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DOI: 10.3791/58027-v
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This study outlines a detailed protocol for tissue clearing, fluorescent labeling, and large-scale imaging of mouse brain tissue. The methodology allows researchers to visualize the three-dimensional organization of cell types in the neocortex, offering valuable insights into its structure and function.
Aqui descrevemos um procedimento para tecido limpando, etiquetando fluorescente e imagens em grande escala do tecido de cérebro de rato que, desse modo, permite a visualização da organização tridimensional de tipos de células no neocórtex.
Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da neurociência, como a análise da estrutura e da função do neocórtex. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode revelar a estrutura tridimensional em grande escala no cérebro. Embora esse método possa fornecer informações sobre o neocórtex, ele também pode ser aplicado a outros sistemas nervosos, como a medula espinhal.
Para injetar o marcador na ponte dos camundongos adultos, primeiro coloque um microlitro da subunidade B da toxina da cólera marcada com fluorescência em uma seringa Hamilton de calibre 26. Coloque uma bomba injetora na seringa e, em seguida, coloque a seringa e a bomba no porta-ferramentas de um manipulador em um instrumento estereotáxico. Incline o manipulador 12 graus posteriormente em relação ao eixo vertical.
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