Name: Avaliar a Anorexia baseado na atividade em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 26 s
Description: Aprenda a avaliar a anorexia baseada na atividade em camundongos usando rodas de exercício e restrição alimentar. Este método permite investigar os mecanismos neurobiológicos da anorexia nervosa.

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Este trabalho foi financiado por um independente de NARSAD Investigator Award e um IMHRO Rising Star depressão Research Award em memória de George Largay a SCD.

Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo Comitê de uso (IACUC) da Universidade de Califórnia, San Diego e institucional Cuidado Animal.
1. ratos
<ol><li>Escolha a tensão apropriada do mouse para o estudo.</li>
	<li>Comprar ratos um fornecedor ou amplificar uma linha para obter números experimentais apropriados.</li>
	<li>Grupo-casa comprada ratos na instalação de animais pelo menos 1 semana antes de iniciar o estudo para permitir um período de aclimatação amplo.</li>
	<li>Começa a fase de aclimatação pré-experimental em ratos são 8 semanas de idade.</li>
</ol>2. habitação
<ol><li>Escolha as gaiolas que são grandes o suficiente para conter uma roda de execução não-obstruída, recipiente de comida e uma garrafa de água.</li>
	<li>Regule a temperatura e umidade para complementar a hipótese a ser testada. Nota: Temperaturas mais altas reduzem o desenvolvimento da ABA28.</li>
</ol>3. execução de rodas
<ol><li>Escolha as rodas com comunicação sem fio para evitar potenciais distrações e confusões dentro da gaiola, consulte a Tabela de materiais , por exemplo.</li>
</ol>4. garrafas de água
<ol><li>Selecione uma garrafa de água que não irão competir por espaço com a roda de execução ou receptáculo de comida na gaiola em casa.</li>
	<li>Se fornecer tratamento medicamentoso na água potável, fita adesiva a garrafa para criar um ambiente sensível à luz.</li>
</ol>5. alimentos
<ol><li>Selecione um chow de baixo teor de gordura adequado para a hipótese sendo testada (por exemplo, roedor dieta 8604 do Envigo). Nota: As dietas ricas em gordura e açúcar podem reduzir o desenvolvimento de ABA29.</li>
	<li>Use um frasco de vidro pequeno para fornecer comida, cerca de 65 cm no diâmetro x 50 cm de altura. Nota: Um alimentador automático pode ser usado em vez de uma jarra de vidro, que pode reduzir o estresse, limitando a interferência do investigador. Isto pode ser mais vantajoso se realizando estudos de ABA com manipulações de drogas.</li>
</ol>6. fase de aclimatação pré-experimental
<ol><li>Configurar a área experimental, escolhendo um rack gaiola perto os hubs de laptop e roda. Isto limitará a problemas com a transmissão de dados.</li>
	<li>Liga o portátil e hubs sem fio.</li>
	<li>Abra o software de gestão de roda no laptop.<ol>
<li>Olha o software para garantir que ambos os polos estão ativos.</li>
		<li>Abra "ferramentas" e selecione "excluir rodas." Repita este passo 5 vezes.</li>
		<li>Feche o software e, em seguida, reabra-o.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Coloque 3 pilhas AAA para a bateria de uma base de roda.<ol>
<li>Ligue os fios do pack de bateria para o hardware da base da roda. Este será desconectado antes de usar. Feche a bateria na base da roda.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Verifique o software para garantir a base de roda é listado com o ID "1" sob o hub wireless apropriado. Se a base não estiver listada como ID "1", desligar a bateria e recomeçar a passo 6.2.</li>
	<li>Altere a identificação de roda de "1" para a identificação do mouse sob o nome de coluna.</li>
	<li>Aderem a base da roda correndo para o fundo da gaiola com fita adesiva para garantir estabilidade. Não permitem qualquer fita furar para fora, como os ratos vão mastigar na fita exposta.</li>
	<li>Escolha um disco roda executando sem uma peça magnética corroída.</li>
	<li>Coloque a roda na base e gire a roda para verificar o apuramento das paredes da gaiola e grade.</li>
	<li>Gire o disco de um determinado número de rotações para garantir que a roda, executando o software corretamente conta rotações.</li>
	<li>Evitar que pedaços de comida sejam perdidos na cama ou ficar molhado por duto-gravando a parte inferior do frasco do alimento no chão da gaiola, longe da roda de execução e a garrafa de água. Nota: Comida molhada aumenta a ingestão de alimentos em comparação para secar chow30.</li>
	<li>5 lugar pedaços de comida no frasco. Nota: O chow durante a fase de pré-experimental está disponível ad libitum e não precisa ser pesada. Exposição de rodas em execução durante o período de aclimatação pode intensificar a ABA21,31.</li>
	<li>Coloque uma garrafa cheia de água na gaiola e fornecer água ad libitum.</li>
	<li>Repita até que todas as gaiolas têm uma roda de corrente ligada sem fios, comida e água.</li>
	<li>Individualmente coloca ratos em jaulas adequadas.</li>
	<li>A roda de gestão software, vá ao menu "arquivo" e clique em "Iniciar aquisição."</li>
	<li>Cuidado com a atualização de software para garantir as rotações da roda estão sendo contadas e o sistema está funcionando bem.</li>
	<li>ACCLIMATE ratos para as condições de habitação experimental por 2 dias totais.</li>
	<li>Avalie os ratos durante esta fase para garantir que estão saudáveis o suficiente para lidar com o experimento de ABA.</li>
	<li>Ver gaiolas para qualquer inundação das garrafas de água de cada dia. Se garrafas têm inundado, substituir a antiga gaiola com uma gaiola nova e repita as etapas necessárias para aderir as rodas e comida da gaiola sem interferência.</li>
	<li>No dia 2, verifique as gaiolas para os níveis de alimentos. Se a comida é baixa, reabasteça com 2 pedaços de comida. Fazer isto sem perturbar os ratos. Nota: Se durante a fase de aclimatação pré-experimental qualquer mouse está exibindo hipofagia ou está abaixo do peso, remova o mouse do estudo.</li>
</ol>7. experimental de base fase - dia 1
<ol><li>Selecione "fim", e então "aquisição" do software de gestão de roda.</li>
	<li>Medir chow 9g num copo de plástico pequena em uma escala com sensibilidade de 0.00 g. Registre o peso exato.</li>
	<li>Delicadamente, retire e pesar o mouse num copo de plástico grande em uma escala com sensibilidade de 0.0 g. Peso recorde. Nota: É fundamental limitar o stress de ratos durante a manipulação, portanto, lidar com eles pacientemente.</li>
	<li>Elimine todos os alimentos de aclimatação.</li>
	<li>Busca fundamento para qualquer alimento que pode ter sido removido do frasco e dispose disso também.</li>
	<li>Deixe a garrafa de água no lugar, mas certifique-se de está devidamente cheio.</li>
	<li>Limpo sujo correndo rodas com toalhas de papel e isopropanol 70%.</li>
	<li>Se a limpeza era necessário, depois o isopropanol seca, retornar o mouse para sua gaiola e substituir a gaiola na prateleira.</li>
	<li>Repita essas etapas até que todos os ratos é pesado e 9 g de alimento é medido e colocado em gaiolas.</li>
</ol>8. experimental de base fase - dias 2-7
<ol><li>Retornar para as instalações de animais, ao mesmo tempo todos os dias. Não variam em medições por mais ou menos de 10 min.</li>
	<li>Medir chow 9g num copo de plástico pequena em uma escala com sensibilidade de 0.00 g. Registre o peso exato.</li>
	<li>Delicadamente, retire e pesar o mouse num copo de plástico grande em uma escala com sensibilidade de 0.0 g. Peso recorde.</li>
	<li>Puxe o boião fora da gaiola e despejar toda a comida em um béquer pequeno na escala de 0,00 g.<ol>
<li>Se fezes e roupa de cama estão no pote de comida com a comida, pegue todas as roupas de cama e fezes. Use um filtro pequeno para esfregar o alimento em pó para o copo de pesagem. Remova qualquer fezes antes de fazer isso com uma pinça (se necessário). Nota: Roupa de cama não quebrará acima em pedaços menores para caber através do filtro.</li>
		<li>Pesquisar todos os restos de comida na gaiola e adicioná-los para o béquer a pesar. Registre a quantidade de alimento restante. Nota: Se o fundamento e a gaiola devem ser pesquisados, é melhor fazê-lo enquanto o mouse está na gaiola béquer ou transferência de peso para reduzir o stress.</li>
		<li>Elimine todos os alimentos.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Limpe o frasco e coloque de volta na gaiola. Se necessário, substitua a fita.</li>
	<li>Coloque o 9g previamente medido de novos alimentos na jarra.</li>
	<li>Limpa sujas correndo rodas com isopropanol 70%, depois seque as rodas. Fazer esta um gaiola de cada vez e não acidentalmente trocar as rodas.</li>
	<li>Terminar e reiniciar a aquisição em roda, executando o programa todos os dias.</li>
	<li>Repita estes passos até o início da fase de restrição.</li>
</ol>9. experimental restrição fase - dia 1
<ol><li>Final e começo de aquisição do software de gestão de roda.</li>
	<li>Pese a comida velha e nova de ratos, por protocolo de linha de base.</li>
	<li>
Não limpe rodas agora. Isto pode distrair os ratos durante seu período de alimentação limitado.</li>
	<li>Permita o acesso a novos alimentos, 9g de chow, por 6 h. Recorde a comida de tempo é oferecida. Nota: O tempo durante o ciclo de luz que comida está disponível irá afetar o desenvolvimento da ABA. Desde que os ratos normalmente dormem durante o ciclo de luz, dando acesso à comida durante este tempo agrava o desenvolvimento da ABA, desde que os ratos não consomem geralmente a maioria dos seus alimentos diários neste momento. Por outro lado, ratos dados acesso comida durante o ciclo escuro mais lentamente desenvolverá a ABA32. Ajustar a duração do acesso de alimentos resultará em mais ou mais curta sobrevivência vezes (Figura 2). Alimento atividade antecipatória (FAA) é hiperatividade, que ocorre imediatamente antes que o alimento é oferecido32,33,34. FAA pode afetar o desenvolvimento da ABA, como tem sido demonstrado que a negação da roda executando acesso durante FAA a melhora a ABA comportamento32.<ol>
<li>Remova a comida exatamente 6 h mais tarde para cada mouse e medir a quantidade restante. Recorde a comida de tempo é removida.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Limpe as rodas agora, se necessário e tentar fazê-lo sem ficar em puxar a comida das jaulas subsequentes.</li>
	<li>Comida de pesar e calcular a diferença em alimento para determinar a quantidade de comida ingerida por rato.</li>
	<li>Calcule o peso do abandono para cada rato. Nota: O peso do abandono é quando um mouse deve ser removido do experimento quando atingir 75% de sua medição final de linha de base do peso de corpo. Por exemplo, se um rato pesa 20g no início da fase de restrição, quando ele atinge 15 g ele deve ser removido do experimento.</li>
	<li>Manter uma cópia do encaixe pesos na mão na instalação de animais. Nota: Experimentos avaliando recuperação de ABA podem ser tentados; comida também é fornecida ad libitum, ou rodas estão bloqueadas para estudar o processo pelo qual os ratos retornam para um corpo saudável peso34.</li>
</ol>10. experimental restrição fase - dias 2 a 14
<ol><li>Repeti todos os passos de medição no protocolo 1 dia de restrição. Não reinicie aquisição de roda.</li>
	<li>Se um rato atinge soltar peso (75% do seu peso de corpo da linha de base), remover o frasco de roda e comida da gaiola e fornecer ampla comida no fundo da gaiola, então prosseguir com os outros ratos. Uma vez que todas as gaiolas têm sido participou, eutanásia em todos os ratos que chegaram ao peso da gota.</li>
	<li>Deixe a roda para cada rato para a duração do experimento.</li>
	<li>Verifica cada mouse diariamente para todos os ferimentos. Se necessário, cortar as unhas dos pés danificadas, tratar feridas, pessoal de cuidados com animais etc. pergunte para o Conselho, se não tiver certeza sobre como proceder com uma lesão.</li>
</ol>11. terminando o estudo
<ol><li>Se o estudo durou 14 dias, pese todos os ratos no dia 15. Peso do 1º dia de restrição é considerado um peso de linha de base. Nota: O comprimento do estudo pode ser modificado para atender a hipótese a ser testada. Longos períodos de acesso de comida de duração podem ser usados para estender a duração do estudo.</li>
	<li>Eutanásia em ratos, se necessário.</li>
	<li>Leve o equipamento sujo para quartos adequados.</li>
	<li>Acaba com aquisição de contagem roda no dia 15 para fornecer 10 dias completos de dados.</li>
	<li>Desligue, cubos de roda sem fio.</li>
	<li>Extrair dados.</li>
	<li>Analise os dados.</li>
</ol>

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<li>Beneke, W. M., Schulte, S. E., Vander Tuig, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+excessive+running+in+the+development+of+activity+anorexia%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">An analysis of excessive running in the development of activity anorexia.</a> Physiol Behav. 58 (3), 451-457 (1995).</li>
<li>Dixon, D. P., Ackert, A. M., Eckel, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of%2C+and+recovery+from%2C+activity-based+anorexia+in+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Development of, and recovery from, activity-based anorexia in female rats.</a> Physiol Behav. 80 (2-3), 273-279 (2003).</li>
<li>Klenotich, S. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22395732">Olanzapine, but not fluoxetine, treatment increases survival in activity-based anorexia in mice.</a> Neuropsychopharmacology. 37 (7), 1620-1631 (2012).</li>
<li>Ho, E. V., Klenotich, S. J., McMurray, M. S., Dulawa, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity-Based+Anorexia+Alters+the+Expression+of+BDNF+Transcripts+in+the+Mesocorticolimbic+Reward+Circuit%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Activity-Based Anorexia Alters the Expression of BDNF Transcripts in the Mesocorticolimbic Reward Circuit.</a> PLoS ONE. 11 (11), 0166756(2016).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

O experimento de ABA pode ser modificado por experimentadores para testar diferentes cepas, idades, drogas e várias outras variáveis de an rolamento na variabilidade genética mente, ajustes para o período de acesso de alimentos ou execução roda iria aumentar ou diminuir a severidade da os sintomas e a taxa de abandono. Isso pode servir para aumentar ou diminuir o comprimento do experimento, dependendo a questão experimental de interesse.
Medição precisa da ingestão de alimentos é uma parte crí...

Desde 1953, roedores têm sido relatados para mostrar uma hiperatividade paradoxal sobre a execução de rodas quando eles recebem acesso gratuito às rodas enquanto atravessava hipofagia voluntária quando a disponibilidade de alimento é restrita1. Por outro lado, roedores não cair rapidamente em peso corporal quando ofereceu comida em uma programação sem rodas em execução ou quando alojados com rodas em execução e ofereceu comida ad libitum1,2,3. O modelo de ABA confiantemente resulta em declínios dramáticos em peso corporal hipofagia, hipotermia, perda de estro e maior estimulação do eixo HPA4. Em última análise, ABA resulta em morte, a menos que o assunto é removido do paradigma5. O paradigma da ABA fornece a pesquisadores com um modelo animal de nitrato, um complexo distúrbio alimentar, que apresenta grave dysregulation do apetite-comportamento, afetando aproximadamente 1 em cada 100 fêmeas e uma porcentagem menor de machos6. Pacientes que sofrem de AN frequentemente exibem hiperatividade, consistindo de quantidades extremas de exercício e/ou inquietação geral7,8. Com uma taxa de mortalidade de cerca de 10%, AN tem a maior taxa de mortalidade entre todos os transtornos psiquiátricos,9. Tratamento atual para AN é limitado às terapias cognitivas, como não há nenhum tratamento farmacológico aprovado para aqueles que sofrem de uma de10,11.
AN, normalmente, tem sido considerada como uma desordem que afeta principalmente as fêmeas. Como um diagnóstico que é 10 vezes mais provável em fêmeas do que machos, assuntos fêmeas são tradicionalmente o foco em um12. No entanto, atenção especial deve ser tomada na exclusão machos do estudos. Enquanto o diagnóstico de uma permanece baixa em machos, Dismorfia muscular (MD) é uma condição que tem muitas semelhanças com AN, em que a imagem corporal é distorcida e dieta é muitas vezes desordenada. Há suporte para a noção de que a MD e nitrato podem ser classificados em um semelhante maneira13,14,15. Isto pode sugerir que alguns casos de MD representam a "versão masculina" de AN. No contexto de modelos animais, alguns relatos sugerem que os machos são mais suscetíveis do que as fêmeas ao paradigma da ABA. Por exemplo, um estudo recente mostrou uma maior taxa de mortalidade e diminuição da ingestão de alimentos em comparação com fêmeas de camundongos C57Bl/616. Um preditor de susceptibilidade a ABA é a atividade física espontânea (SPA). Ratos com maior ou menor SPA são mais propensos a perder peso no paradigma da ABA, com ratos machos, mostrando um efeito mais forte do que as fêmeas17. Por outro lado, roedores femininos foram observadas para exercer mais do que os machos durante a fase de restrição da ABA18. Além disso, estudos com camundongos Balb/cJ têm demonstrado o efeito oposto de camundongos C57Bl/6, onde os ratos fêmeas têm uma maior taxa de mortalidade e diminuição da ingestão de alimentos em comparação com os machos (Figura 1)6. Com diferentes resultados entre os sexos no paradigma da ABA e aumentar a consciência dos machos com desordenada comendo padrões, assuntos masculinos e femininos devem ser testados.
Além de diferenças do sexo no paradigma da ABA, idade e tensão devem ser considerados na escolha de temas. Adolescentes ratos podem mais precisamente modelo AN, desde AN geralmente surge na adolescência, como observado com ratos e camundongos19,20,21,22. As tensões que são mais ativas do que outros em um nível de base têm uma maior taxa de suscetibilidade e severidade da ABA23. Cepas, conhecidas por ter níveis mais elevados de ansiedade, tais como DBA/2, aumentaram roda executando a atividade, o que indicaria uma taxa mais rápida do abandono na ABA paradigma24. Dependendo do design experimental, a estirpe de escolha pode ser adaptada para maximizar a duração da ABA.
O paradoxo da ABA não é exclusivo para os ratos. Outros mamíferos, incluindo ratos, hamsters, gerbils, porcos, esquilos e cobaias demonstraram este fenômeno6. A conservação do fenómeno da ABA do outro lado espécies mamíferas sugere que o paradigma da ABA pode fornecer uma ferramenta de translação para investigar os mecanismos subjacentes a anorexia, como comportamento em seres humanos. Ratos em particular são well-suited para o estudo dos mecanismos subjacentes a ABA. Ratos podem ser alojados densamente e tempo de geração é relativamente curto. Os ratos têm um genoma completamente sequenciado, e numerosas tensões inbred, outbreds e especiais, tais como congenics, estão disponíveis. Foi gerado um grande número de linhas geneticamente manipuladas, tornando-os ideais para estudos de avaliação genética influencia sobre transtornos tais como an dependendo sobre a questão em apreço, pesquisadores podem manipular a expressão complexa de circuitos e/ou gene neural para avaliar o comportamento no paradigma da ABA, potencialmente, respondendo perguntas sobre influência genética que não são possíveis ao estudar os seres humanos.
Um número limitado de modelos animais de AN existem atualmente. Modelos de estresse induzem hipofagia em roedores usando cauda beliscar, induzida pela novidade hipofagia, piscina fria e estimulação cerebral. Através da indução de estresse, mudanças de eixo HPA diminuem o apetite, resultando em corpo reduzido peso25. No entanto, o eixo HPA também potente é estimulado pela ABA, que também incorpora recursos adicionais de nitrato como hiperatividade. Outro modelo a considerar no estudo AN é o modelo de restrição alimentar crônica. Limitando a comida a um intervalo de 40 a 60% dos ad libitum, pode-se imitar a resposta fisiológica a desnutrição26. Embora este método é eficaz para estudar os efeitos da alimentação inadequada, ele não reproduz uma questão central do AN, que é uma restrição alimentar voluntária. No paradigma da ABA, os animais são privados de acesso de alimentos por parte do dia, mas também voluntariamente reduzem a ingestão de alimentos se uma roda também está presente. Modelos genéticos também têm sido usados para examinar a etiologia da an pesquisadores encontraram fatores neuroquímicos e genéticos implicados na AN, tais como o gene BDNF e neurotransmissores dopamina e serotonina27. O uso de modelos genéticos é crucial para entender os mecanismos neurais subjacentes AN. No entanto, estudos de associação ampla de genoma para AN não deram ainda sucessos significativos, e não raras variantes em AN foram identificadas. Estudos futuros devem combinar uma abordagem genética com o modelo de ABA para aumentar a compreensão dos fenótipos relacionados com AN.
Desenvolvimento de modelos animais para transtornos psiquiátricos inteiras é praticamente impossível devido à complexidade e heterogeneidade de distúrbios humanos. No entanto, por modelagem de componentes específicos, bem definidos de um transtorno psiquiátrico, exclusivos insights sobre a neurobiologia ou fisiopatologia subjacente podem ser obtidos. Tais ideias biológicas podem ser usadas para identificar novos tratamentos. O paradigma de ABA roedor, portanto, fornece uma ferramenta pré-clínicos para estudar os mecanismos subjacentes que eticamente não pode ser estudado em seres humanos, tais como os efeitos de manipulações genéticas, perturbações de circuitos neurais, AN-como o comportamento e o consequências de certos fatores ambientais.

<table><tbody><tr><td>Rodas de corrida sem fio de baixo perfil, hubs, software</td><td>Med Associates</td><td>ENV-047</td><td></td></tr><tr><td>Standard Teklad Rodent Chow</td><td>Envigo</td><td>8604</td><td></td></tr><tr><td>Ratos de 8 semanas</td><td>Jackson Laboratories</td><td>Balb/cJ</td><td>Cepa usada em nosso estudo - Pode usar outras cepas para avaliar ABA</td></tr><tr><td>Scout Pro Scale 200 g</td><td>Ohaus</td><td>SPE202</td><td>Usado para pesar ratos</td></tr><tr><td>Scout Pro Scale 400 g</td><td>Ohaus</td><td>SPE402</td><td>Usado para pesar alimentos</td></tr></tbody></table>

avaliar a anorexia baseado na atividade em ratos

Assessing Activity-based Anorexia in Mice

Roedores desenvolvem anorexia baseado na atividade (ABA) quando exposto a um horário de alimentação restrito e permitiu o livre acesso à execução de uma roda. Estas condições levam a uma redução de risco de vida no peso corporal. No entanto, roedores expostos a única dessas condições, finalmente, adaptar-se para re-estabelecer o peso corporal normal. Apesar de aumento executando juntamente com a redução na ingestão de alimentos voluntária parecer paradoxal sob condições de ABA, ABA comportamento é observado através de numerosas espécies de mamíferos.
O paradigma da ABA fornece um modelo animal para a anorexia nervosa (AN), um transtorno alimentar com grave dysregulation do apetite-comportamento. Assuntos são alojados individualmente com acesso gratuito à execução de uma roda. Cada dia, o assunto é oferecido comida para uma quantidade limitada de tempo. Durante o curso do experimento, o peso corporal de um sujeito diminui de alta atividade e baixa ingestão calórica. A duração do estudo varia de acordo com quanto tempo o alimento é oferecido diariamente, o tipo de alimento oferecido, a cepa de rato, se drogas estão sendo testadas e fatores ambientais.
A falta de tratamentos farmacológicos eficazes para um pacientes, sua baixa qualidade de vida, alto custo de tratamento e sua alta taxa de mortalidade indicam a urgência de uma pesquisa mais adicional AN. Nós fornecemos um esboço básico para a realização de ABA experimentos com ratos, oferecendo um método para investigar o comportamento de AN para desenvolver novas terapias. Este protocolo é otimizado para uso em camundongos Balb/cJ, mas pode ser facilmente manipulado para outras tensões, proporcionando grande flexibilidade em trabalhar com perguntas diferentes, especialmente a relacionada com fatores genéticos da ABA.

Fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), uma proteína que contribui para a regulação da alimentação, bem como a manutenção de peso, é reduzido no soro de pacientes com um35. Este experimento avaliou os efeitos da alimentação programada, executando acesso de roda ou ambos na expressão de BDNF no hipocampo (HPC), área tegmental ventral (VTA), núcleo accumbens (NAc) e córtex pré-frontal medial (mPFC). Expressão da molécula de adesão celular neuronal 1 (NCAM1) ta...

Ratinhos alojados individualmente com uma roda de execução enquanto dado acesso limitado ao alimento desenvolvem reduções no consumo de alimentos e aumentam a atividade na roda de execução. Este fenômeno experimental é chamado anorexia baseado na atividade. Este paradigma fornece uma ferramenta experimental para estudar a neurobiologia e comportamentos subjacentes aspectos da anorexia nervosa.

Avaliar a Anorexia baseado na atividade em ratos

Rodents develop activity-based anorexia (ABA) when exposed to a restricted feeding schedule and allowed free access to a running wheel. These conditions ...

O objetivo geral deste experimento é examinar a neurobiologia e o comportamento subjacentes à anorexia nervosa. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da psiquiatria relacionadas a transtornos alimentares, como quais são os fundamentos neurais da anorexia nervosa e quais circuitos cerebrais estão envolvidos. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode ser usada para estudar alguns mecanismos subjacentes da anorexia, que não podem ser avaliados em humanos.Configure uma área experimental escolhendo um rack de gaiola próximo ao laptop e aos cubos das rodas. Isso limitará os problemas com a transmissão de dados. Agora ative a conexão entre os cubos das rodas e o software.Primeiro, abra o software de gerenciamento de rodas para garantir que ambos os hubs sem fio estejam ativos. A partir do software, redefina as conexões de roda padrão. Abra as ferramentas e selecione excluir rodas.Repita esta etapa cinco vezes, feche o software e abra-o novamente. Em seguida, forneça energia para as rodas. Conecte os fios da bateria ao hardware da roda e insira as baterias na base da roda.Então dê uma olhada no software. A distância entre eixos deve ser listada com o ID de u

assessing-activity-based-anorexia-in-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Construção de galerias, de nidificação e açambarcamento são espécies típicas atividades que os ratos prontamente executar em laboratório. Este artigo descreve como podem ser simplesmente mais barato avaliados. Estes protocolos são extremamente sensíveis à tensão mouse, lesões cerebrais e doenças. Além disso, eles constituem "enriquecimento ambiental" para os ratos, e encarnar o "refinamento" aspecto do "3 Rs" 18.

Avaliar buraqueira, Construção Nest, e Hoarding em Ratos

Atividade locomotora (LMA) é uma medida simples e de fácil execução de comportamento em camundongos. O acoplamento do software de rastreamento de vídeo (VTS) e LMA permite a melhoria da especificidade e sensibilidade, especialmente quando comparado com o manual, o método de análise cruzando a linha de LMA. Além disso VTS permite o acompanhamento a longo prazo de rato LMA.

Rato de curto e longo prazo da atividade locomotora analisados ​​pelo software Rastreamento Vídeo

Níveis de atividade de campo aberto são usados ​​para avaliar os níveis de atividade de locomotivas e comportamentais. Este protocolo fornece um bem concebido, protocolo padronizado para usar em ensaios pré-clínicos para doenças neuromusculares.

Medidas comportamentais e do aparelho locomotor Usando um sistema aberto Activity Monitoring Campo de Doenças músculo-esquelético

Aqui apresentamos um protocolo para induzir anorexia baseada em atividade (ABA) em camundongos adolescentes fêmeas. ABA é uma condição de hiperatividade evocada pela imposição de restrição alimentar a roedores com acesso a uma roda de corrida. Esse fenômeno está sendo usado como modelo para estudar a neurobiologia subjacente da anorexia nervosa.

Usando a Anorexia Rodent modelo baseado em atividades para estudar a base neurobiológica da Anorexia Nervosa

Desenvolvemos um protocolo para avaliar o bem-estar em ratos durante procedimentos com anestesia geral. Uma série de parâmetros comportamentais, indicando níveis de bem-estar, bem como metabólitos de glicocorticoides foram analisados. O protocolo pode servir como uma ajuda geral para estimar o grau de gravidade de forma científica, centrada no animal.

Avaliação sistemática de bem-estar em camundongos para procedimentos com anestesia geral

Este protocolo descreve o uso de um analisador de composição do corpo e sistema de monitoramento animal metabólico para caracterizar a composição corporal e parâmetros metabólicos em camundongos. Um modelo de obesidade induzido pelo alto teor de gordura alimentar é usado como um exemplo para a aplicação dessas técnicas.

Composição corporal e análise de enjaulamento metabólico em ratos de alta gordura Fed

Este manuscrito descreve um protocolo para medir a taxa metabólica basal e a capacidade oxidativa de adipócitos termogênicos em camundongos obesos.

Determinando o gasto energético basal e a capacidade de adipócitos termogênicos para gastar energia em camundongos obesos

Modelos de roedores são ferramentas valiosas para estudar comportamentos centrais relacionados ao transtorno do espectro do autismo (TEA). Neste artigo, expomos dois testes comportamentais para modelar as principais características do TEA em camundongos: auto-limpeza, que avalia o comportamento repetitivo, e o teste de interação social de três câmaras, que documenta deficiências sociais.

Estratégias para avaliar comportamentos semelhantes aos autistas em camundongos

Ao integrar quatro estressores sociais diários, o presente estudo descreve um modelo de estresse social integrado múltiplo (MISS) para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas. Após dez dias de exposição repetida ao MISS, os camundongos desenvolveram fenótipos depressivos e ansiosos, fornecendo assim um modelo animal natural baseado em etiologia para estudar transtornos psiquiátricos em mulheres.

Um modelo de estresse social integrado múltiplo para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas

Um modelo de compulsão alimentar foi estabelecido em camundongos usando acesso intermitente a M&amp;M's (um alimento altamente palatável feito de gordura e açúcar). Camundongos com acesso intermitente a esse alimento rico em gordura e açúcar mostraram comportamentos semelhantes ao estresse, aumento da ingestão calórica e preferência por esse alimento em relação à ração padrão em comparação com camundongos com acesso contínuo ou nenhum acesso ao alimento.

Modelo de ingestão periódica intermitente em camundongos

Aprenda a avaliar a anorexia baseada na atividade em camundongos usando rodas de exercício e restrição alimentar. Este método permite investigar os mecanismos neurobiológicos da anorexia nervosa.

Avaliar a Anorexia baseado na atividade em ratos

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