Name: Um modelo murino de nervo ciático na Vivo de invasão Perineural (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
Description: Aprenda a criar um modelo murino in vivo de invasão perineural injetando células de câncer pancreático no nervo ciático de camundongos. Este método permite quantificar a invasão nervosa e explorar mecanismos celulares e moleculares subjacentes.

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Os autores reconhecem os serviços técnicos fornecidos pelo centro de citologia molecular e a facilidade de animais do Memorial Sloan Kettering Cancer Center. Este trabalho foi financiado por doações de NIH CA157686 (para R.J. Wong) e P30 CA008748 (concessão de apoio do Memorial Sloan Kettering Cancer Center).

Todos os procedimentos com animais sujeitos foram aprovados pelo Comitê de uso no Memorial Sloan Kettering Cancer Center e institucional Cuidado Animal.
1. preparação das pilhas de Cancer
<ol><li>Colheita sub Panc02-H7 confluentes com tripsina 0,25% por 5 min a 37 ° C. Colete as células em um tubo de centrífuga de 15 mL. Nota: As células são cultivadas em frasco de T-225, que contém cerca de 12 x 106 células por balão na confluência de 80% e tripsina de 4 mL / frasco é usado.</li>
	<li>Centrifugar as células no x 900 g a 4° C por 5 min. Lave as células por resuspending a célula de pelotas em 1 mL de PBS (pipetando acima e para baixo duas vezes) e a suspensão de transferência para um tubo de microcentrifugadora de 1,5 mL no gelo.</li>
	<li>Centrifugar as células novamente no x 900 g a 4° C por 5 min e desprezar o sobrenadante sem perturbar o sedimento. Manter as células peletizadas no gelo até injeção.</li>
</ol>2. preparação dos ratos e cirurgia
Nota: camundongos C57BL/6J de 8 semanas de idade, masculinos e femininos são usados neste estudo. As condições de cirurgia segue as regras IACUC da nossa instituição. Os instrumentos são esterilizados, a superfície de trabalho cirúrgico é desinfectada, o animal é desinfectado e o cirurgião usa luvas estéreis.
<ol><li>No dia antes da cirurgia, anestesia o mouse usando 2% de isoflurano e em seguida, retire a pele ao longo do comprimento do fêmur do lado dorsal com uma navalha fina ou um agente de remoção química do cabelo.</li>
	<li>No dia da cirurgia, anestesia os ratos usando 2% isofluorano em uma câmara de indução. Confirme o anesthetization por um estímulo de pitada de dedo do pé e uma falta de resposta.</li>
	<li>Aplica o vet pomada nos olhos para evitar a secura sob anestesia.</li>
	<li>Coloque o mouse anestesiado de lado ventral e aperte suavemente cada membro com fita hipoalergênica para criar suave tensão no membro a ser injetado. Anestesia é mantida utilizando isoflurano entregado através de um vaporizador de precisão e cone de nariz.</li>
	<li>Limpe o local da injeção com Betadine, então novamente com álcool a 70%. Repita este processo mais duas vezes. Certifique-se de que nenhum cabelo solto permanece no campo cirúrgico.</li>
	<li>Faça uma incisão de 1 cm com uma tesoura pequena aproximadamente 2mm abaixo e paralelo ao fêmur. Retrai a pele com pinças lateralmente para expor os músculos por baixo.</li>
	<li>O nervo ciático é executado profundo para os músculos glúteos e bíceps femoral. Separar estes dois músculos ao longo de um plano fascial com tesouras pequenas e expor o nervo ciático, por baixo. Livre o nervo dos músculos ao redor usando dissecção romba.</li>
	<li>Retire 3 μL de células de câncer (cerca de 50.000 células) a pelota em uma seringa de 10 μL. Nota: Como alternativa, desenhe 3 μL de PBS como um controle.</li>
	<li>Coloque uma espátula de metal pequena debaixo do nervo no ponto de injeção para apoio. Sob visualização com um microscópio de dissecação, insira a agulha no nervo contra o metal base, mantendo a agulha como paralela ao nervo como possível mediante a inserção. Tenha cuidado para não perfurar através da parte traseira do nervo. Minimize a manipulação do nervo, tanto quanto possível em todo este processo.</li>
	<li>Injetar lentamente no nervo mais 5 s. Uma formação de um bulbo na área de injeção indica uma boa injeção. Então, deixe a agulha no lugar por 3 s antes de retirar a agulha suavemente. Mantendo a agulha no lugar por 3 s minimiza recuo das células do nervo. Nota: A injeção pode ser realizada para o nervo distal ou da medula espinhal. É importante manter a coerência dentro de um conjunto de experiências. Se as células derramar lá fora, o animal não deve ser incluído na análise do experimento. Com experiência, esses eventos são muito raros.</li>
	<li>Retorne o nervo para sua posição original. Cubra a lata com os músculos sobrejacentes. Tratar os ratos com analgesia adequada e em seguida, feche a pele com suturas de Nylon 5-0.</li>
	<li>Coloque o mouse sozinho em uma gaiola limpa em observação durante a recuperação, até que totalmente desperta do anestesia. Nota: Demora de 5-15 min para o animal recuperar a plena consciência. O animal não for deixado desacompanhado até que recuperou a consciência suficiente para manter a prostração esternal. O animal não é retornado para a companhia de outros animais até que se recuperou totalmente. Posteriormente, avalie a recuperação de pelo menos uma vez a cada 24h por 72 h.</li>
</ol>3. o nervo ciático extração
<ol><li>No passado dia 7 #, eutanásia os ratos com CO2. Coloque o mouse de lado ventral e estabilizar os membros distais usando pinos.</li>
	<li>Retire a pele do lado dorsal do membro injetado e tronco.</li>
	<li>Usando a dissecção romba, expor o nervo ciático profundo aos músculos.</li>
	<li>Os cursos do nervo entre o ílio e Sacro. Para ter acesso ao nervo na região da medula espinhal, separe os dois ossos. Primeiro, insira uma tesoura fechada na área estreita, onde se localiza o nervo ciático e então abrir a tesoura, mantendo o mouse. Ser delicado e manter a integridade do nervo ciático durante a dissecção.</li>
	<li>Cuidadosamente, disse o nervo ciático distalmente à extremidade do fêmur e proximal da medula espinhal.</li>
	<li>Nota: Invadiu os nervos são extremamente frágeis e propensos à quebra sob tensão ou manipulação enérgica.</li>
	<li>Colheita do nervo por um primeiro corte sua extremidade distal. Com cuidado, levante o nervo enquanto libertando-o do tecido adjacente. Cortou o nervo na extremidade proximal, tão próximo quanto possível para sua saída da coluna vertebral.</li>
	<li>Registro, em seguida, comprimento bruto de invasão usando um paquímetro. Esta estimativa macroscópica é apenas indicativa.</li>
</ol>4. processamento e quantificação de nervo
<ol><li>Incorpore os nervos dissecados em OCT composto. Faça certeza coloc os nervos longitudinalmente e tão plana na parte inferior do molde quanto possível.</li>
	<li>Indicar o IEF lado proximal e distal do nervo, marcando a letra P e D.</li>
	<li>Coloque os nervos incorporados em cima do gelo seco, se eles não são seccionados imediatamente. Amostra pode ser preservado a-80 ° C durante várias semanas.</li>
	<li>Amostras de seção usando um micrótomo criostato em 5 seções de espessura e lugar μm em lâminas de vidro. Se possível, coloque 2 seções de nervo por slide. Indica o lado proximal do nervo.</li>
	<li>Mancha de slides usando H & E mancha12.</li>
	<li>Digitalmente Digitalize secções nervosas manchada com um scanner de slides que fornece dados digitais de alta resolução.</li>
	<li>Usando o software de imagem, quantificar o comprimento da invasão clicando no botão de distância medida, área de invasão, ou de outros parâmetros de desejado. Para uma boa estimativa do comprimento da invasão, use várias seções (2 a 4) do mesmo nervo.</li>
</ol>

<ol><li>Liebig, C., Ayala, G., Wilks, J. A., Berger, D. H., Albo, D. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19484787">Perineural invasion in cancer.</a> Cancer. 115 (15), 3379-3391 (2009).</li>
<li>Bapat, A. A., Hostetter, G., Von Hoff, D. D., Han, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perineural+invasion+and+associated+pain+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Perineural invasion and associated pain in pancreatic cancer.</a> Nat Rev Cancer. 11 (10), 695-707 (2011).</li>
<li>Deborde, S., Wong, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+Schwann+cells+facilitate+cancer+progression+in+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">How Schwann cells facilitate cancer progression in nerves.</a> Cell Mol Life Sci. 341 (177-186), 1236361-1236416 (2017).</li>
<li>Abiatari, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consensus+transcriptome+signature+of+perineural+invasion+in+pancreatic+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Consensus transcriptome signature of perineural invasion in pancreatic carcinoma.</a> Mol Cancer Ther. 8 (6), 1494-1504 (2009).</li>
<li>Ayala, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+dorsal+root+ganglia+and+human+prostate+cell+line+interaction%3A+redefining+perineural+invasion+in+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">In vitro dorsal root ganglia and human prostate cell line interaction: redefining perineural invasion in prostate cancer.</a> Prostate. 49 (3), 213-223 (2001).</li>
<li>Gil, Z., Cavel, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paracrine+regulation+of+pancreatic+cancer+cell+invasion+by+peripheral+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Paracrine regulation of pancreatic cancer cell invasion by peripheral nerves.</a> J Natl Cancer Inst. 102 (2), 107-118 (2010).</li>
<li>Deborde, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Schwann+cells+induce+cancer+cell+dispersion+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Schwann cells induce cancer cell dispersion and invasion.</a> J Clin Invest. 126 (4), 1538-1554 (2016).</li>
<li>Pour, P. M., Egami, H., Takiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+growth+and+metastases+of+induced+pancreatic+cancer+in+relation+to+the+prognosis+and+its+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Patterns of growth and metastases of induced pancreatic cancer in relation to the prognosis and its clinical implications.</a> Gastroenterology. 100 (2), 529-536 (1991).</li>
<li>Eibl, G., Reber, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+xenograft+nude+mouse+model+for+perineural+invasion+and+recurrence+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">A xenograft nude mouse model for perineural invasion and recurrence in pancreatic cancer.</a> Pancreas. 31 (3), 258-262 (2005).</li>
<li>Stopczynski, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroplastic+changes+occur+early+in+the+development+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Neuroplastic changes occur early in the development of pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> Cancer Res. 74 (6), 1718-1727 (2014).</li>
<li>Gil, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve-sparing+therapy+with+oncolytic+herpes+virus+for+cancers+with+neural+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Nerve-sparing therapy with oncolytic herpes virus for cancers with neural invasion.</a> Clin Cancer Res. 13 (21), 6479-6485 (2007).</li>
<li>Cardiff, R. D., Miller, C. H., Munn, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+hematoxylin+and+eosin+staining+of+mouse+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Manual hematoxylin and eosin staining of mouse tissue sections.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2014 (6), 655-658 (2014).</li>
<li>Cremer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inactivation+of+the+N-CAM+gene+in+mice+results+in+size+reduction+of+the+olfactory+bulb+and+deficits+in+spatial+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Inactivation of the N-CAM gene in mice results in size reduction of the olfactory bulb and deficits in spatial learning.</a> Nature. 367 (6462), 455-459 (1994).</li>
<li>He, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chemokine+%28CCL2-CCR2%29+signaling+axis+mediates+perineural+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The chemokine (CCL2-CCR2) signaling axis mediates perineural invasion.</a> Mol Cancer Res. 13 (2), 380-390 (2015).</li>
<li>He, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GFR%CE%B11+released+by+nerves+enhances+cancer+cell+perineural+invasion+through+GDNF-RET+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22P+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">GFRα1 released by nerves enhances cancer cell perineural invasion through GDNF-RET signaling.</a> P Natl Acad Sci USA. , 02944(2014).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

Neste protocolo, descrevemos no vivo modelo murino de invasão perineural que permite a quantificação da invasão do nervo ciático por células de câncer pancreático. Este modelo permite o estudo dos mecanismos moleculares da invasão de nervo. Usando esta técnica de experiências bem sucedidas requerem uma abordagem cuidadosa para três passos críticos no processo: 1) a injeção de células cancerosas (etapas 2.7, 2.8), 2) a extração dos nervos invadiram (passo 3.4) e 3) processamento dos nervos colhidos (passo 4.1).</...

Os nervos formam um microambiente do tumor específico que estimula o câncer crescimento e migração1,2,3. Invasão perineural (PNI) é o processo através do qual câncer células invadem em e ao redor dos nervos. Pode ser considerado como uma única rota de metástase desde a invasão do câncer estende longe dos locais de origem, ao longo de nervos. PNI é encontrado em vários tipos de câncer, incluindo pâncreas, próstata, cabeça & pescoço, salivar, cervical e cancros colo-rectais com uma incidência variando de 22% a 100%1,2. PNI está associado com dor e se correlaciona com o prognóstico pobre e pior sobrevivência taxas1,2.
Desenvolvimento de modelos de invasão perineural é essencial para elucidar os mecanismos celulares e moleculares deste processo e para testar agentes terapêuticos candidato para diminuir o PNI. Métodos in vitro de estudar as interações entre cânceres e nervos incluem a co-cultura de células de câncer com nervo explantes4, com raízes dorsais gânglios5,6,7ou com células específicas do nervo microambiente como Schwann células7. Abordagens na vivo , no entanto, são mais fisiologicamente relevantes, incluem o uso de modelos de rato de câncer no qual câncer foi induzido ou transplantado e têm a vantagem de contabilidade para o microambiente todo nervo. Em ortotópico modelos de câncer pancreático ou da próstata, PNI tem sido relatado8,9,10 e a incidência de PNI pode ser gravada, mas por causa do pequeno tamanho dos nervos nesses órgãos, é difícil ver a lata inteira e, por conseguinte, para quantificar a extensão do PNI. O modelo que nós descrevemos aqui é um modelo em vivo do PNI no qual câncer células são injetadas para o nervo ciático de ratos através de um procedimento cirúrgico simples11. O transplante heterotópico invade dentro do nervo em direção a medula espinhal. O comprimento da invasão nervo do local da injeção da medula espinhal pode ser medido, bem como o volume do câncer dentro do nervo. Importante, o nervo invadiram também pode ser coletado para uma variedade de ensaios, incluindo análises microscópicas e moleculares. Uma variedade de células de câncer pode ser testada, e os ratos de anfitrião que tenham sido geneticamente modificados ou tratados com compostos específicos podem ser usados também. Este ensaio poderoso permite que as células cancerosas e o microambiente de acolhimento ser modificado para a investigação sobre os mecanismos de PNI.

<table><tbody><tr><td>Número de camundongos</td><td></td><td></td><td>e variável de idade dependendo das necessidades experimentais</td></tr><tr><td>Meios de cultura de células (PBS, tripsina e DMEM + 10% FBS)</td><td>Quaisquer</td><td></td><td>etapas 1.1, 1.2, 1.3.</td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga cônico, 50 mL</td><td>Falcon</td><td>352098</td><td>Etapa 1.1 Tubo</td></tr><tr><td>de microcentrífuga 1,5 mL</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-CS</td><td>Etapa 1.2</td></tr><tr><td>Barbeador elétrico</td><td>WAHL</td><td>9962</td><td>Etapa 2.1. Pode ser substituído por agente de depilação comercial</td></tr><tr><td>Isoflurano, 250 mL</td><td>Baxter</td><td>1001936060</td><td>Passo 2.2</td></tr><tr><td>Fita cirúrgica hipoalergênica</td><td>3M Blenderm</td><td>70200419342</td><td>Passo 2.3</td></tr><tr><td>Betadine Swapsticks</td><td>PDI</td><td>SKU 41350</td><td>Passo 2.4</td></tr><tr><td>Webcol Alcohol Preps</td><td>Covidien</td><td>5110</td><td>Passo 2.4</td></tr><tr><td>Ferramentas cirúrgicas estéreis (tesouras e pinças)</td><td></td><td></td><td>Passos 2.4, 2.5, 3.3, 3.4, 3.5</td></tr><tr><td>10 &mu; Seringa L Hamilton</td><td>Hamilton</td><td>80308</td><td>Passos 2.7, 2.8</td></tr><tr><td>Aço Micro espátula</td><td>Fisher Scientific</td><td>S50823</td><td>Passo 2.7</td></tr><tr><td>Microscópio</td><td></td><td></td> de dissecação <td>Passo 2.7</td></tr><tr><td>Bupivacina, 1 g</td><td>Enzo Life Sciences</td><td>BML-NA139-0001</td><td>Passo 2.9. Reconstituir a 0,5%</td></tr><tr><td>5-0 Sutura de nylon</td><td>Ethicon</td><td>698H</td><td>Passo 2.9</td></tr><tr><td>Composto Tissue-Tek O.C.T. VWR</td><td></td><td>25608-930</td><td>Passo 4.1</td></tr><tr><td>Moldes Tissue-Tek Cryomold</td><td>VWR</td><td>25608-916</td><td>Passo 4.1</td></tr></tbody></table>

um modelo murino de nervo ciático na vivo de invasão perineural

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

As células cancerosas invadem os nervos através de um processo denominado invasão perineural (PNI), na qual câncer células proliferaram em migram no microambiente do nervo. Este tipo de invasão é exibido por uma variedade de tipos de câncer e muito frequentemente é encontrado no cancer pancreatic. O tamanho microscópico das fibras nervosas dentro de pâncreas de rato processa o estudo de PNI difícil em modelos murino ortotópico. Aqui, descrevemos um modelo heterotópica na vivo do PNI, onde nós injetamos a linhagem de células de câncer pancreático syngeneic Panc02-H7 em nervo ciático murino. Neste modelo, os nervos ciático de ratos anestesiados são expostos e injetados com células cancerosas. As células cancerosas invadem nos nervos proximalmente em direção a medula espinhal, do ponto de injeção. Os nervos ciático invadiram então são extraídos e processados com OCT para secionar congelado. H & E e mancha da imunofluorescência dessas seções permitem a quantificação de ambos o grau de invasão e alterações na expressão da proteína. Este modelo pode ser aplicado a uma variedade de estudos sobre o PNI, dada a sua versatilidade. Usar ratos com modificações genéticas diferentes e/ou diferentes tipos de células cancerosas permite para investigação dos mecanismos celulares e moleculares do PNI e para tipos diferentes de câncer. Além disso, os efeitos de agentes terapêuticos na invasão do nervo podem ser estudados através da aplicação de tratamento para estes ratos.

Este método descreve a implantação cirúrgica de células de câncer pancreático em nervo ciático murino para criar um modelo in vivo da invasão de nervo quantificáveis. A Figura 1 ilustra a localização anatômica do nervo ciático e o local da injeção. A Figura 2 mostra os dois nervos ciático de um rato nude. Um nervo de PBS injetado (à esquerda) pode ser comparado a um nervo injetado com células de câncer de MiaPaCa-2 (à di...

Descrevemos no vivo modelo murino de invasão perineural injetando células de câncer pancreático syngeneic no nervo ciático. O modelo permite a quantificação da extensão da invasão do nervo e apoia a investigação dos mecanismos celulares e moleculares de invasão perineural.

Um modelo murino de nervo ciático na Vivo de invasão Perineural

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve ...

O objetivo geral deste procedimento cirúrgico é criar um modelo in vivo de invasão perineural injetando células cancerígenas no nervo ciático de camundongos. A invasão perineural é a invasão de nervos encontrada em muitos tipos de câncer Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre a relação interdependente entre câncer e células nervosas, o que pode promover a progressão e invasão do câncer. A principal vantagem dessa técnica é que ela fornece um modelo in vivo para invasão perineural no qual tanto as células cancerígenas quanto o microambiente nervoso podem ser manipulados e no qual uma invasão pode ser avaliada usando desfechos histológicos, clínicos ou radiográficos.As implicações dessa técnica se estendem à terapia para invasão perineural porque os camundongos hospedeiros podem ser tratados com agentes terapêuticos candidatos. Embora esse método possa fornecer informações sobre o mecanismo molecular da invasão do câncer de pâncreas, ele também pode ser aplicado a outros tipos de células cancerígenas. Os camundongos hospedeiros também podem ser geneticamente modificados, permitindo o estudo do efeito do microambiente nervoso na progressão do câncer.Demonstrando o

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

Neste vídeo, demonstramos o procedimento para desenvolver um modelo de invasão de células cancerígenas perineurais in vitro por co-cultura de gânglio da raiz dorsal de camundongos e células cancerígenas neurotrópicas. O modelo pode ser utilizado para realizar ensaios de câncer, produzindo resultados rápidos e reprodutíveis.

Estabelecendo um modelo tridimensional de co-cultura de gânglios da raiz dorsal murina e células cancerígenas: um modelo in vitro para estudar a invasão de células cancerígenas perineurais

Neste vídeo, desenvolvemos um modelo de camundongo in vivo para invasão perineural injetando células cancerígenas pancreáticas no nervo ciático. Este modelo ajuda a quantificar a extensão da invasão e estudar as interações entre células cancerígenas e nervos.

Modelo de Invasão Perineural Murina: Gerando um Modelo In Vivo para Simular a Invasão Perineural no Nervo Ciático de Camundongo

Neste vídeo, descrevemos o procedimento para estabelecer um modelo murino de invasão perineural injetando células cancerígenas no nervo ciático. O modelo pode ajudar a obter uma compreensão da magnitude da invasão nervosa para avaliação subsequente de medicamentos anticâncer.

Modelo de Invasão Perineural do Nervo Ciático Murino ou PNI: Extração e Processamento do Nervo Ciático para Entender a Invasão por Células Cancerígenas

Medições das propriedades de condução nervosa em vivo exemplificar uma ferramenta poderosa para caracterizar vários modelos animais de doenças neuromusculares. Aqui, apresentamos um protocolo de fácil e confiável pelo qual análise eletrofisiológica em nervo ciático de ratos anestesiados pode ser realizada.

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A dor neuropática é uma conseqüência de uma lesão ou doença que afeta o sistema somatossensorial. O "modelo cuff" da dor neuropática em ratos consiste na implantação de um manguito de polietileno em todo o ramo principal do nervo ciático. A alodinia mecânica é testado usando filamentos de von Frey.

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Este artigo em vídeo mostra o uso do modelo de células cancerígenas (DRG)/gânglios da raiz dorsal no adenocarcinoma ductal pancreático.

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Aqui, apresentamos uma técnica in vivo para transferência de genes para células de Schwann (SCs) no nervo ciático de roedores. Esta técnica simples é útil para investigar os mecanismos de sinalização envolvidos no desenvolvimento e manutenção de SCs mielinizantes.

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A invasão perineural (PNI) é uma característica comum do carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (CECP), conferindo menores taxas de sobrevida. Seus mecanismos são mal compreendidos. Utilizando neuritos gerados a partir de gânglios murinos da raiz dorsal confinados a uma matriz semissólida, as vias envolvidas no PNI de linhagens celulares de CECP podem ser investigadas.

Um Modelo para Perineural Invasion em cabeça e pescoço carcinoma espinocelular

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Modelo de cirurgia de lesão nervosa poupada modificada de dor neuropática em camundongos

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Um Xenoenxerto Ortotópico do Nervo Ciático para Neurofibromatose Tipo 1

Aprenda a criar um modelo murino in vivo de invasão perineural injetando células de câncer pancreático no nervo ciático de camundongos. Este método permite quantificar a invasão nervosa e explorar mecanismos celulares e moleculares subjacentes.

Um modelo murino de nervo ciático na Vivo de invasão Perineural

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