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Extração de hemócitos de larvas de Drosophila melanogaster para infecção microbiana e an...
Extração de hemócitos de larvas de Drosophila melanogaster para infecção microbiana e an...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Extraction of Hemocytes from Drosophila melanogaster Larvae for Microbial Infection and Analysis

Extração de hemócitos de larvas de Drosophila melanogaster para infecção microbiana e análise

Full Text
12,618 Views
08:54 min
May 24, 2018

DOI: 10.3791/57077-v

Aoi Hiroyasu1, David C. DeWitt2, Alan G. Goodman1

1School of Molecular Biosciences, College of Veterinary Medicine,Washington State University, 2Integrative Physiology and Neuroscience, College of Veterinary Medicine,Washington State University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este método demonstra como visualizar a invasão do patógeno em células de inseto com modelos tridimensionais (3D). Hemócitos de larvas de Drosophila foram infectados com patógenos virais ou bacterianos, ou ex vivo ou no vivo. Hemócitos infectados foram, em seguida, fixa e manchados para a imagem latente com um microscópio confocal e subsequente reconstrução celular 3D.

Essa técnica pode ajudar a responder a questões-chave no campo da infecção celular e da microbiologia, como a forma como os hemócitos contribuem para a resposta imune geral em moscas-das-frutas. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode ser realizada em laboratório, utilizando larvas previamente infectadas. Alternativamente, hemócitos de larvas não infectadas podem ser usados para infecção ex vivo.

A demonstração visual desse método é crítica porque as etapas de imagem são difíceis de aprender devido às complexidades do microscópio confocal e às opções para reconstrução do modelo 3D. Para iniciar o protocolo, coloque de dois a três pedaços de filme de parafina de dez centímetros por dez centímetros sob um microscópio estéreo. Em seguida, prepare o capilar de vidro ajustando o aquecedor polar capilar para 55% do máximo.

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Imunologia e infecção edição 135 invasão do patógeno extração hematócito microscopia confocal Coxiella burnetii Listeria monocytogenes invertebrados iridescente vírus-6 IIV6

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