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JoVE Journal Biology
Absolute Quantification of Plasma MicroRNA Levels in Cynomolgus Monkeys, Using Quantitative Real-time Reverse Transcription PCR

Quantificação absoluta dos níveis plasmáticos de MicroRNA em macacos Cynomolgus, usando o quantitativo em tempo real a transcrição reversa PCR

Full Text
12,022 Views
10:23 min
February 12, 2018

DOI: 10.3791/56850-v

Takuma Iguchi1, Noriyo Niino1, Satoshi Tamai1, Ken Sakurai1, Kazuhiko Mori1

1Medicinal Safety Research Laboratories,Daiichi Sankyo Co., Ltd.

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este relatório descreve um protocolo para medir os níveis absolutos de plasma miRNA, usando quantitativo em tempo real a transcrição reversa PCR com ou sem pré-amplificação. Este protocolo permite melhor entendimento da quantidade de plasma miRNAs e permite a avaliação qualitativa da correspondentes dados de diferentes estudos ou laboratórios.

O objetivo geral deste procedimento é medir os níveis absolutos de MicroRNAs plasmáticos usando PCR quantitativo de transcrição reversa em tempo real. Este método pode ajudar a avaliar a quantidade de microRNAs plasmáticos, mesmo que seu nível de expressão seja baixo. A principal vantagem desta técnica é que os dados medidos podem ser comparados com outros de diferentes estudos ou laboratórios.

As implicações desta técnica se estendem às amostras de outras espécies porque uma curva padrão pode ser gerada usando o RNA sintético ou o nucleotídeo. Este método pode fornecer informações sobre a pesquisa translacional para investigar biomarcadores de segurança promissores. Primeiro, descongele as amostras de plasma congeladas obtidas da veia femoral dos macacos Cynomolgus no gelo.

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