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DOI: 10.3791/57435-v
Emma Teal1, Nina G. Steele2, Jayati Chakrabarti1, Loryn Holokai3, Yana Zavros1
1Department of Pharmacology and Systems Physiology,University of Cincinnati, 2Department of Cell & Developmental Biology,University of Michigan, 3Department of Molecular Genetics, Biochemistry & Microbiology,University of Cincinnati
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui descrevemos um protocolo para o estabelecimento e cultivo humano e rato derivada de 3-dimensional organoids gástrica (3D) e o método de transferência de organoids 3D para um monolayer 2-dimensional. O uso da monocamada epitelial gástrica como um romance ensaio de zero-ferida para estudos de regeneração também é descrito.
O objetivo geral deste sistema de cultura é gerar uma monocamada gástrica primária derivada de camundongos ou humanos para o estudo da regeneração em um ensaio de cicatrização de feridas. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo gástrico, como o mecanismo de regeneração das células epiteliais gástricas em resposta a lesões. A principal vantagem desta técnica é, em primeiro lugar, o estudo da migração e regeneração celular em um ensaio de cicatrização de feridas, gerado a partir de células gástricas primárias de camundongos ou de origem humana, e a segunda geração de organoides gástricos de origem humana para experimentos em larga escala.
Embora esse método possa fornecer informações sobre a regeneração do epitélio gástrico, ele também pode ser aplicado a outros sistemas, como infecção por helicobacter pylori e co-culturas de células imunes epiteliais. Demonstrando o procedimento estará Emma Teal, uma estudante de pós-graduação do meu laboratório. Para começar, colete o tecido preparado em um grande recipiente de plástico cheio de DPBS livre de cálcio e magnésio.
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