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DOI: 10.3791/57723-v
Giulia Quattrocolo1, Maria Isaac2, Yajun Zhang2, Timothy J. Petros2
1Kavli Institute for Systems Neuroscience and Centre for Neural Computation,Norwegian University of Science and Technology, 2Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development,National Institutes of Health
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study investigates how environmental changes impact the fate and maturation of interneuron precursors in postnatal mouse pups. The protocol details the harvesting and transplantation of these precursors from distinct brain regions to assess neuronal development.
Desafio jovens neurônios em novas regiões do cérebro pode revelar importantes insights sobre como o ambiente esculpe, maturação e destino neuronal. Este protocolo descreve um procedimento para colheita precursores interneurônio de regiões específicas do cérebro e transplantá-las de qualquer homotopically ou heterotopically para o cérebro dos filhotes pós-natal.
O objetivo geral deste procedimento é colher precursores de interneurônios de regiões cerebrais distintas em filhotes de camundongos pós-natais e transplantar essas células em receptores pareados por idade para avaliar como as mudanças ambientais influenciam o destino e a maturação dos interneurônios. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da neurociência do desenvolvimento sobre como os programas genéticos intrínsecos e os sinais ambientais interagem para esculpir o destino das células neurais. A principal vantagem dessa técnica é que as alterações no destino e na maturação dos precursores de interneurônios podem ser analisadas após sua transferência adotiva para um novo ambiente cerebral.
A demonstração visual das etapas de colheita e enxerto de células é crítica porque pequenos erros na técnica podem levar a experimentos de transplante ineficientes e malsucedidos. Para começar, coloque uma lâmina de barbear no lobo frontal anterior de um cérebro de filhote de cachorro pós-natal e lâminas de barbear adicionais nas ranhuras logo posteriores à primeira lâmina de barbear para gerar duas fatias de 0,5 milímetro. Transfira as fatias estriatais para uma placa de Petri com sacarose borbulhada, líquido cefalorraquidiano artificial ou sACSF e coloque o tecido cerebral restante em uma placa de Petri com sACSF no gelo.
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