Um protocolo de preferência condicionada lugar para medir a incubação do desejo em ratos
6 de novembro de 2018
Aqui, um protocolo de preferência (CPP) do lugar de morfina condicionado é descrito para medir a incubação do desejo em ratos.
Este método pode ajudar a abordar algumas questões-chave no campo do vício em drogas sobre os desejos de uso de drogas e a incubação da resposta ao desejo. Com apenas seis dias de condicionamento de morfina, a resposta de memória de preferência do local condicionado pode ser estendida para 18 dias para observação dos fenômenos de desejo no modelo de rato. As implicações deste modelo de condicionamento de morfina de rato estendem-se para o avanço de nosso entendimento dos mecanismos subjacentes à incubação de desejos.
Antes de iniciar o procedimento, construa um aparelho de preferência de local condicionado de três câmaras, composto por duas câmaras laterais grandes e pretas de 30 por 30 centímetros. E uma câmara branca de 11 por 25 por 30 centímetros, com um piso de PVC branco e liso. Em seguida, adicione diferentes pistas táteis às câmaras laterais para testar as preferências iniciais do rato.
Para pré-condicionamento dos animais, remova as portas da guilhotina para permitir o livre acesso a todo o aparelho. E coloque um rato na câmara do meio. Regisso recorde a atividade do animal por 15 minutos, calculando o tempo gasto nas duas câmaras laterais no terceiro dia como linha de base.
Para condicionamento dos animais, injete o grupo de ratos condicionados à morfina com um mililitro por quilograma de 10 miligramas por hidreloreto de morfina mililitro IP pela manhã. E com um mililitro por quilo fisco 10 horas depois, todos os dias durante seis dias. Colocando cada rato em sua droga apropriada emparelhada, não preferida ou salina emparelhada, câmara preferida por 45 minutos imediatamente após cada injeção.
Para o teste dos animais condicionados à morfina, nos dias dois, 10 e 18 após a última sessão de condicionamento, remova as portas da guilhotina para permitir o livre acesso a todo o aparelho. E registre a atividade de cada animal por 15 minutos após a colocação na câmara do meio para exploração gratuita de todo o aparelho em estado livre de morfina. A retenção de memória da preferência de local condicionado nos grupos de morfina e soro fisiológico é avaliada medindo o escore de preferência do local condicionado em vários pontos de tempo após a última sessão de condicionamento.
O número de entradas nas câmaras laterais é análogo ao número de respostas ativas no paradigma da autoadministração, refletindo a propriedade reforçada da morfina e com um número crescente de entradas indicando a incubação do desejo. Como ilustrado, uma preferência de lugar condicionada à morfina pode ser estabelecida com sucesso usando este protocolo. Induzindo uma memória de recompensa de morfina de longo prazo por até 18 dias após a última sessão de condicionamento.
Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de escolher equilibrar as pistas táteis. Após este procedimento, outras medidas como a reintegração após cada condicionamento podem ser realizadas. Responder a perguntas adicionais sobre se a reintegração sob a incubação do desejo tem mecanismos subjacentes semelhantes.
Após a reintegração, essa técnica abriu caminho para pesquisadores do campo da adição de drogas explorarem a incubação do desejo em paradigmas de preferência de lugar condicionados aos ratos.
Visão Geral
Este artigo descreve um protocolo de preferência condicionada ao local (PCL) com morfina para medir a incubação do desejo em ratos. O método permite aos pesquisadores explorar os mecanismos subjacentes aos desejos por drogas e à dependência.
Componentes Principais do Estudo
Área da Ciência
- Neurociência
- Psicologia Comportamental
- Farmacologia
Contexto
- Compreender os desejos provocados por drogas é fundamental na pesquisa sobre dependência.
- A preferência condicionada ao local é um método comum para avaliar memórias relacionadas a drogas.
- O fenômeno da incubação do desejo pode ser estudado por meio desse modelo.
- Estudos anteriores demonstraram os efeitos de longo prazo do condicionamento por drogas.
Objetivo do Estudo
- Estabelecer um modelo confiável de PPF à morfina em ratos.
- Investigar a incubação do desejo ao longo do tempo.
- Avaliar as propriedades reforçadoras da morfina por meio de respostas comportamentais.
Métodos Utilizados
- Construiu um aparato CPP de três câmaras para testes.
- Condicionou previamente ratos para estabelecer preferências basais.
- Administrou injeções de morfina e solução salina durante seis dias.
- Mediu atividade e preferências em múltiplos pontos temporais após o condicionamento.
Resultados Principais
- Estabelecimento bem-sucedido da PCC com morfina e retenção de memória de longo prazo.
- O aumento das entradas nas câmaras pareadas à droga indicou incubação do desejo.
- As respostas comportamentais refletiram as propriedades reforçadoras da morfina.
- Os achados apoiam a exploração adicional dos mecanismos de desejo na dependência.
Conclusões
- O modelo de CPP com morfina é eficaz para estudar o desejo por drogas.
- Os efeitos a longo prazo do condicionamento com morfina podem ser observados.
- Este protocolo pode auxiliar na compreensão da dinâmica da dependência.
Perguntas Frequentes
Relevância Executiva para a Indústria
Este protocolo permite que pesquisadores da indústria biofarmacêutica modelem o aumento dependente do tempo do desejo por drogas durante a abstinência, um desafio fundamental nas terapêuticas para dependência. Ao capturar a incubação do desejo em ratos, ele apoia a validação de alvos e a redução de riscos mecanicistas para novas intervenções destinadas a prevenir recaídas. O método fornece uma ponte translacional entre a triagem pré-clínica e a avaliação de candidatos clínicos em pipelines de transtornos relacionados ao uso de substâncias.
Aplicações Estratégicas em P&D de Biotecnologia Farmacêutica
Descoberta Inicial e Validação de Alvo
- Valor Científico: Investigar hipóteses terapêuticas sobre a neurobiologia da memória de recompensa de longo prazo e do desejo.
- Valor Operacional: Permite a validação funcional de alvos por meio de leituras comportamentais de fenômenos de incubação.
- Valor Preditivo: Apoia a triagem de portfólios ao identificar alvos que modulam a intensificação do desejo dependente do tempo.
Desenvolvimento de Triagem e Ensaios
- Prontidão do Ensaio: Prepara sistemas biológicos validados para triagem de compostos frente a desfechos relacionados ao desejo compulsivo.
- Saída Quantitativa: Mede as entradas nas câmaras como um indicador de resposta ativa, permitindo análise de dose-resposta.
- Reprodutibilidade: Estímulos táteis padronizados e design da câmara favorecem a consistência entre laboratórios na avaliação do desejo compulsivo.
Pesquisa Translacional e Pré-clínica
- Relevância para a Doença: Modela a incubação do desejo, um fenômeno clinicamente observado na dependência humana.
- Continuidade Pré-clínica: Permite o acompanhamento do descobrimento ao longo de uma janela de observação de 18 dias após o condicionamento.
- Decisões Ajustadas ao Risco: Fornece critérios de prosseguir/não prosseguir com base na atenuação da incubação do desejo por compostos em teste.
Integração de Pipeline e Fluxo de Trabalho
O método se insere no continuum de descoberta que vai do teste de hipóteses sobre alvos até a otimização de compostos líderes, permitindo especificamente a avaliação de compostos que interrompem a incubação do desejo durante períodos prolongados de abstinência.
- Biologia da Descoberta: Apoia a investigação mecanicista da persistência da memória associada à morfina e das neuroadaptações relacionadas ao desejo.
- Triagem: Fornece leituras comportamentais quantitativas (entradas na câmara) para avaliar os efeitos de compostos na incubação do desejo.
- Análises: Gera dados temporais de preferência e entradas para comparar condições ao longo de intervalos de abstinência.
- Pesquisa Translacional: Alinha-se com as cronologias clínicas de incubação, apoiando a validade preditiva de estratégias de prevenção de recaída.
- Reutilização Empresarial: Estabelece uma plataforma reutilizável para avaliar diversas intervenções farmacológicas direcionadas à persistência do desejo.
Impacto Operacional e Empresarial
- Valor Científico: Fornece confiança preditiva no engajamento do alvo por meio da modelagem de trajetórias de desejo clinicamente relevantes.
- Valor Operacional: Oferece avaliação padronizada e escalonável da incubação do desejo com mínima complexidade procedural.
- Valor Estratégico: Melhora a eficiência do capital ao permitir a identificação precoce de compostos que atenuam processos de memória mal-adaptativos.
- Impacto no Portfólio: Facilita a priorização ajustada ao risco de candidatos com base nos efeitos sobre a expressão prolongada do desejo.
Considerações sobre a Implementação
- Requer experiência em farmacologia comportamental com roedores e condicionamento de preferência por lugar.
- Depende da construção precisa da câmara com pistas táteis distintas no piso.
- Necessita de manipulação e cronogramas de injeção consistentes durante o período de condicionamento de seis dias.
- Baseia-se na pontuação cega das entradas na câmara para minimizar o viés do observador.
- Limita-se à medição do comportamento de aproximação; não captura as dimensões afetivas ou motivacionais do desejo.
