Usando um artrômetro de joelho para avaliar as contribuições de tecido-específica para contratura de flexão do joelho em ratos

Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo musculoesquelético, como o efeito de uma intervenção na faixa articular do joelho usando um modelo de rato. A principal vantagem desta técnica é que ela fornece um método preciso, reprodutível e independente do usuário para medir a extensão articular do joelho de rato. Comece usando tesouras e fórceps para deglove a extremidade inferior do rato eutanizado e remova a pele da fácia subjacente.

Em seguida, posicione o corpo de lado com a perna experimental voltada para cima. Coloque o fêmur no grampo metálico ranhurado que é integrado ao estágio de montagem do artrômetro. Fixar o fêmur perfurando furos através do músculo com a chave de fenda de precisão para colocar o grampo distal no maior trochanter.

Em seguida, ajuste o condíle femoral lateral sobre o centro de rotação do artrômetro. Posicione o braço móvel com dois postes eretos atrás da perna, apenas proximal ao calcâneo para empurrar o joelho em extensão passiva assim que o motor elétrico for ativado. Use uma chave hexa, para apertar o grampo do fêmur em sua base até que esteja preso.

Certifique-se de que a câmera está bem montada no artilômetro usando uma chave de fenda. Verifique se a câmera está em foco manual, e concentre a câmera no femora condyle. Ajuste a direção do artrômetro no sentido horário ou no sentido anti-horário, dependendo da direção da faixa de movimento do joelho que está sendo testada e da posição do rato.

Ative o motor do artrômetro pressionando simultaneamente a energia e os botões de partida. O motor artrômetro se moverá a uma velocidade de 6,6 rpm e depois parará por 2,1 segundos ao atingir o primeiro torque predefinido. Quando o primeiro torque é atingido, o LED correspondente acenderá e a câmera digital tirará uma foto do joelho automaticamente.

Uma vez que a foto é tirada, o artrômetro continuará para o próximo torque predefinido mais alto. Uma vez aplicados os quatro torques, o artrômetro vai parar. Uma vez que o rato é posicionado no artrômetro e os testes são iniciados, o tempo total para testar um joelho é de aproximadamente 18,8 segundos.

Para isolar o componente artrogênico ou não muscular de uma contratura, reinicie a sequência de torque para liberar a força aplicada na perna e, em seguida, realize uma miotomia nos músculos transarticulares posteriores. Dissecar o músculo proximal o suficiente para a articulação do joelho para garantir que a cápsula não seja cortada. Depois de testar as duas pernas antes e depois da miotomia, e dissecar todos os tecidos necessários, descarte a carcaça animal e todos os materiais de risco biológico seguindo o protocolo institucional e limpe o artrômetro.

Abra o arquivo contendo a imagem digital tirada pela câmera montada no artrômetro na Imagem J.A pessoa que realiza a análise deve ficar cega para o agrupamento experimental do animal. Selecione a ferramenta de ângulo da barra de ferramentas principal e trace o ângulo femoral-tibial desenhando uma linha femoral do meio do grampo do fêmur até o condíle lateral, e a linha tibial do condíle femoral lateral ao maleeolus lateral. Use a ferramenta de medição clicando em Analisar e, em seguida, medir para mostrar o ângulo calculado produzido pelas duas linhas desenhadas acima.

Use a convenção de zero graus para significar extensão total. Este número mostra extensão máxima do joelho após 16 semanas de imobilização para sete ratos em comparação com o membro contralateral não imobilizado. Para o joelho imobilizado, a capacidade de extensão máxima foi reduzida em comparação com o contralateral.

Após a miotomia, a capacidade máxima de extensão do joelho experimental e contralateral aumentou, no entanto, o joelho experimental continua a demonstrar uma contratura de flexão. Ao tentar este procedimento, é importante garantir que o grampo femoral esteja bem protegido para evitar o movimento do joelho durante os testes. Após este procedimento, outros métodos como a análise histológica do joelho, a estrutura articular pode ser realizada para responder a perguntas adicionais relativas às alterações teciduais e celulares que ocorrem na articulação do joelho para afetar seu alcance em movimento.