February 23rd, 2018
Apresentamos um método eficiente de estudar Alojamento lente usando uma maca de lente manual. A imita protocolo fisiológico Alojamento puxando as zónulas ligado ao redor da cápsula da lente, desse modo, estendendo-se a lente.
O objetivo geral desta técnica é fornecer um método mais viável e barato para estudar com precisão a biomecânica do cristalino. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da biomecânica ocular sobre como o cristalino muda com a perda de acomodação e o aparecimento de presbiopia. A principal vantagem dessa técnica é que ela monitora com precisão a capacidade da lente de acomodar a um baixo custo de material e alta robustez processual.
Depois de obter a amostra do olho, segure firmemente o lado do olho e use uma lâmina de barbear para fazer uma pequena incisão ao longo do lado a três milímetros de distância da córnea profunda o suficiente para alcançar o vítreo. Usando uma tesoura esterilizada, continue cuidadosamente a incisão ao redor da circunstância do olho usando a pinça para remover o tecido posterior do olho depois de excisado. Isole o cristalino, as zônulas e o vítreo anexado usando uma pinça conforme necessário para desconectar as zônulas e o corpo ciliar dos músculos ciliares, mantendo a conexão com a lente.
Em seguida, remova o excesso de vítreo para que a lente possa ficar plana na maca manual da lente. Tome cuidado para manter o cristalino, zônulas e uma quantidade mínima de vítreo intactos enquanto remove o excesso de vítreo. Para montar a maca, insira as solas de 10 milímetros e as partes superiores dos sapatos correspondentes na placa inferior da maca, de modo que permaneça uma folga de cinco mililitros entre a parede traseira do recuo do sapato e o próprio sapato.
Usando uma pinça curva, coloque a lente extraída voltada para cima no meio da placa inferior para que as sapatas apoiem a lente sobre o orifício central. Encaixe a parte superior correspondente dos sapatos no lugar, cortando apenas as zônulas e o vítreo. Em seguida, insira as placas na caixa da placa e o parafuso batente no orifício localizado na lateral da placa inferior e insira a caixa da placa na base.
Para medir a lente, coloque um sistema de imagem diretamente acima do aparelho na distância apropriada para obter imagens e coloque uma régua no campo de visão para o dimensionamento e dimensionamento precisos das imagens no pós-processamento. Em seguida, gire a chave com firmeza, mas suavemente, no sentido horário para esticar a lente e obter imagens da lente. Para garantir a consistência de amostra para amostra, é essencial girar a chave suavemente enquanto estica a lente.
Quando todas as imagens tiverem sido adquiridas, gire a chave no sentido anti-horário para restaurar a amostra ao seu estado de repouso e obter as imagens do estado de repouso final da lente. Para analisar os dados, carregue as imagens no software de análise de imagem apropriado e use o ponto para selecionar pelo menos 40 pontos ao redor da circunferência da lente. No menu de análise, selecione medir para produzir a localização de cada ponto selecionado e ajuste os pontos de localização com o MathLab para produzir um raio e qui-quadrado do ajuste.
Em seguida, use a régua fotografada para converter o raio de pixel e o erro em métricas e execute a análise de teste t bicaudal emparelhada para comparar uma lente individual antes e depois do alongamento. Nesta análise representativa de 10 amostras de olhos suínos, as lentes demonstraram um aumento de mais de 4% em relação aos raios originais, validando o protocolo de alongamento da lente com consistência e precisão da literatura. Quando as lentes humanas foram testadas, foi observada uma diminuição dramática na elasticidade da lente em correlação com a idade do doador, conforme esperado de estudos anteriores de elasticidade da lente.
Uma vez dominada, esta técnica de alongamento da lente pode ser concluída em menos de 10 minutos se for executada corretamente. Ao esticar a lente, é importante lembrar de fornecer uma força de torção contínua até que o parafuso batente seja alcançado para minimizar a variabilidade entre as amostras. Usando esta técnica de alongamento manual da lente, podemos monitorar a rigidez da lente de pacientes com uma variedade de patologias da doença, incluindo pacientes com diabetes, catarata ou presbiopia.
Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da biomecânica ocular explorarem as propriedades do cristalino durante as fases de perda de acomodação e/ou início da presbiopia. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como usar um esticador de lente manual para obter informações biomecânicas valiosas sobre a lente. Não se esqueça de que trabalhar com tecido biológico pode ser extremamente perigoso e que precauções como usar trajes de laboratório adequados e esterilizar todos os instrumentos antes do uso devem sempre ser tomadas durante a realização deste procedimento.
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Este artigo apresenta um método para estudar a acomodação da lente usando um esticador manual de lente. A técnica simula a acomodação fisiológica estirando a lente através das zónulas conectadas à cápsula da lente.
Simulating lens accommodation with a manual lens stretcher enables cost-effective, reproducible investigation of biomechanical changes relevant to presbyopia and other ocular pathologies. This approach supports early-stage target validation and mechanistic de-risking for therapies addressing age-related lens stiffness. The method's streamlined sample requirements and robust quantitative outputs facilitate portfolio-wide evaluation of lens biomechanics in translational research.
This manual lens stretching protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum for ocular biomechanics, supporting both hypothesis-driven research and translational validation.