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Geração do primeiro coração campo-como progenitores cardíaca e Cardiomyocytes Ventricular, como d...
Geração do primeiro coração campo-como progenitores cardíaca e Cardiomyocytes Ventricular, como d...
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Generation of First Heart Field-like Cardiac Progenitors and Ventricular-like Cardiomyocytes from Human Pluripotent Stem Cells

Geração do primeiro coração campo-como progenitores cardíaca e Cardiomyocytes Ventricular, como de células-tronco pluripotentes humanas

Full Text
7,543 Views
08:37 min
June 19, 2018

DOI: 10.3791/57688-v

Michael S. Yu*1,2, Sean Spiering*1, Alexandre R. Colas1

1Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute, 2Department of Bioengineering,University of California at San Diego

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a scalable method for generating cardiac progenitors and cardiomyocytes from human pluripotent stem cells using Activin A and Id1-overexpression. The technique allows for the production of cells with defined heart field origins, suitable for various research applications.

Key Study Components

Area of Science

  • Cardiac biology
  • Stem cell research
  • Cell-based therapies

Background

  • Cardiac progenitors are essential for heart development.
  • Human pluripotent stem cells can differentiate into various cardiac cell types.
  • Current methods for generating cardiomyocytes can be complex and inefficient.
  • Activin A and Id1-overexpression provide a novel approach to enhance cardiac differentiation.

Purpose of Study

  • To develop a simple and scalable method for generating cardiac progenitors.
  • To produce ventricular-like cardiomyocytes from human pluripotent stem cells.
  • To facilitate research in developmental biology and cardiac disease modeling.

Methods Used

  • Coating wells of a 96-well plate with a coating reagent.
  • Detaching pluripotent stem cells using a dissociation reagent.
  • Neutralizing the dissociation reagent with PBS containing calcium and magnesium.
  • Transferring cell suspensions for subsequent viral infection steps.

Main Results

  • Successfully generated cardiac progenitors with defined origins.
  • Produced ventricular-like cardiomyocytes suitable for research.
  • Demonstrated the scalability of the method.
  • Highlighted potential applications in cell-based therapy and disease modeling.

Conclusions

  • The method provides a reliable approach for cardiac cell generation.
  • It opens avenues for further research in cardiac biology.
  • Future studies can explore the therapeutic potential of generated cells.

Frequently Asked Questions

What are cardiac progenitors?
Cardiac progenitors are precursor cells that can differentiate into various cardiac cell types, essential for heart development.
How does this method improve upon existing techniques?
This method simplifies the process of generating cardiac cells and enhances scalability, making it more accessible for research.
What applications can the generated cells be used for?
The cells can be used in developmental biology studies, cell-based therapies, and modeling cardiac diseases.
Who conducted the study?
The study was conducted by Sean Spiering and Michael Yu from the laboratory of the principal investigator.
What is the significance of using human pluripotent stem cells?
Human pluripotent stem cells have the potential to differentiate into any cell type, making them valuable for regenerative medicine and research.
What role does Activin A play in this method?
Activin A is used to promote the differentiation of pluripotent stem cells into cardiac progenitors.

Aqui nós descrevemos um método dimensionável, usando uma simples combinação de Activin A e mediada por lentivirus Id1-superexpressão, para gerar a primeiras progenitores cardíaca como campo de coração e cardiomyocytes ventricular, como de células estaminais pluripotentes humanas.

A principal vantagem dessa técnica simples é gerar progenitores cardíacos e cardiomiócitos de origem e subtipos de campo cardíaco definidos. Por sua vez, as células resultantes podem ser usadas para uma ampla gama de aplicações de pesquisa, incluindo biologia básica do desenvolvimento, terapia baseada em células de prova de conceito e estudos de modelagem de doenças cardíacas. Demonstrando o procedimento estarão Sean Spiering e Michael Yu do meu laboratório.

Para começar, cubra poços suficientes de uma placa de 96 poços com 50 microlitros de reagente de revestimento para acomodar as etapas subsequentes de semeadura celular e infecção viral e, em seguida, adicione um mililitro de reagente de dissociação a um poço na placa de seis poços para separar as células-tronco pluripotentes semeadas. Em seguida, use uma pipeta estéril para transferir a suspensão celular em um tubo de centrífuga de plástico de 15 mililitros. No tubo, adicione cinco mililitros de PBS contendo cálcio e magnésio para neutralizar o reagente de dissociação.

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