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DOI: 10.3791/58366-v
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This protocol outlines the intubation of adult zebrafish with biologics, followed by dissection and preparation of the intestine for cytometry, confocal microscopy, and qPCR. It enables the administration of bioactive compounds to study intestinal uptake and local immune responses.
O protocolo descreve intubação zebrafish adulto com um biológico; em seguida, dissecando e preparar o intestino para citometria, microscopia confocal e qPCR. Este método permite a administração de compostos bioativos para monitorar a absorção intestinal e o estímulo imune local evocado. É relevante para a dinâmica intestinal da profilaxia oral de teste.
Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo da vacinação da mucosa, como como a mucosa intestinal capta compostos biológicos e como tais biológicos modulam o sistema imunológico no local após a intubação. A principal vantagem dessa técnica é que é simples de configurar, rápido e mostra baixas taxas de mortalidade. Este método pode fornecer informações sobre a vacinação mucosa.
Também pode ser aplicado a outros compostos, como produtos químicos, tóxicos ou patógenos. A demonstração visual deste método é fundamental, pois nas etapas de intubação oral e dissecção intestinal, é preciso ter cuidado porque na intubação você pode ferir o zebrafish e causar a morte. Na dissecção, a extremidade do intestino é muito fina e frágil.
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