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DOI: 10.3791/58192-v
Ivanna Karina Olivares-Marin1, Juan Carlos González-Hernández2, Carlos Regalado-Gonzalez1, Luis Alberto Madrigal-Perez3
1Department of Chemistry,Universidad Autónoma de Querétaro, 2Department of Biochemical Engineering,Instituto Tecnológico de Morelia, 3Department of Biochemical Engineering,Instituto Tecnológico Superior de Ciudad Hidalgo
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui nós apresentamos um protocolo para estimar o metabolismo respiratório e fermentativa por encaixe o crescimento exponencial de Saccharomyces cerevisiae para a equação de crescimento exponencial. Cálculo dos parâmetros cinéticos permite o rastreio das influências de substâncias/compostos na fermentação ou respiração mitocondrial.
Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave nos campos biotecnológico e biomédico, como quais são as bases moleculares por trás dos efeitos Warburg e Crabtree. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite o estudo de alto rendimento dos efeitos de certas substâncias no metabolismo respiratório e fermentativo. Comece inoculando um tubo cônico de 15 mililitros contendo três mililitros de leveduras frias e estéreis de 2% extrato de peptone dextrose, ou caldo YPD, com 250 microliters de células de levedura S.cerevisiae preservadas em glicerol a 20 graus negativos Celsius.
Incubar a levedura durante a noite em um agitador orbital a 30 graus Celsius e 200 rpm. para streaking em um 60-milliliter, 2%YPD ágar-filled placa Petri na manhã seguinte. Cultura o prato a 30 graus Celsius até colônias isoladas serem observadas.
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