Name: Ácido oleico-injeção nos suínos como um modelo para a síndrome respiratória aguda (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: Aprenda a induzir lesão pulmonar aguda em suínos por injeção venosa central de ácido oleico, modelo para síndrome do desconforto respiratório agudo. Este protocolo utiliza ultrassom guiado para acessos vasculares precisos.

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Os autores querem agradecer Dagmar Dirvonskis por excelente suporte técnico.

Todos os experimentos animais descritos aqui foram aprovados pelo Comitê institucional e estaduais cuidado animal (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Koblenz, Alemanha; número de aprovação 077-G14-1) e foram conduzidos de acordo com as diretrizes do Sociedade Europeia e alemã de Ciências de animais de laboratório. Os experimentos foram realizados em suínos machos anestesiados (sus scrofa domestica) de idade de 2-3 meses, pesando 27-29 kg.
1. anestesia, intubação e ventilação mecânica
<ol><li>Reter comida para 6 h antes da anestesia para reduzir o risco de aspiração, mas permitir o livre acesso à água para reduzir o stress.</li>
	<li>Para sedação, injete uma combinação de cetamina (4 mg kg-1) e azaperona (8 mg kg-1) no pescoço ou o músculo glúteo do porco com uma agulha para injeção intramuscular (20 G) enquanto o animal está na caixa do animal. Atenção: Use luvas ao trabalhar com o animal.</li>
	<li>Inserir o cateter de veia periférica (20 G) em uma veia da orelha após a desinfecção local com álcool.</li>
	<li>Injete o fentanil (4 µ g kg-1), propofol (3 mg kg-1) e atracúrio (0,5 mg kg-1) por via endovenosa para a indução da anestesia.</li>
	<li>Quando o porco parar de respirar, coloque-o em posição supina na maca e imobilizá-lo com ligaduras.</li>
	<li>Começa a monitorar a saturação periférica de oxigênio (SpO2) pelo recorte do sensor, em uma das orelhas ou cauda do animal.</li>
	<li>Ventilar o porco com uma máscara de ventilação cães, tamanho 2, com uma pressão inspiratória de pico abaixo de 20 cm H2O, um positivo e pressão expiratória (PEEP) de 5 cm H2O, uma frequência respiratória de 14-16/min e uma fração inspiratória de oxigênio (FiO2) de 1.0.</li>
	<li>Iniciar uma infusão contínua com solução eletrolítica balanceada (5 mLkg-1 h-1), propofol (8-12 mg kg-1 h-1) e fentanil (0.1-0.2 mg kg-1 h-1) para manter a anestesia.</li>
	<li>Para a intubação, prepare um tubo endotraqueal comum adequado para o animal (ex., peso de 25-30 kg, diâmetro interno do tubo endotraqueal (ID) 6-7 mm) armado com introdutor do tubo endotraqueal e um laringoscópio comum com um Macintosh lâmina 4. Nota: Duas pessoas são necessárias para a intubação.</li>
	<li>Pessoa 1: Retire a língua com uma mão e pressione o focinho dorsalmente com o outro.</li>
	<li>Pessoa 2: Inserir o laringoscópio e avançá-lo como de costume até a epiglote entra em modo de exibição.</li>
	<li>Puxe o laringoscópio ventralmente para visualizar as cordas vocais. Nota: Às vezes a epiglote "paus" para o Palatino macio. Neste caso, é mobilize com a ponta do tubo.</li>
	<li>Insira o tubo pelas cordas vocais e puxe para fora o introdutor.</li>
	<li>Bloquear a braçadeira do tubo com uma seringa com 10 mL de ar.</li>
	<li>Conecte o tubo do ventilador.</li>
	<li>Verifique o posicionamento correto do tubo por exalação regular de dióxido de carbono (CO2) com capnografia e ventilação igual de ambos os pulmões com ausculta.</li>
	<li>Iniciar ventilação mecânica (volume corrente positiva PEEP 5 cm H20, 6-8 mL/kg, FiO2 para manter a saturação periférica de oxigênio (SpO2) entre 94-98%17, ritmo respiratório para manter a pressão final da maré de dióxido de carbono (etCO 2) entre 35-45 mmHG).</li>
</ol>2. instrumentação
<ol><li>Recolha as patas traseiras com ataduras para esticar a pele acima da área femoral para catheterizing os navios necessários.</li>
	<li>Preparar uma seringa de 5 mL, uma seringa de 10 mL, agulha de uma Seldinger 3 bainhas de introdutor (5 Fr, 6 Fr, 8 Fr) com fios-guia, um cateter venoso central com 3 portas (7 Fr, 30 cm) com fio-guia e um cateter de artéria pulmonar (7,5 Fr, 110 cm).</li>
	<li>Generosamente, desinfete a área femoral com desinfectante de pele aplicando uma limpeza técnica em baixo.</li>
	<li>Preencha completamente os cateteres com solução salina.</li>
	<li>Coloque a sonda de ultra-som sobre o ligamento inguinal direita e varredura para vasos femorais.</li>
	<li>Transformar a sonda 90° para visualizar totalmente a artéria femoral no eixo longo.</li>
	<li>Canule artéria femoral direita sob visualização do ultra-som em linha com agulha de Seldinger. Nota: Existem diferentes maneiras de obter acesso vascular com ou sem o ultrassom. Guiada por ultra-som vascular canulação não é necessária para este modelo.</li>
	<li>Quando pulsando brilhante sangue flui para fora, introduzir o fio guia e retire a agulha.</li>
	<li>Visualizar a veia femoral e Canule a veia sob aspiração contínua e visualização de ultra-som em linha com a agulha.</li>
	<li>Quando o sangue venoso é aspirable, desconecte a seringa e insira o fio de orientação.</li>
	<li>Retire a agulha.</li>
	<li>Verifique a posição dos fios com ultra-som.</li>
	<li>Inserir a bainha do introdutor arterial (5 Fr) e cateter venoso central, usando a técnica de Seldinger (para obter detalhes sobre a técnica de Seldinger, consulte método publicado18).</li>
	<li>Repetir a punção venosa e arterial do outro lado e inserir as bainhas de introdutor usando a técnica de Seldinger´s, conforme descrito acima (artéria 6 Fr, veia 8 Fr).</li>
	<li>Conectar-se a bainha do introdutor arterial e cateter venoso central para um sistema transdutor adequado ao equipamento de controlo.</li>
	<li>Calibrar o monitoramento invasivo contra atmosfera (zero), abrindo os três-maneira-torneiras para a atmosfera e pressione Zero tudo no monitor.</li>
	<li>Volte as três-maneira-torneiras para medir a hemodinâmica.</li>
	<li>Iniciar a monitoração hemodinâmica.</li>
	<li>Coloque todos os transdutores de pressão na altura da aurícula direita.</li>
	<li>Alternar a infusão de propofol (8-12 mg kg-1 h-1) e fentanil (0.1-0.2 mg kg-1 h-1) para uma das portas da linha venosa central para manter a anestesia.</li>
</ol>3. ultra rápida medida da pressão parcial de oxigênio (pO2)
Nota: A medida de pO2 com a sonda para ultra rápida pO2-medição não é obrigatório, mas ajuda a visualizar as alterações em tempo real na pO2.
<ol><li>Software Visualizador NeoFox aberto e clique em Opções.</li>
	<li>Escolha a guia de calibração e clique no botão de Calibração aberto .</li>
	<li>Escolha o arquivo de calibração e clique em abrir e baixar.</li>
	<li>Confirme a janela pop-up clicando Sim.</li>
	<li>Abra o diálogo de Opções .</li>
	<li>Escolha a guia de calibração e clique em calibração de ponto único.</li>
	<li>Digite 21% no campo de oxigênio e a temperatura no campo de temperatura.</li>
	<li>Clique em usar atual Tau e Download. Depois, confirme a janela pop-up clicando Sim.</li>
	<li>Introduza a sonda para medições ultra rápidas de pO2 através da bainha do introdutor arterial esquerdo.</li>
</ol>4. INSERIR O CATETER DE ARTÉRIA PULMONAR
<ol><li>Verifique o balão do cateter de artéria pulmonar por danos.</li>
	<li>Conecte ao sistema transdutor adequado ao equipamento de controlo.</li>
	<li>Calibre a pressão arterial pulmonar monitoramento contra a atmosfera (zero), abrindo a torneira de 3-vias para a atmosfera e pressione Zero no monitor.</li>
	<li>Volte a torneira de três vias para medir a pressão arterial pulmonar.</li>
	<li>Começa a monitorar a pressão arterial pulmonar.</li>
	<li>Inserir o cateter de artéria pulmonar através da bainha do introdutor venoso esquerdo (balão desinflado).</li>
	<li>Quando o cateter de artéria pulmonar passa através da bainha introdutora, insufle o balão com 1 mL de ar.</li>
	<li>Avance o cateter de artéria pulmonar e monitorar as formas de onda típicas (vasos venosos, átrio direito, ventrículo direito, artéria pulmonar e pressão de encravamento capilar pulmonar). Esvazie o balão e verificar, se é possível aspirar sangue através de todas as portas do cateter de artéria pulmonar. Nota: Para obter instruções detalhadas sobre como inserir o cateter de artéria pulmonar, consulte anterior publicação19.</li>
</ol>5. indução de lesão pulmonar
<ol><li>Preparar a solução de ácido oleico: 0,1 mL kg-1 de ácido oleico em um 20ml seringa e conectá-lo a uma torneira de 3 vias.</li>
	<li>Tomar 2 mL de sangue em outra seringa de 20 mL e adicionar soro fisiológico para um volume total de 20ml em ambas as seringas.</li>
	<li>A segunda seringa também Conecte a torneira de 3 vias. Atenção: Usar luvas e óculos de proteção quando trabalhar com ácido oleico.</li>
	<li>Prepare a norepinefrina (0,1 mg/mL) para infusão contínua e para injeção em bolus (10 µ g/mL).</li>
	<li>Ligue a bomba de seringa de norepinefrina a uma das portas do cateter venoso central sem iniciá-lo.</li>
	<li>Iniciar o ultra rápida pO2-medição.</li>
	<li>Antes da indução da lesão pulmonar, registre os valores (de base) de todos os parâmetros relevantes.</li>
	<li>Definido o FeuO2 como 1.0 e realizar uma manobra de recrutamento pulmonar (platô pressão 40 cm H2O para 10 s).</li>
	<li>Ligue a torneira de 3 vias à porta proximal do cateter de artéria pulmonar.</li>
	<li>Homogeneiza o ácido oleico e a mistura de sangue/soro fisiológico injectando-o repetidamente de uma seringa para o outro através da torneira de 3 vias e continue misturando o tempo todo.</li>
	<li>Quando é uma emulsão homogênea, Injete 2 mL da emulsão e continue misturando. Nota: Se a mistura for interrompido, a emulsão pode separar em um lipofílico e uma parte hidrofílica.</li>
	<li>Estreitamente, monitorar a hemodinâmica após a injeção de ácido oleico e manter a norepinefrina na mão. Se necessário, dar norepinefrina como injeção em bolus (10-100 µ g) ou infusão contínua para manter a pressão arterial média acima de 60 mmHg.</li>
	<li>Repetir a injeção de 2 mL da solução de todos os 3 min até que a pressão parcial arterial de oxigênio (PaO2) / FiO2-relação é abaixo de 200 mmHg.</li>
	<li>Se a seringa está vazia antes do PaO2/FiO2-relação entre 100 e 200 mmHg, preparar 2 seringas mais conforme descrito na etapa 5.1.</li>
	<li>Espere 30 min e re-avaliar o PaO2/FiO2-relação. Se é ainda mais de 200 mmHg, repita as etapas até PaO2/FiO25.5-5.8-relação cai entre 100 e 200 mmHg.</li>
	<li>Se PaO2/FiO2-relação é entre 100 e 200 mmHg, esperar 30 minutos e verifique novamente.</li>
	<li>Se for persistente abaixo de 200 mmHg iniciar a experiência de tratamento, caso contrário preparar 2 seringas mais conforme descrito na etapa 5.1 e repita etapas 5.5-5,9.</li>
	<li>Conjunto de ventilação de acordo com as sugestões do SDRA rede20.</li>
</ol>6. fim do experimento e eutanásia
<ol><li>Injetar 0,5 mg de fentanil Adicionalmente à anestesia contínua e aguarde 5 min. injetar 200 mg de propofol e 40 mmol de cloreto de potássio para abater o animal em anestesia profunda.</li>
</ol>

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Todos os autores não divulgar nenhum conflito de interesses financeiro ou de qualquer outro.

Este artigo descreve um método de lesão pulmonar induzida por ácido oleico como um modelo para o estudo de vários aspectos da SDRA severa. Existem também outros protocolos com diferentes emulsões, locais de injeção diferentes e diferentes temperaturas da emulsão23,24,25,26,27,28 ,29. Nosso ...

A síndrome respiratória aguda (Sara) é uma síndrome de cuidados intensivos que tem sido extensivamente estudada desde sua primeira descrição há cerca de 50 anos1. Este corpo de pesquisa levou a um melhor entendimento da fisiopatologia e faz com que o desenvolvimento da SDRA, resultando em melhor atendimento e resultado2,3. No entanto, a mortalidade em pacientes que sofrem de SDRA permanece muito alta, com cerca de 35-40%4,5,6. O fato de que cerca de 10% das admissões de ICU e 23% dos pacientes de UTI que necessitam de ventilação mecânica é devido a SDRA ressalta a relevância de novas pesquisas neste campo.
Modelos animais são amplamente utilizados na pesquisa para examinar as alterações fisiopatológicas e possíveis modalidades de tratamento para diferentes tipos de doenças. Devido à complexidade da SDRA, não há nenhum único modelo animal para imitar esta doença, mas modelos diferentes, que representam diferentes aspectos7. Um modelo bem estabelecido é a injeção de ácido oleico (OAI)-induzido por lesão pulmonar. Este modelo tem sido utilizado em uma grande variedade de animais, incluindo ratos8ratos9, porcos10, cães11e ovelhas12. Ácido oleico é um ácido graxo insaturado e o ácido graxo mais comum no corpo de humanos saudáveis13. Ela está presente em uma de plasma, as membranas das células e tecido adiposo humano13. Fisiologicamente, que está vinculado a albumina, enquanto é realizado através da corrente sanguínea13. Aumento dos níveis de ácidos graxos na corrente sanguínea está associado a diferentes patologias e a gravidade de algumas doenças correlaciona-se com soro ácido graxo níveis13. O ácido oleico SDRA-modelo foi desenvolvido na tentativa de reproduzir a SDRA causada por embolia lipídica como visto em pacientes de trauma14. Ácido oleico tem efeitos directos sobre receptores imunes inatos no pulmões13 e gatilhos acúmulo de neutrófilos15, mediador inflamatório produção16e célula morte13. Fisiologicamente, o ácido oleico induz rapidamente progressiva hipoxemia, aumento da pressão arterial pulmonar e acumulação de água extravascular pulmonar. Além disso, induz a hipotensão arterial e depressão miocárdica7. As desvantagens deste modelo são a necessidade de acesso venoso central, a questionável relevância mecanicista e progresso potencial letal causada por hipoxemia rápida e depressão cardíaca. A vantagem deste modelo em relação aos outros modelos é a usabilidade em pequenos e grandes animais, a reprodutibilidade válido dos mecanismos fisiopatológicos na SDRA, o início agudo de SDRA após a injeção de ácido oleico, e a possibilidade de estudar isolado SDRA sem inflamação sistêmica como em muitos outro sepse modelos7. No artigo a seguir, damos uma descrição detalhada da lesão pulmonar induzida por ácido oleico em suínos e fornecer dados representativos para caracterizar a estabilidade dos compromissos da função pulmonar. Existem diferentes protocolos para a lesão pulmonar induzida por OAI. O protocolo fornecido aqui é capaz de induzir confiantemente a lesão pulmonar aguda.

<table><tbody><tr>Torneira <td>de 3 vias azul</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Suécia</td><td>394602</td><td></td></tr> torneira de <tr><td>3 vias vermelha</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Suécia</td><td>394605</td><td></td></tr><tr><td>Atracurium</td><td>Hikma Pharma GmbH , Martinsried</td><td>4262659</td><td></td></tr><tr><td>Cânula 20 G</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Espanha</td><td>301300</td><td></td></tr><tr><td>Datex Ohmeda S5</td><td>GE Healthcare Finland Oy, Helsínquia, Finlândia</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Desinfecção</td><td>Sch&uuml; lke & Mayr GmbH, Alemanha</td><td>104802</td><td></td></tr><tr><td>Tubo endotraqueal</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malásia</td><td>112482</td><td></td></tr><tr><td>Introdutor de tubo endotraqueal</td><td>R&uuml; sch</td><td>5033062</td><td></td></tr><tr><td>Engstr&ouml; m Carestation</td><td>GE Heathcare, Madison USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fentanil</td><td>Janssen-Cilag GmbH, Neuss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gloves</td><td>Paul Hartmann, Alemanha</td><td>9422131</td><td></td></tr><tr><td>Linha de incetomato 150 cm</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>9004112</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Hameln Pharmaceuticals GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laringoscópio</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malásia</td><td>671067-000020</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de monitoramento de pressão lógica</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MX9606</td><td></td></tr><tr><td>Logicath 7 Fr 3-lumen 30cm</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MXA233x30x70-E</td><td></td></tr><tr><td>Masimo Radical 7</td><td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 EUA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Máscara para cães ventilados</td><td>Henry Schein, Alemanha</td><td>730-246</td><td></td></tr><tr><td>Neofox Kit</td><td>Ocean optics Largo, FL EUA</td><td>NEOFOX-KIT-PROBE</td><td></td></tr><tr><td>Norepinefrina</td><td>Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH</td><td>73016</td><td></td></tr><tr><td>Ácido oleico</td><td>Applichem GmbH Darmstadt, Alemanha</td><td>1,426,591,611</td><td></td></tr><tr><td>Seringa Perfusor Original 50ml Luer Lock</td><td>B.Braun Melsungen AG, Alemanha</td><td>8728810F</td><td></td></tr><tr><td>PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm</td><td>Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA</td><td>744F75</td><td></td></tr><tr><td>Conjunto introdutor de bainha percutânea 8,5 und 9 Fr, 10 cm com válvula de hemostasia integral/porta lateral</td><td>Arrow international inc. Reading, PA, USA</td><td>AK-07903</td><td></td></tr><tr><td>Perfusor FM Braun</td><td>B.Braun Melsungen AG, Alemanha</td><td>8713820</td><td></td></tr><tr><td>Cloreto de potássio</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>6178549</td><td></td></tr><tr><td>Propofol 2%</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>B.Braun Melsungen AG, Alemanha</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem</td><td>Sonosite Bothell, WA, EUA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stainless Macintosh Tamanho 4</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malásia</td><td>670000</td><td></td></tr><tr><td>Sterofundin</td><td>B.Braun Melsungen AG, Alemanha</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stresnil 40mg/ml</td><td>Lilly Germany GmbH, Seringa de Saúde</td><td></td><td></td>Animal Abteilung Elanco</tr><tr><td>10 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Espanha</td><td>309110</td><td></td></tr><tr><td>Seringa 2 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Espanha</td><td>Seringa 300928</td><td></td></tr><tr><td>20 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Espanha</td><td>Seringa 300296</td><td></td></tr><tr><td>5 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Espanha</td><td>309050</td><td></td></tr><tr><td>cateter venoso 22G</td><td>B.Braun Melsungen AG, Alemanha</td><td>4269110S-01</td><td></td></tr></tbody></table>

Ácido oleico-injeção nos suínos como um modelo para a síndrome respiratória aguda

Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome

A síndrome respiratória aguda é uma doença de relevantes cuidados intensivos com uma incidência variando entre 2,2% e 19% dos pacientes de cuidados intensivos. Apesar dos avanços de tratamento nas últimas décadas, os pacientes SDRA ainda sofrem taxas de mortalidade entre 35 e 40%. Ainda há uma necessidade de novas pesquisas melhorar o resultado dos pacientes que sofrem de SDRA. Um problema é que não há modelo único animal pode imitar o complexo pathomechanism da síndrome respiratória aguda, mas existem vários modelos para estudar diferentes partes dele. Injeção de ácido oleico (OAI)-lesão pulmonar induzido é um modelo bem estabelecido para o estudo de estratégias de ventilação, distribuição de mecânica e ventilação/perfusão pulmonar em animais. OAI leva a troca do gás gravemente prejudicado, deterioração da mecânica pulmonar e o rompimento da barreira alveolo-capilar. A desvantagem deste modelo é a controversa relevância mecanicista deste modelo e a necessidade de acesso venoso central, que é um desafio especialmente em modelos animais menores. Em resumo, induzida por OAI pulmão lesão leva a resultados reprodutíveis em pequenos e grandes animais e, portanto, representa um modelo adequado para o estudo de SDRA. No entanto, uma pesquisa mais adicional é necessária para encontrar um modelo que imita todas as partes da SDRA e carece de problemas associados com os diferentes modelos existentes hoje.

PaO2/FiO2-proporção diminui após a aplicação fracionada de ácido oleico (Figura 1). No estudo apresentado, 0.185 ± 0,01 ml kg-1 ácido oleico foi necessária para a indução da lesão pulmonar. Todos os animais mostraram uma oxigenação prejudicada após a indução da lesão pulmonar, com variedades na época mais curso. No animal 1 e 3, permaneceu em um nível com pequenas flutuações; no animal 2, observamos um aumento inicial, seguido...

Neste artigo, apresentamos um protocolo para induzir a lesão pulmonar aguda em porcos por injeção venosa central de ácido oleico. Este é um modelo animal estabelecido para estudar a síndrome respiratória aguda (Sara).

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit ...

Este método pode ajudar a responder perguntas-chave sobre as mudanças fisiofisiológicas que ocorrem durante a ARDS para o desenvolvimento e avaliação de novas opções de tratamento para esta doença. A principal vantagem dessa técnica é que ela reproduz as mudanças patológicas básicas observadas na ARDS humana. Para instrumentação guiada por ultrassom, coloque uma sonda de ultrassom no ligamento inguinal direito do porco experimental e procure vasos femorais.Gire a sonda 90 graus para visualizar totalmente a artéria femoral no eixo longo e use uma agulha de Seldinger para cannular a artéria femoral direita sob visualização de ultrassom em linha. Quando pulsar o sangue brilhante flui para fora, introduza o fio de orientação e retraia a agulha. Verifique se o posicionamento do fio do Seldinger está correto visualizando-o com ultrassom.Visualize a veia femoral e cannulate a veia sob a ultrassonografia em linha em aspiração contínua com a agulha. Quando o sangue venoso for capaz de ser aspirado, insira o fio de Seldinger e retraia a agulha. Use a técnica de Seldinger para inserir uma baia introdutor arterial 5-francesa e cateter venoso essencial e girar as torneiras de três vias correspondentes para trás.Antes de inserir o cateter da artéria pulmonar, verifique se ele está funcionando corretamente e insira-o através da baia introdutor venosa esquerda. Quando o cateter da artéria pulmonar tiver passado pela baia introdutora, infle o balão com um mililitro de ar e avance o cateter da artéria pulmonar enquanto monitora as formas de onda típicas. Em seguida, esvazie o balão e verifique se o sangue pode ser aspirado através de todas as portas do cateter da artéria pulmonar.Em seguida, insira a sonda para medição ultrarrápida da pressão parcial de oxigênio através da baia introdutor arterial direita. Para induzir lesões pulmonares, carregue uma seringa de 20 mililitros com 0,1 mililitros por quilograma de ácido oleico e uma segunda seringa de 20 mililitros com dois mililitros de sangue recém-extraído. Adicione soro fisiológico à seringa com sangue, a um volume total de 20 mililitros em ambas as seringas e conecte ambas as seringas a uma torneira de três vias.Conecte uma bomba de seringa de norepinefrina a uma porta do cateter venoso central e inicie uma medição parcial de pressão de oxigênio ultrarrápida. Regissua os valores básicos de todos os parâmetros relevantes e coloque a fração de oxigênio inspirado em 1.0. Faça uma manobra de recrutamento pulmonar e conecte a torneira de três vias à porta proximal do cateter da artéria pulmonar.Em seguida, injete as misturas oleicas e súleias, repetidamente de uma seringa na outra, através da torneira de três vias, para misturar completamente as soluções. Quando uma emulsão homogênea for alcançada, injete dois mililitros da emulsão no cateter venoso central e continue a misturar. Monitore de perto a hemodinâmica após a injeção, dando a norepinefrina como injeção de bolus de 10 a 100 microgramas, conforme necessário para manter a pressão arterial média acima de 60 milímetros de mercúrio.Repita a injeção de solução de ácido oleico de dois mililitros a cada três minutos, até que a pressão parcial arterial da fração de oxigênio da razão inspirada esteja abaixo de 200 milímetros de mercúrio. Aguarde 30 minutos e reavalie a pressão parcial da fração de oxigênio da relação inspirada. Se a razão ainda estiver acima de 200 milímetros de mercúrio, repita as injeções até que a pressão parcial da fração de oxigênio da razão inspirada caia abaixo de 200 milímetros de mercúrio.Em seguida, defina a ventilação de acordo com as sugestões da rede de Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo. A fração parcial de pressão de oxigênio da razão de oxigênio inspirada diminuiu após a aplicação fracionada do ácido oleico. Apesar de um prejuízo típico de oxigenação após a indução de lesão pulmonar, variações frequentes no comprometimento do oxigênio são observadas entre os animais em todo o tempo de comprometimento.Necessitando de um monitoramento próximo da fração parcial de pressão de oxigênio da relação de oxigênio inspirada enquanto fornece o ácido oleico. A diminuição da fração parcial de pressão de oxigênio da razão de oxigênio inspirada é paralelamente a um aumento da pressão arterial pulmonar que normalmente permanece elevada para o resto do experimento, com alguma flutuação também observada entre os animais. A lesão pulmonar é visualmente detectável nos pulmões colhidas seis horas após a indução de lesão pulmonar, e a análise histológica revela edema alveolar e hemorragia.Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como induzir uma lesão pulmonar aguda em porcos por injeção venosa essencial de ácido oleico. Não se esqueça que trabalhar com ácido oleico pode ser extremamente perigoso e tomar precauções como usar luvas, e aulas de segurança devem ser sempre tomadas durante a realização deste procedimento.

oleic-acid-injection-pigs-as-model-for-acute-respiratory-distress

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

lavagens pulmonares repetidas em porcos anestesiados induzir lesão pulmonar que assemelha-se os principais aspectos da síndrome da angústia respiratória aguda humana (ARDS). Para este efeito, os pulmões são repetidamente lavados com solução salina a 0,9% a 37 ° C. O objetivo do protocolo é uma atenuação reprodutível de trocas gasosas e hemodinâmica para a investigação em ARDS.

induzida por lavagem de surfactante Esgotamento em porcos como modelo da Síndrome da Angústia Respiratória Aguda (SARA)

Descrevemos um modelo de síndrome de angústia respiratória aguda induzida por ácido clorídrico (ARDS) em leitões que recebem sedação com agentes halogenados, isoflurano e sevoflurano, através de um dispositivo usado para sedação intensiva inalada. Este modelo pode ser usado para investigar os mecanismos biológicos de agentes halogenados em lesões pulmonares e reparos.

Entrega de agente halogenado em modelo suíno de síndrome de angústia respiratória aguda através de um dispositivo tipo unidade de terapia intensiva

O presente protocolo descreve um modelo de lesão pulmonar em camundongos utilizando ácido oleico para mimetizar a síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA). Esse modelo aumenta os mediadores inflamatórios no edema e diminui a complacência pulmonar. O ácido oleico é usado na forma de sal (oleato), uma vez que esta forma fisiológica evita o risco de embolia.

Modelo de Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo Induzido por Ácido Oleico em Camundongos

A infusão contínua de ácido oleico na artéria pulmonar de um porco adulto anestesiado induz insuficiência respiratória aguda, permitindo a experimentação controlada durante a descompensação respiratória aguda.

Um Modelo Suíno de Insuficiência Respiratória Aguda com Infusão Contínua de Ácido Oleico

Nós descrevemos uma técnica de pesquisa para fibrobroncoscopia e lavado bronco-alveolar utilizando baixa pressão de sucção. A técnica é utilizada para colher células do sistema imunológico das superfícies broncoalveolar de pulmão. A anestesia local e sedação consciente leve (midazolam) é usado. Assuntos toleram bem o procedimento e experimentar efeitos colaterais mínimos.

Lavagem Broncoalveolar (BAL) de Investigação; Obtenção adequada Rendimento Amostra

Contínua de 12 derivações monitorização eletrocardiográfica (ECG) pode identificar isquemia miocárdica transitória, mesmo quando assintomáticos, entre os pacientes com síndrome coronariana aguda (SCA). Neste artigo vamos descrever nosso método para iniciar a monitorização do paciente utilizando um dispositivo de Holter, o download dos dados de ECG para análise off-line, e como utilizar o software do ECG para identificar isquemia transitória.

Um método de pesquisa para detecção de isquemia miocárdica transitória em pacientes com síndrome coronariana aguda Utilizando Análise do segmento ST contínua

O presente trabalho ilustra a conveniência do uso da imunoterapia sublingual para aumentar a resposta imune inata nos pulmões e conferir proteção contra pneumonia pneumocócica aguda em camundongos.

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Abrir traqueostomia ácido gástrico aspiração Modelo murino de lesão pulmonar aguda Resultados em Maximal aguda não-letal Lung Injury

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Uma abordagem de diagnóstico resolvida por componente para um estudo sobre alergênios de pólen de grama em sulistas chineses com rinite alérgica e / ou asma

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Cicatrização de feridas abrasão epitelial da córnea com Burr Ocular como um modelo para córnea

Aprenda a induzir lesão pulmonar aguda em suínos por injeção venosa central de ácido oleico, modelo para síndrome do desconforto respiratório agudo. Este protocolo utiliza ultrassom guiado para acessos vasculares precisos.

Ácido oleico-injeção nos suínos como um modelo para a síndrome respiratória aguda

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