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Fluxo Cytometric deteção da recém-formada mama câncer células-tronco células após a reversão de a...
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Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
Flow Cytometric Detection of Newly-formed Breast Cancer Stem Cell-like Cells After Apoptosis Reversal

Fluxo Cytometric deteção da recém-formada mama câncer células-tronco células após a reversão de apoptose

Full Text
10,470 Views
11:21 min
January 26, 2019

DOI: 10.3791/58642-v

Yiyue Xu1,2, Chun So1, Hon-Ming Lam1,2, Ming-Chiu Fung1,2, Suk-Ying Tsang1,2,3,4

1School of Life Sciences,The Chinese University of Hong Kong, 2State Key Laboratory of Agrobiotechnology,The Chinese University of Hong Kong, 3Key Laboratory for Regenerative Medicine, Ministry of Education,The Chinese University of Hong Kong, 4Centre for Novel Biomaterials,The Chinese University of Hong Kong

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for isolating apoptotic breast cancer cells using fluorescence-activated cell sorting. It further explores the transition of non-stem cancer cells to cancer stem cell-like cells following apoptosis reversal, utilizing flow cytometry.

Key Study Components

Area of Science

  • Cell Biology
  • Oncology
  • Apoptosis Research

Background

  • Isolating genuine populations of apoptotic reversal cells has been challenging.
  • This limitation hinders the understanding of apoptosis reversal consequences.
  • The protocol aims to generate purer populations of these cells.
  • Normal cells can also undergo apoptosis reversal.

Purpose of Study

  • To develop a reliable method for isolating apoptotic reversal cells.
  • To enhance the understanding of the transition from non-stem to stem-like cancer cells.
  • To utilize widely available materials and equipment for the technique.

Methods Used

  • Fluorescence-activated cell sorting (FACS)
  • Flow cytometry for detection
  • Application of various apoptotic stimuli
  • Sorting of cells post-apoptosis for recovery

Main Results

  • The protocol successfully isolates purer populations of apoptotic reversal cells.
  • Recovery rates may be low due to the nature of the sorting process.
  • Different types of cells, including normal and chemo cells, can be studied.
  • The technique is applicable across various institutions.

Conclusions

  • This method provides a significant advancement in studying apoptosis reversal.
  • It allows for better understanding of cancer cell behavior post-apoptosis.
  • The approach can be adapted for various cell types and conditions.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this protocol?
The main advantage is the generation of purer populations of apoptotic reversal cells using widely available materials.
Can normal cells undergo apoptosis reversal?
Yes, normal cells can also undergo apoptosis reversal, in addition to breast cancer cells.
What techniques are used in this study?
The study employs fluorescence-activated cell sorting and flow cytometry.
What are the implications of this research?
This research enhances the understanding of cancer cell dynamics and potential therapeutic targets.
Is this technique applicable in various institutions?
Yes, the materials and equipment required are widely available across different institutions.
What types of cells can be studied using this protocol?
The protocol can be used to study breast cancer cells, normal cells, and various chemo cells.

Aqui, apresentamos um protocolo para isolar células de câncer de mama apoptotic classificando fluorescência-ativado da pilha e detectar ainda mais a transição de células-tronco de câncer de mama para células de células-tronco, como câncer de mama após a reversão de apoptose por citometria de fluxo.

Os isolamentos de populações genuínas de células de reversão apoptótica tem sido um problema anteriormente, o que limita muito nossa compreensão sobre as consequências da reversão da apoptose. Este protocolo nos permite gerar populações mais puras de células de reversão apoptótica. A principal vantagem dessa técnica é que os materiais e equipamentos utilizados estão amplamente disponíveis em diferentes instituições.

Esta técnica é prontamente aplicável para isolar uma população mais pura de células que sofreram reversão da apoptose. Como relatado anteriormente, as células normais também podem passar por reversão da apoptose, que além das células cancerígenas de mama, diferentes células de quimioterapia, bem como células normais, podem ser iniciadas e os vários estímulos apoptóticos podem ser usados. Como a célula de reversão passou por apoptose e triagem rápida, a taxa de recuperação geralmente é baixa.

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