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DOI: 10.3791/57525-v
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Este protocolo descreve um método recentemente estabelecido para a entrega do vírus para a próstata murino. Usando tecnologia CRISPR/Cas9, superexpressão do gene ou entrega de recombinase Cre, a técnica permite ortotópico alteração da expressão gênica e implementa um modelo de romance do rato para câncer de próstata.
O objetivo geral deste procedimento cirúrgico é alterar a expressão gênica na próstata murina pela entrega viral de guias CRISPR Cas9 para indução do câncer de próstata. Este método pode ajudar a abordar novas questões na biologia do câncer de próstata no que diz respeito à análise e validação de novos genes em um ambiente in vivo. As principais vantagens dessa técnica é que ela permite a edição rápida de vários genes, visando apenas um subconjunto das células prostáticas como visto no cenário humano.
Alguém que é novo no procedimento pode ter dificuldades no início por causa do tamanho do órgão e da precisão necessária para uma conclusão cirúrgica bem-sucedida. Para preparar um volume total de 5 mililitros de anestésico, misture 0,15 mililitros de um mg por mililitro de cloridrato de medetomidina, 0,4 mililitros de 5 mg por mililitro de midazolam e 0,25 mililitros de 10 mg por mililitro de butorfenol. Em seguida, adicione 4,2 mililitros de água salina estéril.
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