Name: Indução cirúrgica simples da perda auditiva condutora com verificação usando a visualização do otoscópio e a resposta comportável do startle do clap no rato (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 s
Description: Aprenda a induzir perda auditiva condutora em ratos por punção cirúrgica da membrana timpânica, com verificação por otoscopia e teste comportamental de sobressalto ao estalo. Este método padronizado permite estudar distúrbios auditivos humanos.

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Este trabalho foi apoiado em parte pelo Hong Kong Research Grants Council, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L., para o projeto Brain mapeamento eletrofisiologia guiada com aplicações em audição e pesquisa de poluição sonora. Agradecemos ao Posgrado en Ciencias Biomédicas, ao Instituto de Neurobiologiía da Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), ao Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México pela Bolsa de Pós-Graduação 578458 à FAM Manno.

O presente estudo e procedimentos foram aprovados pelos comitês de ética em pesquisa animal da Universidade da Cidade de Hong Kong, da Universidade de Hong Kong e do Departamento de Saúde da Região Administrativa Especial de Hong Kong.
1. Animais
<ol><li>Use ratos Sprague-Dawley (SD) de dois meses (N = 90, 200-250 g). NOTA: Roedores foram fornecidos pela unidade animal do laboratório acreditada da universidade de Hong Kong.</li>
	<li>Mantenha os ratos uma temperatura constante de 25 °C e umidade de 60-70% na Unidade de Pesquisa Animal do Laboratório.</li>
	<li>Casa de roedores em 12/12-h luz / ciclos escuros com acesso a alimentos e água potável, ad libitum.</li>
	<li>Aclimata roedores ao ambiente de carcaça no mínimo um dia antes da cirurgia de CHL.</li>
	<li>Pegue o roedor pela nuca e anestesiar o roedor com um coquetel de cetamina e xilacina (80-100 mg/kg: 5-10 mg/kg, respectivamente) via injeção intraperitoneal (combinar 1,0 mL de cetamina com 0,5 mL de xilazine como uma concentração final). NOTA: Use um 1 mL de seringa com uma agulha 23-25G. Injete aproximadamente 0,2 mL por 100 g de peso corporal do rato por 30 min de anestesia.</li>
	<li>Executar a pitada do dedo do pé para verificar a sensação de dor e para corroborar a anestesia adequada. Uma reação à pitada profunda do dedo do pé (pela retirada do membro traseiro) indica anestesia insuficiente.</li>
</ol>2. Configuração cirúrgica
<ol><li>Esterilizar todos os equipamentos em um esterilizador de contas de vidro quente ou autoclave antes do início da cirurgia. Limpe a área cirúrgica com 70% de etanol.</li>
	<li>Use luvas de látex e jaleco antes de iniciar o procedimento.</li>
	<li>Coloque uma cortina cirúrgica estéril no banco limpo(Figura 1A).</li>
	<li>Esterilizar microtesouras e um otoscópio antes da cirurgia para minimizar a infecção do ouvido(Figura 1B).</li>
	<li>Coloque a micro-tesoura e otoscópio na área estéril.</li>
	<li>Coloque o roedor no campo cirúrgico e em alinhamento com o cirurgião.</li>
	<li>Prossiga com a indução cirúrgica de CHL.</li>
</ol>3. Indução cirúrgica de perda auditiva condutiva
<ol><li>Coloque a cauda e a cabeça do roedor alinhadas em uma posição propensa, cabeça mais próxima do cirurgião.</li>
	<li>Visualize a orelha esquerda e direita do roedor o ostocópio para garantir a membrana de tympanic saudável (Figura 2a). Avalie a orelha direita e esquerda de cada roedor para verificar a condição saudável antes da indução de CHL.</li>
	<li>Pegue a hélice do ouvido e estenda o canal auditivo externo (ou seja, canal auditivo, carne auditiva externa, canal auditivo) para fazer com que o interior fique obscurecido e enegrecido pela profundidade. Aqui, o canal auditivo é feito perpendicular à superfície do TM. NOTA: Certifique-se de que o cannel auditivo esteja diretamente paralelo agora e a TM forma um ângulo reto com o eixo de inserção da microtesoura. Ele será visualizado como um tubo preto sem luz. Às vezes, o canal auditivo precisa ser inclinado em um ângulo leve, aproximadamente 15° para a superfície planar do crânio. Isso garante que a mão do cirurgião é perpendicular à superfície do TM.</li>
	<li>Introduza a micro-tesoura no centro do canal auditivo prestando atenção para não roçar ou cortar o tecido do canal auditivo e proceder ligeiramente, aproximadamente 5 mm do centro da obscuridade, empurrando para a frente suavemente através do centro da TM. NOTA: A punção de TM pode ser confirmada por um som pop quando as pontas da micro-tesoura perfuram o TM. O som de estalo pode ser ouvido aproximadamente em 2 min 52 s no vídeo. Este não é um som de tesoura; este é um som de punção TM. Medida após a análise, o "pop" é aproximadamente 20 dB SPL maior do que o som de fundo, conforme registrado por um microfone de alta frequência. Não há necessidade de verificar o som "pop" a este ponto, visualização de otoscópio é suficiente. O investigador pode precisar de praticar garantir que um 'pop' seja ouvido durante cada procedimento de CHL.</li>
	<li>Abra imediatamente a micro-tesoura carregada de mola e gire três vezes após a punção do TM para garantir o deslocamento da cabeça do malleus longe do TM (somente se o deslocamento malleus é desejado).</li>
	<li>Retire a micro-tesoura e coloque o roedor o otoscópio para visualização. NOTA: É importante notar que nenhum sangramento significativo deve ocorrer após o procedimento cirúrgico. Eutanásia do roedor e não proceder à avaliação comportamental se ocorrer sangramento.</li>
	<li>Induzir chl bilateral, procedendo como acima no ouvido oposto.</li>
</ol>4. Visualização de otoscópio
<ol><li>Confirme uma cirurgia bem sucedida de CHL com um otoscópio usando um speculum de pequeno diâmetro para visualizar a orelha média do roedor.</li>
	<li>Avalie cada roedor antes e depois do procedimento cirúrgico do CHL debaixo do otoscópio. Garantir a confirmação do TM normal(Figura 2a)e tm danificado após a indução CHL(Figura 2b).</li>
	<li>
Cuidados pós-operatórios para o roedor
	<ol>
<li>Coloque o roedor na gaiola em casa uma lâmpada quente.</li>
		<li>Observe a indução do roedor após o CHL até que o roedor se alegre.</li>
		<li>Injete o roedor com soro de glicose (dextrose/soro soro) para recuperar a consciência e colocar roedores na gaiola para recuperação. NOTA: Use uma agulha 23G com uma seringa de 10 mL para injetar 5 mL de soro para soro após a cirurgia de CHL.</li>
		<li>Injete o roedor via intramuscular com enrofloxacina antibacteriana 0,05 mg/kg duas vezes durante o período de recuperação de 24 h.</li>
		<li>Observe o roedor regularmente para o comportamento ou os sintomas da dor após a cirurgia.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Avaliação comportamental (validação da indução de CHL) - resposta do início do aplauso
<ol><li>Corroborar chl (após a confirmação do otoscópio) 24 h pós-cirurgia com a avaliação comportamental consistindo no clap-startle-teste.</li>
	<li>Coloque o rato induzido chl ao lado de um rato normal em duas gaiolas adjacentes separadas.</li>
	<li>Coloque os roedores em uma sala silenciosa.</li>
	<li>Fique a aproximadamente 0,5 m de distância dos roedores e continue a bater palmas em durações igualmente espaçadas várias vezes (5 palmas foram escolhidas e espaçadas acima de 1 segundo). NOTA: O vermão de palmas produzido pelo aplauso medido - 40 dB SPL maior do que o som de fundo, como registrado por um microfone de alta freqüência.</li>
</ol>

<ol><li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li>
<li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summary+health+statistics+for+U.S.+adults%3A+National+health+interview+survey%2C+2001%5BTitle%5D)+AND+%22National+Center+for+Health+Statistics.+Vital+and+health+statistics%22%5BJournal%5D)">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li>
<li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Newborn+hearing+screening+and+follow-up%3A+Aare+children+receiving+recommended+services%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Health+Reports%22%5BJournal%5D)">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li>
<li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li>
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<li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Auditory+Research%22%5BJournal%5D)">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li>
<li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+%28Merionesunguiculatus%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579(1967).</li>
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<li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil%2C+Meriones+Unguiculatis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li>
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<li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li>
<li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li>
<li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Otorhinolaryngology%22%5BJournal%5D)">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li>
<li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Otology%22%5BJournal%5D)">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li>
<li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngology-Head+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li>
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<li>Albiin, N., Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22The+Anatomical+Record%22%5BJournal%5D)">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li>
<li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Otology%22%5BJournal%5D)">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li>
<li>Johansson, U., Hellström, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li>
<li>Magnuson, K., Hellström, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media%5BTitle%5D)+AND+%22European+Archives+of+Oto-Rhino-Laryngology%22%5BJournal%5D)">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li>
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<li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation%3A+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+PediatricOtorhinolaryngology%22%5BJournal%5D)">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li>
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<li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004(2018).</li>
</ol>

Os autores declaram nenhum conflito de interesses financeiroou não financeiro.

Descrevemos uma simples indução cirúrgica de CHL com verificação usando visualização de otoscópio e resposta comportamental de verniz em ratos. Aqui demonstramos o método em rato e anteriormente este método foi aplicado a gerbils e camundongos. O método pode ser facilmente adotado para outros roedores. A indução da CHL permite o estudo de uma forma sutil de perda auditiva que se manifesta em alterações corticais auditivas e achados comportamentais psicofísicos4,5,</sup...

A prevalência da perda auditiva em crianças e adultos é de aproximadamente 19,5%1 e 15,2%2, respectivamente. No entanto, aproximadamente 39,3% de todos os recém-nascidos com triagem auditiva anormal não recebem tratamento corretivo conforme relatado pelo Centers for Disease Control3. A perda auditiva é uma condição amplamente estudada, e o roedor é um modelo robusto para estudar distúrbios normais relacionados à audição e audição4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Distúrbios auditivos como perda auditiva condutiva (LE) levam a um aumento da depressão sináptica de curto prazo no córtex auditivo4,o que resulta em inclinações psicométricas mais rasas associadas a limiares de detecção de modulação de frequência 5. Modelos de perda auditiva condutora por remoção/deslocamento cirúrgico do malleus, punção da membrana tympanic (TM) ou tampão de ouvido são facilmente empregados e permitem a rápida indução do modelo de perda auditiva5,14 ,15,16,17,18. O objetivo do protocolo e método atual é demonstrar um modelo CHL simples e reproduzível em roedores.
O protocolo atual é barato (US$ 300 com todas as ferramentas) e prontamente alterado para diferentes atividades de pesquisa. O rato teve avaliações detalhadas da anatomia do ouvido médio19,20,21,22,23, abordagens cirúrgicas24, modelos em otitis media25, 26,27 e regeneração de perfuração TM16,17,18,28,29,30,tornando-se um modelo ideal para estudar perda auditiva. Aqui, um procedimento simples da indução de CHL é descrito com verificação pelo otoscope e pela avaliação com resposta do startle do aplauso no rato, que então pode ser usado para explorar sequelas adicionais da perda de audição. O procedimento de LE é induzido pela punção cirúrgica do TM. A verificação do procedimento de CHL é realizada por visualização de otoscópio para determinar a ausência do TM. A avaliação comportamental é realizada por um alto nível de pressão sonora (DB) (SPL) palmas. Este método foi aplicado previamente em uma variedade de roedores. É fácil de replicar, produz diferenças psicométricas robustas e mudanças nas respostas fisiológicas neurais4,5,16,17,18.

<table><tbody><tr><td>Luvas de látex, polivinil ou nitrilo</td><td>AMMEX</td><td></td><td>Use luvas sem pó Tesoura de</td></tr><tr><td>micromola de 8 mil (ver Fig. 1b)</td><td>RWD Life Science</td><td>S11035-08</td><td>8,0 cm de comprimento total, com aresta cortante de 3,5 mm ou micropinça semelhante. Pinças padrão com ação de mola serão suficientes</td></tr><tr><td>Otoscópio mini 3000</td><td>HEINE&nbsp;</td><td>D-008.70.120M</td><td>O otoscópio LED padrão será suficiente</td></tr> para <tr><td>ratos ou camundongos</td><td>JAX labs</td><td></td><td>Qualquer pequeno roedor&nbsp;</td></tr><tr><td>Gaiola para roedores pequenos</td><td>Tecniplast</td><td>1284L</td><td>Precisa de duas gaiolas para separar o roedor CHL do roedor ouvinte. Se os roedores estiverem em contato direto uns com os outros, eles se assustarão. Dimensões da gaiola 365 x 207 x 140 mm, área do piso: 530 cm2/82,15 pol2</td></tr></tbody></table>

indução cirúrgica simples da perda auditiva condutora com verificação usando a visualização do otoscópio e a resposta comportável do startle do clap no rato

Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

A perda auditiva condutiva (CHL) é um comprometimento auditivo prevalente em seres humanos. O objetivo do protocolo é descrever um procedimento cirúrgico simples para induzir CHL em roedores. O protocolo demonstra CHL por punção de membrana tympanic. A verificação da cirurgia de CHL foi por exame de otoscópio e avaliação comportamental por resposta ao vermão, tanto replicável quanto confiável, e são métodos simples para demonstrar que a perda auditiva ocorreu. O procedimento simples de CHL é vantajoso devido à sua reprodutibilidade e flexibilidade a diferentes atividades na pesquisa de perda auditiva. As limitações da indução de LCH por abordagem cirúrgica estão associadas à curva de aprendizagem para realizar o procedimento cirúrgico e a confiança no exame audiológico. Induzir uma deficiência auditiva por CHL permite que um estude prontamente as manifestações neurais e os resultados comportamentais da perda auditiva.

O procedimento simples do CHL foi executado em 90 ratos e fora deste grupo 2 teve o sangramento significativo e 2 não teve a perda da audição o next day como avaliado pelo startle comportável do clap. Estes quatro ratos foram descartados. Os ratos devem ser descartados conforme descrito pelas razões da discussão devido a complicações. Induzir a punção e/ou o deslocamento/ou a remoção do malleus do TM(figura 2B)elicia CHL, que conduz às manifestações comportáv...

Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer uma indução de perda auditiva condutora replicável por meio de punção cirúrgica da membrana de tympanic e verificação por visualização de otoscópio e avaliação comportamental por verino de gonorreia.

Indução cirúrgica simples da perda auditiva condutora com verificação usando a visualização do otoscópio e a resposta comportável do startle do clap no rato

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

O objetivo geral deste estudo é estabelecer uma indução confiável de perda auditiva através de punção de membrana typanica cirúrgica e verificação por visualização otoscópio e avaliação comportamental por um início de bate-palmas. O objetivo da nossa prática é desenvolver um modelo para distúrbios condutores auditivos humanos. Demonstramos na prática, o procedimento cirúrgico de perda auditiva condutiva, que é uma simplificação na remoção de Malleus, o método para verificar a perda auditiva condutiva por visualização do otoscópio, e um simples início de palmas comportamental, que valida que ocorreu perda auditiva condutiva.A principal vantagem do procedimento que descrevemos são procedimentos não invasivos, verificação da perda auditiva condutiva por otoscópio e validação por surto de palmas. O presente estudo e procedimentos foram aprovados pelo comitê de ética em pesquisa animal e pela City University of Hong Kong, pela Universidade de Hong Kong e pelo Departamento de Saúde da Região Administrativa Especial de Hong Kong. Para o protocolo atual, escolhemos ratos, mas você pode escolher qualquer roedor.Pesar animais para garantir anestesia adequada para injeção de IP. Para anestesia, é importante que os animais tenham a dose adequada. Pegue seu rato pelo scruff.Certifique-se de sua dose correta de cetamina e xilazina para injeção ip, e injete. Certifique-se de realizar beliscão do dedo do pé para verificar nenhuma sensação de dor. Para a configuração cirúrgica consiste em seu rato anestesiado, os microscissores e seu otoscópio.Por favor, limpe completamente a área cirúrgica com etanol. Coloque a cortina cirúrgica no banco limpo. Posteriormente, introduza sua tesoura, otoscópio e rato.O tamanho da sua tesoura dependerá do tamanho do seu roedor. Sob otoscópio, visualize o ouvido esquerdo e direito do rato para garantir uma membrana timpânica saudável. Pegue a hélice e estenda o canal auditivo externo para ficar obscurecido e enevado.Aqui você vai introduzir os microscissores. Introduza os microscisores ao centro do canal auditivo, prestando muita atenção para não cortar o tecido. Ouça o som pop, depois torça para garantir o deslocamento do malleus.A confirmação de uma cirurgia de perda auditiva condutiva bem sucedida deve ser feita com um otoscópio. Avalie cada orelha de rato antes e depois da cirurgia com um otoscópio com um espéculo de pequeno diâmetro. Quando visualizada com otoscópio, devem ser estudadas as diferenças entre uma membrana timpânica normal e uma membrana timpânica perfurada.Aqui, a membrana timpânica normal à esquerda tem a cabeça do malleus no lugar e é drasticamente diferente da membrana timpânica perfurada à direita. A membrana timpânica perfurada, após a cirurgia de perda auditiva condutiva, tem o malleus deslocado e os pars tensas rompidos com o umbo do malleus e cabeça completamente ausente. Cuidados pós-operatórios para roedores.Coloque o roedor na gaiola de casa sob uma lâmpada quente e injete com agentes antibacterianos e glicose. Corroborar perda auditiva conjuntiva com o início da palmas comportamental. O rato CHL é colocado ao lado de um rato normal em duas gaiolas adjacentes.Estes são colocados em uma sala silenciosa. Fique a meio metro de distância e bata palmas em durações igualmente espaçadas um número específico de vezes. Aqui, escolhemos cinco.Aqui, nossos resultados comportamentais representativos. Note que o rato na parte inferior não pula para o som de palmas. O rato na parte superior da tela é assustado por esses sons altos de palmas.Por favor, estude o antes e depois da diferença de palmas para esses dois ratos. Falha em induzir perda auditiva condutiva. Uma falha em induzir perda auditiva condutiva pode ser causada por sangramento em uma ou ambas as orelhas.E neste caso, o roedor deve ser eutanizado. Isso indicaria que a tesoura não fez contato com a membrana timpânica. Um som sem estalo durante o procedimento.Um som sem estalo indicaria que o procedimento de perda auditiva condutiva era ruim e não limpo. Um som sem estalo significaria que seus microscisores não fizeram contato direto com a membrana timpânica. Visualização otoscópio.Se, ao visualizar por otoscópio, a membrana timpânica parece normal, isso indicaria que nenhum CHL ocorreu. Uma resposta ao teste de som de palmas. Isso indicaria que não ocorreu nenhum CHL e que o roedor não tenha perda auditiva condutiva.Isso ocorreria quando um rato pula ou é assustado por um som alto. A principal vantagem do procedimento que descrevemos são procedimentos não invasivos, verificação da perda auditiva condutiva por otoscópio e validação por surto de palmas. Depois de fazer a prática, você pode induzir perda auditiva condutiva em um modelo de roedor e explorar as manifestações comportamentais e psicofísicas deste transtorno auditivo.

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Research

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Neuroscience

Neurociência

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Aprenda a induzir perda auditiva condutora em ratos por punção cirúrgica da membrana timpânica, com verificação por otoscopia e teste comportamental de sobressalto ao estalo. Este método padronizado permite estudar distúrbios auditivos humanos.

Indução cirúrgica simples da perda auditiva condutora com verificação usando a visualização do otoscópio e a resposta comportável do startle do clap no rato (Vídeo) | JoVE Journal

Indução cirúrgica simples da perda auditiva condutora com verificação usando a visualização do otoscópio e a resposta comportável do startle do clap no rato

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