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Entrega de vírus de CRISPR guias de próstata murino para alteração do Gene
Entrega de vírus de CRISPR guias de próstata murino para alteração do Gene
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JoVE Journal Cancer Research
Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration

Entrega de vírus de CRISPR guias de próstata murino para alteração do Gene

Full Text
9,177 Views
06:21 min
April 27, 2018

DOI: 10.3791/57525-v

Maria Riedel1, Martin F. Berthelsen1, Latifa Bakiri2, Erwin F. Wagner2, Martin K. Thomsen1

1Department of Clinical Medicine,Aarhus University, 2GDD, Cancer Cell Biology Program,National Cancer Research Center (CNIO)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo descreve um método recentemente estabelecido para a entrega do vírus para a próstata murino. Usando tecnologia CRISPR/Cas9, superexpressão do gene ou entrega de recombinase Cre, a técnica permite ortotópico alteração da expressão gênica e implementa um modelo de romance do rato para câncer de próstata.

O objetivo geral deste procedimento cirúrgico é alterar a expressão gênica na próstata murina pela entrega viral de guias CRISPR Cas9 para indução do câncer de próstata. Este método pode ajudar a abordar novas questões na biologia do câncer de próstata no que diz respeito à análise e validação de novos genes em um ambiente in vivo. As principais vantagens dessa técnica é que ela permite a edição rápida de vários genes, visando apenas um subconjunto das células prostáticas como visto no cenário humano.

Alguém que é novo no procedimento pode ter dificuldades no início por causa do tamanho do órgão e da precisão necessária para uma conclusão cirúrgica bem-sucedida. Para preparar um volume total de 5 mililitros de anestésico, misture 0,15 mililitros de um mg por mililitro de cloridrato de medetomidina, 0,4 mililitros de 5 mg por mililitro de midazolam e 0,25 mililitros de 10 mg por mililitro de butorfenol. Em seguida, adicione 4,2 mililitros de água salina estéril.

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