Estratégias de amostragem e processamento de amostras de tecido do Biobanco de suínos modelos biomédicos

Este vídeo demonstra duas técnicas principais para amostragem e processamento de amostras de tecido suíno de biobanco. A técnica de submersão estima de forma confiável o volume total de órgãos e tecidos e a técnica orientadora gera cortes de tecido isotrópicos aleatórios para estimativa imparcial de parâmetros morfológicos quantitativos. A principal vantagem da técnica de submersão para determinação da densidade do tecido é que ela pode ser aplicada a qualquer tipo de tecido e produz resultados confiáveis para amostras pequenas e grandes.

As vantagens da técnica orientadora são que ela é altamente eficiente e também funciona com grandes amostras de tecido. Para iniciar a volumetria de um órgão grande, retire um pedaço de tecido de tamanho apropriado do órgão. Limpe cuidadosamente a amostra com uma toalha de papel para remover o excesso de sangue e fluido tecidual.

Em seguida, pese a amostra em uma balança de precisão e registre o peso da amostra. Adicione 0,9% de solução salina a um copo de tamanho adequado. Não encha completamente o copo para evitar transbordamento durante a emersão do tecido.

Coloque o béquer na balança e mergulhe uma pinça ou um porta-amostras autoconstruído na solução salina até que a marca na pinça ou no porta-amostras atinja o líquido. Em seguida, redefina a exibição da escala para zero. Prenda cuidadosamente a amostra de tecido à pinça ou suporte de amostra e mergulhe completamente a amostra na solução salina até que a posição marcada seja alcançada.

Para registrar medições de densidade confiáveis, é importante garantir que a amostra esteja completamente submersa e evitar qualquer contato da amostra submersa com as paredes internas ou com o fundo do béquer. Enquanto segura a amostra na posição, registre o peso exibido na balança. Use esta medição e a densidade da solução salina à temperatura ambiente para calcular o volume da amostra.

Em seguida, calcule a densidade da amostra de tecido a partir do peso da amostra e seu volume. Para órgãos e tecidos grandes, como este rim, realize medições repetidas com várias amostras e calcule a densidade média a partir das medições individuais. Para pequenas amostras e pequenos órgãos medidos no total, como a glândula pituitária, repita a medição três vezes antes de calcular a densidade média de órgãos a partir dos valores de medição individuais.

Finalmente, calcule o volume total do órgão, tecido ou compartimento do órgão a partir de seu peso e densidade. Coloque uma amostra de tecido fixo em uma impressão de um círculo equiangular com uma borda paralela à direção de zero a 180 graus. Em seguida, use uma tabela de números aleatórios para determinar um ângulo aleatório.

Encontre as marcas correspondentes na escala do círculo equiangular. Com estas marcas, cortar uma secção através da amostra com o plano de secção orientado paralelamente à direcção do ângulo aleatório indicado na escala do círculo equiangular e vertical à superfície de repouso da amostra. Coloque o bloco de tecido com a superfície da seção voltada para baixo em um círculo ponderado por cosseno.

Com a borda da superfície de repouso colocada paralelamente à direção um-para-um. Agora corte uma nova seção através da amostra em um ângulo aleatório determinado usando a tabela de números aleatórios. O plano de seção resultante é uma seção aleatória uniforme isotrópica.

Este quadro mostra as densidades representativas de vários tecidos e órgãos suínos determinadas pela técnica de submersão. A maioria dos tecidos suínos apresenta valores de densidade ligeiramente superiores a um referente à densidade da água. Já os tecidos que nadam em solução salina, como o tecido adiposo, por exemplo, apresentam densidades inferiores a um.

Esta figura mostra quatro cortes representativos de RIU do miocárdio ventricular esquerdo suíno preparados com a técnica orientadora. Observe os ângulos de corte alterados nas diferentes seções IUR. Uma vez dominada, a técnica de submersão para determinação da densidade do tecido pode ser feita em poucos minutos.

Se for executado corretamente. Cortes de tecido aleatórios uniformes isotrópicos gerados com a técnica orientadora são adequados para a estimativa de quaisquer parâmetros morfológicos quantitativos usando métodos de análise estereológica apropriados. música digital.