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Photoconversion de célula única no Zebrafish intacta vida
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JoVE Journal Developmental Biology
Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Photoconversion de célula única no Zebrafish intacta vida

Full Text
6,434 Views
09:49 min
March 19, 2018

DOI: 10.3791/57024-v

Lauren Green1,2, Cody J. Smith1,2

1Department of Biological Sciences,University of Notre Dame, 2Center for Stem Cells and Regenerative Medicine,University of Notre Dame

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, apresentamos um protocolo para mostrar como célula photoconversion é conseguida através da exposição UV para áreas específicas, expressando a proteína fluorescente, Eos, em animais vivos.

O objetivo geral desta técnica de fotoconversão é distinguir células únicas em um único animal de outras populações de células fluorescentes. Esse método pode ajudar a responder às principais questões de desenvolvimento no campo e nos permitir visualizar a migração de uma única célula ao longo do tempo. A principal vantagem dessa técnica é que ela é minimamente invasiva e pode ser usada para rotular células únicas ou populações maiores.

Além disso, o usuário pode selecionar a região específica de interesse e converter a foto do alvo desejado. Depois de acasalar o peixe-zebra transgênico macho e fêmea expressando uma proteína fotoconversível e coletando os ovos de acordo com o protocolo de texto, use um microscópio de dissecação com uma fonte de luz de 488 nanômetros e conjuntos de filtros GFP para rastrear 24 embriões hpf. Usando uma agulha ou pinça, descorione manualmente os embriões.

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