PCR quantitativo do bacteriófago T7 de Biopanning

Este método poderia ajudar a responder a problemas-chave nos campos de virologia e microbiologia relacionados à enumeração de bacteriófagos de amostras complexas e diagnósticos e terapêuticas baseadas em bacteriófagos. A principal vantagem desta técnica é que permite quantificação eficiente e precisa do tempo de um grande número de amostras de experimentos de biopanning phage não viáveis com ensaios tradicionais. Demonstrando o procedimento estarão Rashmi Mohanty e Jasmim Leal, estudantes de pós-graduação do meu laboratório.

Depois de projetar os primers e criar uma concentração de estoque, obtenha referência T7 phage DNA em uma concentração de 0,1 microgramas por microliter. Usando água ultrauso, dilui-se em série este DNA dez vezes, de um milhão de femtogramas por microliter para um femtogramas por microliter em tubos PCR de 0,2 mililitros. Prepare 20 microliters de cada concentração, certificando-se de trocar pontas de pipeta e vórtice dos tubos entre cada estágio da diluição.