Name: Uma nova abordagem para o monitoramento de neovascularização de enxerto na gengiva humana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Aprenda a usar imagem de contraste de speckle a laser (LSCI) para monitorar microcirculação em mucosa oral humana. Este método não invasivo permite acompanhar a cicatrização pós-cirúrgica em tempo real.

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Este trabalho foi realizado em parte do apoio pelo fundo de pesquisa científica húngara, sob K112364 de número de Grant, pelo Ministério das capacidades humanas, programa de excelência de ensino superior para Universidade Semmelweis, módulo de pesquisa de terapia e pelo húngaro a Nacionais de investigação, desenvolvimento e inovação Office KFI_16-1-2017-0409.

O método relatado foi empregado em um ensaio clínico, que foi concedido a aprovação ética do Comitê húngara do registo de saúde e centro de treinamento (número de aprovação: OTIG/034310/2014).
1. LSCI Setup
<ol><li>Ligue o computador e periféricos.</li>
	<li>Liga o aparelho LSCI para ser usado com o interruptor no painel traseiro.</li>
	<li>Permitir que o instrumento aquecer durante pelo menos 5 min. O instrumento está pronto para medição, quando ambos os LEDs no painel traseiro pararam de piscar.</li>
	<li>Inicie o software clicando duas vezes no ícone do software na área de trabalho ou através do menu iniciar.</li>
	<li>Espere até que ambos o amarelo e os verdes LEDs no painel traseiro pararam de piscar, que indica que o laser é quente e inicialização for concluída. Nota: Ao iniciar o sistema, um ocasionalmente precisará executar o procedimento de verificação para o sistema.</li>
</ol>2. o sistema verificação
<ol><li>Use a caixa de calibração fornecida. Remover a tampa da caixa de calibração e agitá-lo para evitar a sedimentação em suspensão coloidal.</li>
	<li>Deixe a tampa aberta por 30 s para evitar bolhas.</li>
	<li>Voltar a pôr a tampa da caixa de calibração.</li>
	<li>Clique avançada | Verificação | Verifique se o instrumento.</li>
	<li>Selecione a rotina de verificação | Próximo.</li>
	<li>Gire a cabeça 90°, fixar a caixa de calibração usando os ímãs integrados e clique em seguinte.</li>
	<li>Digite a temperatura na caixa de texto, selecione o ° C e clique em Iniciar.</li>
	<li>Aguarde enquanto o assistente é concluído o procedimento de verificação.</li>
	<li>Após um procedimento de verificação bem-sucedida feche o assistente clicando em terminar.</li>
</ol>3. participante preparação
<ol><li>Certifique-se de que a medida é realizada em uma sala com temperatura controlada (26 ° C).</li>
	<li>Colocar o paciente em posição supina confortável em uma cadeira de dentista e coloque um travesseiro vácuo debaixo da cabeça (Figura 1).</li>
	<li>Deixe o paciente sem ser perturbado por 15 min antes de quaisquer medições.</li>
</ol>4. a microcirculação imagem de medição
<ol><li>No menu ferramentas , selecione e clique em Editor do projeto. Uma nova janela abre na qual as configurações usadas podem ser salvos.</li>
	<li>Na caixa de projectos, clique em novo para criar um novo projeto. Digite o "Vestibulum" e clique em Okey.</li>
	<li>Na caixa de Sites, clique em novo para criar um novo site. Digite "Dente 14" e clique em Okey.</li>
	<li>Sob o painel de conteúdo do dente 14 adicionar "10cm" como a distância necessária para a Distância e insira uma largura de 3 cm e uma altura de 2 cm nas caixas de medição.</li>
	<li>Definir a resolução de densidade do ponto ao normal e a taxa de quadros para imagens/s 16 e selecione o menu drop-down de duração para definir a duração da gravação para 0 tempo : 30.</li>
	<li>Selecione "Record com nenhuma média" e definir a taxa de captura de foto de cor de 1/segundo.</li>
	<li>Clique em "Aplicar" e "Okey" para salvar os parâmetros de projeto.</li>
	<li>No menu arquivo , selecione e clique em nova gravação. Abrirá uma nova janela de imagem e o painel de configuração será exibido.</li>
	<li>Em Configuração de gravação, selecione "Vestibulum" para o projeto e "dente de 14" para a 4.9. Site.</li>
	<li>Abrir o menu drop-down de objecto , clique em novo na caixa de diálogo Selecione o assunto e digite o nome do paciente.</li>
	<li>Clique Okey e digite um nome para a gravação no campo Nome de Rec : por exemplo, dia 1 (dias decorridos após a operação) e o nome do operador no campo operador .</li>
	<li>Antes de iniciar a medição de imagem de microcirculação, pressão arterial e pulso do paciente de medida.</li>
	<li>Evacue o ar do vácuo travesseiro para fixar a cabeça do paciente em posição adequada à área sob investigação.</li>
	<li>Peça o paciente abrir a boca.</li>
	<li>Retrai os lábios suavemente por dois espelhos dentais (Figura 1).</li>
	<li>Ajuste a cabeça do instrumento paralela à área medida da gengiva. Um built-in visível (650 nm) laser indicador facilita o posicionamento da câmera em relação à boca do paciente.</li>
	<li>Ajuste a distância de trabalho de 10 cm, movendo o instrumento em relação ao tecido. A distância é medida continuamente pelo dispositivo LSCI e é exibido pelo software como trabalho distância/medida valor sob a Configuração de imagem.</li>
	<li>Instrua o sujeito a ficar ainda durante a duração da medição.</li>
	<li>Clique no botão gravar para iniciar a gravação. A cor da janela de imagem agora muda para vermelho, indicando que a gravação está em andamento. O painel de configuração é substituído pelo painel de gravação. Gravação para automaticamente depois de 30 s. Quando a gravação estiver concluída, a cor das alterações janela de imagem para azul e o painel de gravação é substituída pelo painel de revisão.</li>
	<li>Remova os espelhos dentais e permitir que o paciente feche a boca e engolir.</li>
	<li>Opção voltar para a imagem ao vivo, pressionando o botão retomar a gravação .</li>
	<li>Repita as etapas de 4.14 para 4.21 duas vezes.</li>
	<li>Feche o arquivo. Os dados são salvos automaticamente.</li>
	<li>Medir a tensão arterial e pulso após as medições LSCI.</li>
</ol>5. off-line análise
<ol><li>Analise as imagens LSCI usando o built-in software. Vá para exibição de imagem ou Split (Figura 2).</li>
	<li>Defina as regiões de interesse (ROI). Nota: os valores de perfusão de pixels dentro de um ROI são em média e definidos como o valor do fluxo de sangue do ROI, expressado em um valor arbitrário, chamado unidade de perfusão de Speckle Laser (LSPU).</li>
	<li>Selecione a forma ROI desejada dentro da paleta de ferramentas ROI à direita.</li>
	<li>Selecione a opção de aplicar na paleta de ferramentas ROI, que se aplica a operações de ROI para todas as imagens da gravação.</li>
	<li>Desenhar o ROI, clicando e segurando o botão do mouse na imagem de intensidade, arrastando o ROI para fora para o tamanho desejado e soltar o mouse botão (clique e clique duas vezes para ROIs de forma livre). Ajuste a posição do ROI, redimensionar ou girá-lo, se necessário.</li>
	<li>Repita as etapas de 5.3. a 5.5 tantas vezes quanto o número desejado de ROIs (Figura 3).</li>
	<li>Defina períodos de tempo de interesse (TOI). Isto permite uma média de perfusão em um ROI durante um período definido de tempo (Figura 2).</li>
	<li>Ir para o modo gráfico ou Split. Selecione o botão de ferramenta Adicionar TOI.</li>
	<li>Clique e segure o gráfico na posição onde você deseja que o TOI para iniciar e arraste o cursor para a posição final desejada. Em seguida, solte o botão do mouse.</li>
	<li>Exporte dados da tabela de valor médio para processamento adicional.</li>
	<li>Construa curvas de fluxo de sangue por um software apropriado, usado para a análise estatística.</li>
</ol>

<ol><li>Nakamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-Dimensional+Real-Time+Blood+Flow+and+Temperature+of+Soft+Tissue+Around+Maxillary+Anterior+Implants%5BTitle%5D)+AND+%22Implant+Dentistry%22%5BJournal%5D)">Two-Dimensional Real-Time Blood Flow and Temperature of Soft Tissue Around Maxillary Anterior Implants.</a> Implant Dentistry. 21 (6), 522-527 (2012).</li>
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<li>Molnár, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+heat+provocation+tests+on+the+human+gingiva%3A+the+effect+of+periodontal+disease+and+smoking%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica+Hungarica%22%5BJournal%5D)">Assessment of heat provocation tests on the human gingiva: the effect of periodontal disease and smoking.</a> Acta Physiologica Hungarica. 102 (2), 176-188 (2015).</li>
<li>Gleissner, C., Kempski, O., Peylo, S., Glatzel, J. H., Willershausen, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+gingival+blood+flow+at+healthy+and+inflamed+sites+measured+by+laser+Doppler+flowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Periodontology%22%5BJournal%5D)">Local gingival blood flow at healthy and inflamed sites measured by laser Doppler flowmetry.</a> Journal of Periodontology. 77 (10), 1762-1771 (2006).</li>
<li>Hinrichs, J. E., Jarzembinski, C., Hardie, N., Aeppli, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrasulcular+laser+Doppler+readings+before+and+after+root+planing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Periodontology%22%5BJournal%5D)">Intrasulcular laser Doppler readings before and after root planing.</a> Journal of Clinical Periodontology. 22 (11), 817-823 (1995).</li>
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<li>Ayata, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+speckle+flowmetry+for+the+study+of+cerebrovascular+physiology+in+normal+and+ischemic+mouse+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Laser speckle flowmetry for the study of cerebrovascular physiology in normal and ischemic mouse cortex.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 24 (7), 744-755 (2004).</li>
<li>Armitage, G. A., Todd, K. G., Shuaib, A., Winship, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+speckle+contrast+imaging+of+collateral+blood+flow+during+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Laser speckle contrast imaging of collateral blood flow during acute ischemic stroke.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 30 (8), 1432-1436 (2010).</li>
<li>Lindahl, F., Tesselaar, E., Sjoberg, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+paediatric+scald+injuries+using+Laser+Speckle+Contrast+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%22%5BJournal%5D)">Assessing paediatric scald injuries using Laser Speckle Contrast Imaging.</a> Burns. 39 (4), 662-666 (2013).</li>
<li>Mirdell, R., Iredahl, F., Sjoberg, F., Farnebo, S., Tesselaar, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+blood+flow+in+scalds+in+children+and+its+relation+to+duration+of+wound+healing%3A+A+study+using+laser+speckle+contrast+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%22%5BJournal%5D)">Microvascular blood flow in scalds in children and its relation to duration of wound healing: A study using laser speckle contrast imaging.</a> Burns. , (2016).</li>
<li>Zotterman, J., Bergkvist, M., Iredahl, F., Tesselaar, E., Farnebo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+partial+and+full+venous+outflow+obstruction+in+a+porcine+flap+model+using+laser+speckle+contrast+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Plastic%2C+Reconstructive+%26+Aesthetic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Monitoring of partial and full venous outflow obstruction in a porcine flap model using laser speckle contrast imaging.</a> Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 69 (7), 936-943 (2016).</li>
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</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

O objetivo deste estudo foi apresentar uma nova técnica para monitorar a neovascularização de um enxerto na gengiva humana. De acordo com nossos resultados anteriores, LSCI avalia a perfusão de sangue da gengiva com boa repetibilidade e reprodutibilidade9, quando implementação rigorosa de cada etapa do protocolo planejada como uma exigência fundamental é atendida. LSCI é considerado como uma técnica semi-quantitativa que requer calibração periodicamente para assegurar a exatidão e a estabilidade. ...

Monitoramento de mudanças de longo prazo da microcirculação gengival humana em uma situação clínica é um tema quente em cirurgia oral e periodontal. No entanto, a avaliação confiável de perfusão pode ser difícil. Existem apenas alguns métodos que não invasiva medir as mudanças na circulação de sangue da mucosa humana. Dois destes empregam um feixe do laser1,2,3,4, mas de uma maneira diferente. Laser doppler flowmetry (LDF) faz uso do Doppler shift em um laser de feixe5,6, enquanto o contraste de speckle laser imagem método (LSCI) se baseia no padrão do salpico o retroespalhados de luz de laser para medir a velocidade do sangue vermelho células7.
LDF mede apenas em um único ponto, e reprodutível padronização da posição dos sensores é uma tarefa difícil mas desejável. Outro problema é que a sonda do LDF é pequena em diâmetro (1 mm2). Medição em pontos predeterminados antes da cirurgia é muito específico e pode ser cego para alterações circulatórias no pós-operatório, enquanto o edema, a remoção de tecido, movimento de tecido ou a prótese implantada causar alterações significativas na geometria de pós-operatório dos afetados tecidos moles. A distância de medição da LDF é menos de 1 mm, que proíbe o uso de uma tala dental com um buraco predeterminado para a sonda em caso de alteração volumétrica do tecido. LSCI não requer ferramentas especiais para localização e pode medir em áreas de vários cm2. Como resultado, a cicatrização pode ser seguido em todo o sítio cirúrgico. Além disso, LSCI pode exibir perfusão sanguínea em imagens codificadas por cores em uma fração de segundo, com uma resolução de até 20 μm.
O dispositivo LSCI apresentado neste artigo é usado principalmente para aplicações de pesquisa animal onde alta resolução em áreas pequenas de medição é desejada. No entanto, uma vez que a estrutura e histologia da mucosa oral humana são diferentes de área para área (anexado a gengiva, gengiva marginal, mucosa vestibular), circulação sanguínea também é heterogêneo8. Portanto, de alta resolução LSCI tem uma vantagem grande sobre LSCI resolução normal, que geralmente é usado em testes em humanos.
O instrumento LSCI emprega um laser invisível (comprimento de onda de 785 nm). O feixe é divergiu para iluminar a área de medição, criando um padrão de salpico. O padrão do salpico na área iluminada de imagens de uma câmera CCD. A câmera CCD usada neste sistema tem uma área de imagem ativa de 1386 x 1034 pixels e sua resolução é entre 20 a 60 µm/pixel, dependendo do tamanho da área de medição e na configuração do software (baixa, média, alta). Pode levar imagens a uma velocidade de 16 quadros por segundo, ou até mais, até 100 quadros por segundo, se o tamanho da imagem é reduzido. Perfusão sanguínea é calculado pelo software interno. Análise de variações no padrão do salpico e quantifica o contraste. O fluxo resultante é cor codificada para produzir uma imagem de perfusão. De acordo com nossos resultados anteriores, LSCI avalia a perfusão de sangue da gengiva com boa repetibilidade e reprodutibilidade9. Isto implica que é uma ferramenta confiável para monitorar alterações na microcirculação da mucosa oral, não só em experiências de curto prazo, mas também durante estudos de longo prazo para controlar a progressão da doença ou ferimento cura10.
Neste trabalho, apresentamos um relato de caso clínico para demonstrar que a alta resolução espacial de LSCI torna possível revelar o padrão de neovascularização de um enxerto de colágeno xenogénica. Além disso, neste caso indica que LSCI, devido à sua alta confiabilidade, poderia com sensibilidade detectar variação individual. Isto é importante como significativa variação anatômica local e um fundo diferente sistêmico entre os casos torna difícil padronizar a intervenção cirúrgica em ensaios clínicos de cirurgia periodontal.

<table><tbody><tr><td>PeriCam PSI-HR</td><td>Perimed AB, Estocolmo, Suécia</td><td></td><td>O sistema PeriCam PSI é um sistema de imagem baseado na tecnologia LASCA (LAser Speckle Contrast Analysis). O sistema mede a perfusão sanguínea superficial em grandes áreas com taxas de captura rápidas. Isso o torna ideal para investigações da dinâmica espacial e temporal da microcirculação em quase todos os tecidos.</td></tr><tr><td>PIMSoft</td><td>Perimed AB, Estocolmo, Suécia</td><td></td><td>O PIMSoft é um software de aquisição e análise de dados, destinado a ser utilizado em conjunto com o Sistema PeriCam PSI e o Sistema PeriScan PIM 3, para medição e imagem da perfusão sanguínea superficial.</td></tr><tr><td>Geistlich Mucograft</td><td>Geistlich, Suíça</td><td></td><td>É uma matriz de colina 3D exclusiva projetada especificamente para a regeneração de tecidos moles. É indicado para o ganho de tecido queratinizado e cobertura de recessão.</td></tr><tr><td>Omron M4</td><td>Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japão</td><td></td><td>Monitor de pressão arterial, que fornece leituras precisas.</td></tr><tr><td>Nikon D5200</td><td>Nikon Corportation, Tóquio, Japão</td><td></td><td>Tirar fotos intraorais</td></tr><tr><td>MS Excel</td><td>Microsoft Corporation, Redmond, Washington, EUA</td><td></td><td>O software usado para gerenciamento de dados</td></tr><tr><td>IBM SPSS Statistics 25</td><td>IBM Corp., Armonk, NY, EUA</td><td></td><td>O software usado para análise estatística</td></tr></tbody></table>

uma nova abordagem para o monitoramento de neovascularização de enxerto na gengiva humana

A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva

Laser do salpico contraste de imagem (LSCI) é um método novo para medir perfusão sanguínea superficial em grandes áreas. Desde que é não-invasivo e evita o contato direto com a área de medição, é apropriado para monitorar as mudanças do fluxo de sangue durante a cicatrização de feridas em pacientes humanos. Vestibuloplasty é a cirurgia periodontal para o vestíbulo oral, com o objetivo de restaurar a profundidade vestibular com alargamento simultâneo da gengiva queratinizada. Neste caso clínico especial, um retalho de espessura dividida foi elevado no primeiro pré-molar superior e uma matriz de colagénio xenogénica foi adaptado ao leito receptor resultante. LSCI foi usado para monitorar a re - e neovascularização da prótese e a mucosa circundante durante um ano. Um protocolo é introduzido para o ajuste correto da medição da microcirculação na mucosa oral, destacando as dificuldades e possíveis falhas.
O estudo de caso clínico apresentado demonstrou que — seguindo o protocolo apropriado — LSCI é um método adequado e confiável para acompanhar a microcirculação em uma cura ferida na mucosa bucal humana e dá informações úteis sobre a integração do enxerto.

Vestibuloplasty é a cirurgia periodontal para o vestíbulo oral, com o objetivo de aumentar a profundidade do vestibular, a zona da gengiva queratinizada e espessura de tecidos moles para o aprimoramento estético e função. O retalho de espessura dividida reposicionado apicalmente combinado com uma matriz de colágeno é um procedimento de vestibuloplasty usados com frequência. Matriz de colagénio xenogénica é uma alternativa viável para enxerto gengival autógeno para aumentar a quantidade de...

Este estudo apresenta um protocolo para medição da microcirculação em mucosa oral humana por imagens de contraste de salpico do laser. O acompanhamento da cicatrização após vestibuloplasty combinado com um enxerto de colágeno xenogénica é apresentado um caso clínico.

Uma nova abordagem para o monitoramento de neovascularização de enxerto na gengiva humana

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids ...

A Laser Speckle Contrast Imaging, ou LSCI, pode ajudar a monitorar mudanças de longo prazo na microcirculação gengival humana na clínica para rastrear a progressão da doença individual e a cicatrização de feridas. As principais vantagens dessa técnica são que ela não é invasiva e avalia a perfusão sanguínea da gingiva com boa repetibilidade e reprodutibilidade. Este método não requer ferramentas especiais para a localização da cabeça de medição e a cicatrização da ferida pós-operatória pode ser seguida dentro de um local cirúrgico de até seis centímetros quadrados.Para a configuração de imagem de contraste de manchas a laser, ligue o computador e os periféricos e ligue o instrumento de imagem de contraste de manchas a laser. Após o instrumento ter aquecido por pelo menos cinco minutos, abra o software e coloque o paciente em uma posição supina confortável em uma cadeira dentária. Coloque uma braçadeira no braço do paciente e um travesseiro de vácuo sob a cabeça do paciente.Em seguida, deixe o paciente descansar, sem ser perturbado, por 15 minutos antes que quaisquer medidas sejam tomadas. Enquanto isso, no menu Ferramentas, selecione e clique em Editor de Projetos. Uma nova janela

a-novel-approach-to-monitoring-graft-neovascularization-human

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Nosso grupo desenvolveu um sistema de cultura biorreator que imita as tensões pulsátil fisiológica do sistema cardiovascular para regenerar implantáveis ​​de pequeno diâmetro enxertos vasculares.

Engenharia Biológica Baseado em enxertos vasculares Usando um biorreator pulsátil

A Novel de alta resolução<em&gt; In vivo</em&gt; Técnica de Imagem para estudar a resposta dinâmica de estruturas intracranianas ao crescimento do tumor e Terapêutica

Descrevemos um ensaio de tampão matrigel para ilustrar o potencial angiogênico de um conjunto de fatores secretados por células cancerígenas usando duas modalidades de imagem complementares, ultrassom e endomicroscopia. O matrigel, um gel imitador de matriz extracelular (MEC), é utilizado para introduzir o hospedeiro (camundongo) com fatores angiogênicos secretados para o meio condicionado (CM).

Monitoramento Funcionalidade e Morfologia da vasculatura Recrutado por fatores secretados por geradores de Células Tumorais de crescimento rápido

Um protocolo de passo-a-passo para a colocação inter-posicional de engenharia de tecidos Vessels (TEVs) na artéria carótida de um carneiro usando anastomose end-to-end e avaliação digital em tempo real, in vivo até o sacrifício animal.

Técnica Cirúrgica para a Implantação de engenharia de tecidos enxertos vasculares e Subsequente<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoring

Implantação de enxertos ósseos autólogos e alogênicos constituem aceite abordagens para tratar a maior perda óssea craniofacial. No entanto, o efeito da composição do enxerto sobre a interacção entre a neovascularização, a diferenciação celular e a formação de osso não é clara. Nós apresentamos um protocolo de imagiologia multimodal objetivou elucidar a interdependência angiogênese-osteogênese na proximidade do enxerto.

Tomografia Computadorizada e imageamento óptico de acoplamento Osteogenesis-angiogênese para avaliar a integração do osso craniano Autoenxertos e Aloenxertos

Descreve-se um bioensaio baseado em células simples para a detecção, quantificação e a monitorização da actividade de membros da família de ligandos vasculares factor de crescimento endotelial. O ensaio utiliza receptores quiméricos expressos numa linha celular dependente de factores para proporcionar uma avaliação semi-quantitativa ou quantitativa de ligação ao receptor e a reticulação pelo ligando.

A Bioensaio simples para a avaliação dos fatores de crescimento endotelial vascular

Aqui, apresentamos um protocolo para visualizar vasos sanguíneos formação em vivo e em tempo real em 3D andaimes por microscopia do multiphoton. Angiogênese em andaimes geneticamente modificados foi estudado em modelo murino raspagem de osso crítico defeito. Mais novos vasos sanguíneos foram detectados no grupo de tratamento do que em controles.

Visualizando a angiogênese por Multiphoton microscopia In Vivo no andaime de 3D-PLGA/nhập geneticamente modificado para raspagem crítico reparo de defeito ósseo

O objetivo do protocolo é construir um modelo de gengiva humana inflamatória em vitro. Este modelo de tecido co cultiva três tipos de células humanas, HaCaT queratinócitos, fibroblastos gengivais e macrófagos THP-1, sob condições tridimensionais. Este modelo pode ser aplicado para investigar doenças periodontais, como gengivite e periodontite.

Equivalentes de tridimensional tecido humano inflamatória da gengiva

Um protocolo passo a passo para ensaios não destrutivos e longo período de acompanhamento do processo de remodelação vascular e degradação de andaime na cultura em tempo real de biodegradáveis poliméricos baseados em andaime engenharia de tecidos dos vasos sanguíneos com estimulação pulsátil usando a tomografia de coerência óptica é descrito aqui.

Monitoramento não destrutiva de desenvolvimento degradáveis baseados em andaime engenharia de tecidos dos vasos sanguíneos, usando a tomografia de coerência óptica

Este estudo apresenta o ensaio de migração bidimensional (2D) e o ensaio tridimensional (3D) de brotamento esferóide, juntamente com seus respectivos métodos de análise a jusante, incluindo extração de RNA e imunocitoquímica, como ensaios adequados para estudar a angiogênese in vitro.

Investigando a angiogênese em nível funcional e molecular, aproveitando o ensaio de migração de feridas por arranhões e o ensaio de brotamento de esferóides

O objetivo deste protocolo é fornecer uma abordagem padronizada para avaliar quantitativamente a integridade da barreira epitelial gengival murina, aplicando topicamente dextranos marcados com fluorescência de diferentes tamanhos moleculares na superfície gengival in vivo, seguido por imagens ex vivo usando um sistema de microscopia de fóton único.

Avaliação funcional da barreira epitelial gengival de camundongos usando traçadores fluorescentes

Aprenda a usar imagem de contraste de speckle a laser (LSCI) para monitorar microcirculação em mucosa oral humana. Este método não invasivo permite acompanhar a cicatrização pós-cirúrgica em tempo real.

Uma nova abordagem para o monitoramento de neovascularização de enxerto na gengiva humana

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