). Aplicar estes suportes na parte proximal do todas as artérias fornecendo o útero, ou seja, as artérias uterinas e ovarianos bilaterais, embrionárias dia 17 (equivalente a embrionárias semanas 20-25 em seres humanos 18) induz uma diminuição significativa, mas suave o fluxo de sangue para a placenta e fetos. A diminuição do fluxo sanguíneo após bobinas são aplicadas a todos os quatro artérias alimentando o útero em grande parte é os mesmos em cada placenta e feto. A taxa de mortalidade de feto é inferior a 20%. Os filhotes nascem através do trabalho de parto espontâneo 1-2 dias anteriores (embrionário dia 21-22) do que o normal. Quase todos os filhotes nascem exibindo nascimento significativamente mais baixos pesos 1. Volumes de matéria cinzenta e branca são diminuídos sem dano no tecido óbvio 1. Filhotes apresentam atrasada aquisição de reflexos do recém-nascido, fraqueza muscular e alteração espontânea atividade 1. Este modelo imita os sinais e sintomas clínicos de crianças nascidas prematuramente ou com IUGR; exposição de prematuros nascidos filhos reduzida cinza e volume de substância branca, com ou sem substância branca lesão 6, presente atrasado Marcos do desenvolvimento neurológico e pode apresentar problemas comportamentais, tais como TDAH 3,5; crianças com IUGR exibem alterações neuroanatômica mínimas e têm um risco aumentado de anomalias do desenvolvimento neurológico como atraso motor e cognitivo 4,7. Parto prematuro e IUGR são condições diferentes, mas as duas condições compartilham o mecanismo básico, ou seja, insultos ao seu cérebro imaturo antes da idade gestacional de termo.

<table><tbody><tr><td>Estereomicroscópio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Máquina de</td><td></td><td></td><td></td>anestesia isoflurano</tr><tr><td>Caixa</td><td></td><td></td><td></td>de indução</tr><tr><td>de anestesia Almofada</td><td></td><td></td><td></td>de aquecimento</tr><tr><td>Fralda 30x40 cm</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Espuma depilatória ou barbeador</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução desinfetante</td><td></td> <td>de iodo</td><td></td></tr><tr><td>Gaze 10x20 cm&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Campo cirúrgico 45x45 cm com abertura redonda de 5 cm de diâmetro</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Frasco de spray com etanol para desinfecção</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cotonete</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fórceps com pontas</td><td></td><td></td><td></td>grandes e rombas</tr><tr><td>Fórceps</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td></td><td></td><td>com pontas finas angulares Tesoura</td></tr><tr><td>Bisturi cirúrgico, o tamanho da lâmina é de 27 mm de comprimento (no.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japão)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Agulha de sutura</td><td></td><td></td><td></td>cirúrgica</tr><tr><td>Micromolas de metal; diâmetro interno 0,24 mm, feito de aço revestido de ouro (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japão)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura de seda 4-0</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução salina estéril (cloreto</td><td></td> <td>de sódio a 0,9%)</td><td></td></tr><tr><td>Banho-maria</td><td></td><td></td><td></td>de aquecimento</tr><tr><td>Seringas de plástico (50ml) e agulhas (18G)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

um modelo do rato de leve hipoperfusão intra-uterino com estenose microcoil

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

Hipoperfusão/isquemia intra-uterina é uma das principais causas de restrição do crescimento intra-uterino/fetal, parto prematuro e baixo peso ao nascer. A maioria dos estudos desse fenômeno foram realizados em ambos modelos com grave isquemia intra-uterina ou modelos com grau gradiente de hipoperfusão intra-uterina. Nenhum estudo foi realizado em um modelo de uniforme suave intra-uterino hipoperfusão (MIUH). Dois modelos têm sido utilizados para estudos de MIUH: um modelo baseado em ligadura de sutura de ambos os lados da arcada arterial formado com as artérias uterinas e dos ovários, e um modelo transiente com base no recorte as artérias de ovário bilaterais e aorta tendo patência. Esses dois modelos de roedores de MIUH tem algumas limitações, por exemplo, nem todos os fetos são sujeitas a MIUH, dependendo de sua posição no corno uterino. Em nosso modelo MIUH, todos os fetos são submetidos a um nível comparável de hipoperfusão intra-uterina. MIUH foi alcançado por estenose leve de todos os quatro artérias alimentando o útero, ou seja, as artérias uterinas e ovarianos bilaterais.
Estenose arterial foi induzido por suportes de metal enrolado as artérias de alimentação. Produzir estenose arterial com suportes permitida-nos controlar, otimizar e reproduzir a diminuição do fluxo sanguíneo com pouca variabilidade de animal para animal e uma baixa mortalidade, permitindo uma avaliação exata. Quando foram utilizados suportes de 0,24 mm de diâmetro interno, o fluxo de sangue na placenta e feto foi ligeiramente reduzida (cerca de 30% do nível pre-estenose na placenta). A descendência de nosso modelo MIUH claramente demonstra alterações de longa duração em resultados de testes neurológicos, neuroanatômica e comportamentais.

Após a aplicação de suportes para todas as artérias alimentando o útero, ou seja, as artérias uterinas e ovarianos bilaterais, todos os fetos estão sujeitos a níveis comparáveis de hipoperfusão. A aplicação de suportes com um diâmetro interno de 0,24 mm causa estenose leve essas artérias, causando uma leve diminuição no fluxo sanguíneo para a placenta e fetos (Figura 3; cerca de 30% do nível pre-estenose na placenta, ver referência 1 para obter detalhes). Fil...

Leve hipoperfusão intra-uterina foi produzido por estenose da artéria com suportes de metal enrolado as artérias uterinas e dos ovários em ratos em embrionário dia 17. Este procedimento produziu hipoperfusão pré-natal e restrição de crescimento intra-uterino.

Um modelo do rato de leve hipoperfusão intra-uterino com estenose Microcoil

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

O objetivo geral desta intervenção cirúrgica é usar micromolas de metal, enroladas nas artérias uterinas e ovarianas, para induzir estenose arterial para a geração de hipoperfusão intrauterina leve. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da lesão cerebral fetal, como, por exemplo, como a hipoperfusão intrauterina leve influencia o desenvolvimento neural mais tarde na vida? A principal vantagem dessa técnica é que uma ninhada inteira de fetos pode ser submetida a um grau igual de hipoperfusão leve ao mesmo tempo.No dia embrionário 17, coloque uma mãe de rato grávida anestesiada em decúbito dorsal em uma fralda estéril colocada em cima de uma almofada de aquecimento. Confirme a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé e aplique pomada nos olhos do animal. Remova os pelos da região do umbigo até o arco pélvico e use uma gaze embebida em iodo, embebida em desinfetar a pele exposta.Coloque um campo estéril sobre o animal com a abertura redonda sobre a área cirúrgica e use um bisturi para fazer uma incisão cutânea de aproximadamente 2,5 centímetros na parte inferior do abdômen, da borda superior do osso público em direção ao umbigo. Faça uma incisão secundária a

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Neurociência

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Os aneurismas microcirúrgicos da parede lateral em ratos são criados pela anastomose término-lateral de um enxerto aórtico na aorta abdominal. Apresentamos instruções passo a passo e discutimos detalhes anatômicos e cirúrgicos para a criação bem-sucedida de aneurisma sacular experimental.

O Helsinki Rat microcirúrgica Sidewall Aneurysm Modelo

A encefalopatia da prematuridade engloba as anormalidades do sistema nervoso central associadas à lesão do parto prematuro. Este relatório descreve um modelo de rato clinicamente relevante de hipóxia-isquemia sistêmica transitória in utero e administração intra-amniótica de lipopolissacarídeo (LPS) que imita a corioamnionite e o impacto relacionado de estímulos infecciosos e subperfusão placentária no desenvolvimento do SNC.

Modelagem Encefalopatia da Prematuridade Usando pré-natal hipóxia-isquemia com Lipopolysaccharide intra-amniótica em Ratos

O AVC neonatal é uma causa significativa de lesão cerebral precoce, exigindo um modelo translacional com padrões consistentes de lesão focal e alta reprodutibilidade para permitir o estudo. Este estudo descreve o procedimento cirúrgico detalhado para a criação de uma lesão de isquemia-reperfusão focal unilateral não hemorrágica em roedores equivalentes a termo.

Transiente Artéria Cerebral Média Oclusão Modelo de AVC neonatal em ratos P10

Reproduzido de modelos animais experimentais são necessários para o teste de materiais de embolização de romance, que foi criadas para tratar de oclusão endovascular de aneurisma intracraniana (IA). O presente estudo tem como objetivo desenvolver uma técnica cirúrgica segura e padronizada para stent assistida embolização de aneurisma sacular em um modelo animal de rato.

Tratamento de Stent biodegradável magnésio de aneurisma sacular em um modelo do rato - introdução da técnica cirúrgica

A hidrocefalia pós-hemorrágica da prematuridade (PHHP) pode ser modelada em ratos neonatais combinando corioamnionite e hemorragia intraventricular. A combinação desses eventos pré-natais e pós-natais recapitula com precisão as características clínicas da PHHP, incluindo macrocefalia, ventriculomegalia e pressão intracraniana elevada, ao longo da vida.

Modelagem da hidrocefalia pós-hemorrágica da prematuridade em ratos

Uma abordagem multi-facetada para investigar alterações funcionais para circuitos do hipocampo é explicado. Técnicas electrofisiológicas são descritos em conjunto com o protocolo de lesão, testes comportamentais e método de dissecação regional. A combinação destas técnicas pode ser aplicada de forma semelhante para outras regiões do cérebro e perguntas científicas.

Investigações sobre alterações da função Circuito Hippocampal Após lesão cerebral traumática leve

Aqui, apresentamos um protocolo para apresentar um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM).

Um rato do modelo de fadiga Central usando um modificado método de plataforma múltipla

Aprenda a induzir hipoperfusão intra-uterina leve em ratas usando microcois metálicos nas artérias uterinas e ovarianas. Este método padroniza a restrição de fluxo sanguíneo em toda a ninhada para estudar lesões cerebrais fetais.

Um modelo do rato de leve hipoperfusão intra-uterino com estenose Microcoil

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