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Tecnologia de Microarray da proteína extracelular para a deteção de alta taxa de transferência de...
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JoVE Journal Biochemistry
Extracellular Protein Microarray Technology for High Throughput Detection of Low Affinity Receptor-Ligand Interactions

Tecnologia de Microarray da proteína extracelular para a deteção de alta taxa de transferência de interações ligante-Receptor de baixa afinidade

Full Text
7,737 Views
06:01 min
January 7, 2019

DOI: 10.3791/58451-v

Bushra Husain1, Sairupa Paduchuri1, Sree R. Ramani2, Nadia Martinez-Martin1

1Receptor Discovery group, Microchemistry, Proteomics and Lipidomics Department,Genentech, 2Portfolio Management and Operations,Genentech

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, apresentamos um protocolo para tela extracelular da proteína microarrays para identificação de interações ligante-receptor romance em alta taxa de transferência. Também descrevemos um método para realçar a deteção de interações da proteína-proteína transiente usando complexos proteína-Microconta.

Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo das interações proteicas, permitindo a detecção de novos parceiros de ligação para proteínas extracelulares, tanto em alto rendimento quanto com alta sensibilidade. A principal vantagem deste método é que, com apenas alguns microgramas de proteína, você pode gerar centenas de slides usando a impressora micro array. Use um micro arrayer padrão para impressão de slides.

Este instrumento tem capacidade para 57 slides por corrida, usa uma cabeça de impressão com 48 pinos de manchas e pode acomodar até 8.000 pontos por slide. Gere placas de trabalho utilizando 384 placas de poço a 10 microliters de amostra por poço a partir das placas de estoque. Execute esta etapa manualmente, antes de deslizar usando o micro arrayer.

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