Ácido hialurônico baseado hidrogel para 3-Dimensional cultura de células de Glioblastoma derivado de paciente

Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre tumores de glioblastoma e como a matriz extracelular pode facilitar a resistência ao tratamento. Essa técnica permite a construção modular de plataformas de cultura de células 3D adaptáveis que podem ser usadas para cultivar células de glioblastoma derivadas de pacientes em um ambiente que se aproxima melhor do cérebro nativo. Para começar, coloque moldes de borracha de silicone limpos e secos em cada poço de uma placa de 12 poços não tratada com cultura de tecidos e use a extremidade romba limpa de uma ponta de pipeta para aderir os moldes ao fundo da placa.

Depois de verificar a vedação entre os moldes e o fundo do poço, coletar as gliomasferas dissociadas de uma cultura de células de glioblastoma por centrifugação e ressuspender o pellet em um mililitro de enzima de dissociação celular. Após cinco minutos à temperatura ambiente, agite o tubo com batidas suaves e interrompa a reação enzimática com quatro mililitros de meio completo. Centrifugue novamente as células e ressuspenda o pellet em um mililitro de meio completo fresco antes de coar as células através de um filtro de 70 micrômetros.