Name: Desenvolvimento de uma câmara de teste de toxicidade de inalação somente nariz que fornece quatro concentrações de exposição de partículas nanométricas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-18T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Aprenda a validar uma câmara de inalação somente nariz para testes de toxicidade com múltiplas concentrações simultâneas. Este protocolo econômico segue diretrizes da OCDE e minimiza contaminação cruzada entre compartimentos.

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Esta pesquisa foi apoiada pelo Industrial tecnologia inovação programa (10052901), desenvolvimento de toxicidade de inalação nanomaterial altamente utilizáveis no comércio, através da Coreia avaliação Instituto de tecnologia Industrial pelos coreanos, sistema de teste Ministério do comércio, indústria e energia.

1. análise numérica métodos
<ol><li>Realizar a análise do campo de fluxo no interior da câmara de acordo com a forma geométrica, conforme descrito na Figura 1 e tabela 114. Nota: Uma análise numérica do campo de fluxo de acordo com a forma geométrica prevê o fluxo do aerossol e avalia-lo como um dispositivo testável.</li>
	<li>Projeto da câmara com colunas de 4 estágios x 12, 48 portas no total, onde o núcleo é dividido em uma torre de interior e exterior, como descrita na figura 1B. Nota: Cada fase tem 12 portas de exposição para a colocação dos animais experimentais. Satisfazer a recomendação sugerida pelo documento de orientação da OCDE (GD) 396.</li>
	<li>Para a exposição de single-concentração, coloque a placa de mistura no topo da torre interna para misturar o material de teste e garantir uma concentração uniforme entre os estágios. Para a exposição multiconcentration, separe a torre interna em quatro estágios e concentrações de exposição por um disco de separação. Nota: A placa de mistura</li>
</ol>2. preparação da avaliação experimental
<ol><li>
Câmara
	<ol>
<li>Dividir a câmara em três partes: a entrada, bainha e escape, conforme mostrado no diagrama esquemático (Figura 2). Nota: A entrada é onde o aerossol flui para a câmara interna, e a bainha é o espaço entre as torres de interiores e exteriores para fluxo de ar extra.</li>
		<li>O aerossol (ou teste artigo) à torre interior e animais experimentais, enquanto a exalação de animais que contém excedente aerossol flui para fora através de gases de escape, juntamente com o ar de bainha de abastecimento. Nota: Os detentores de animais são fechados e vazio.</li>
		<li>Manter a pressão interna da constante câmara usando um ventilador e um inversor, como a pressão interna do plenário é controlada pelo fluxo de ar a bainha.</li>
		<li>Equipamento para medir a uniformidade da concentração de aerossóis (ou artigo) de teste na câmara de mistura, localizada em frente à câmara de exposição nariz somente no caso de exposição single-concentração de design. Nota: A uniformidade do aerossol de teste pode ser avaliada pela sua distribuição concentração e tamanho número de partícula. Amostras de concentração individual câmara devem desviar a concentração média de câmara por não mais do que ± 10% para gases e vapores e por não mais do que ± 20% para aerossóis líquidos ou sólidos4,5,6,7 ,8. Assim, quando as partículas de teste não são constantes, o fluxo de aerossol pode ser ignorado através do exaustor.</li>
		<li>Verifique se há vazamentos verificar a confiabilidade do teste e garantir a segurança, confirmando um sistema fechado com ±500 Pa que é mantido por 30 min. Nota: O escapamento pode ser verificado por bolhas de sabão.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Monitoramento e controle ambiental
	<ol>
<li>Definir a taxa de afluência total do aerossol (single/multi) e bainha ar para 48 L/min ou 44 L/min (single ou multi, respectivamente) e 20 L/min, respectivamente e manter a pressão interna da câmara constante no Pa de −100 nas configurações de controle da Interface do usuário.</li>
		<li>Manter a temperatura e a umidade a 23 ° C e 45%, respectivamente. Use um humidificador para controlar a humidade do ar de exposição.</li>
		<li>Realizar um experimento em um ambiente controlado isothermal-isohumidity para dar cumprimento a OECD inalação toxicidade diretrizes4,6,7,8.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Medição do fluxo de uniformidade
	<ol>
<li>Fornece ar limpo de 48 L/min para a câmara de inalação através de um suprimento de ar limpo, incluindo um filtro HEPA, controlado por um controlador de fluxo de massa (MFC). Nota: O ar limpo é feito após a filtragem com um filtro HEPA.</li>
		<li>Estabilize o fluxo usando a câmara de mistura em caso de exposição single-concentração.</li>
		<li>Anexe um bocal de abastecimento para uma porta que injeta ar fresco ou o aerossol de teste (ou artigo) no caso da exposição multiconcentration.</li>
		<li>Medir a velocidade de fluxo por porta usando um medidor de fluxo de massa.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Geração de partículas
	<ol>
<li>Gere as nanopartículas de NaCl usando um cinco-jato atomizador para avaliar o projeto de câmara de inalação. Nota: Use uma solução de NaCl de 0.1%wt para gerar as nanopartículas de NaCl.</li>
		<li>Regular o MFC para controlar a quantidade de produção a 48 L/min do aerossol de NaCl misturado ar na concentração única e a 12 L/min do NaCl aerossol-misto de ar a multiconcentration todos os quatro estágios. Nota: Cada porta da câmara somente nariz recebe 1 L/min (i.e., 48 portas/nariz-somente câmara (quatro estágios); 48 portas/quatro estágios; 12 portos/estágio).</li>
		<li>Fornece ar limpo para diluição no bypass. Nota: O diâmetro mediano de contagem e desvio-padrão geométrico de nanopartículas de NaCl encontram 76 nm e 1.4 mantém, respectivamente.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Medição de uniformidade das partículas
	<ol>
<li>Medir a distribuição de tamanho de partícula do NaCl nanopartículas emitidas a partir os bicos injetores usando uma varredura dimensionador de partícula de mobilidade (SMPS) são compostas por um analisador diferencial mobilidade (DMA) e um contador de partículas de condensação (CPC).</li>
		<li>Use um neutralizador de aerossol de Am para remover a carga estática das partículas e reduzir a deposição de partículas nas paredes, melhorando assim a eficiência de medição18.</li>
		<li>Manter a relação entre o aerossol e bainha de caudal de ar de DMA em 01:10 para manter a taxa de fluxo do aerossol e a taxa de fluxo de ar de bainha em 1 L/min e 10 L/min, respectivamente.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. teste de uniformidade de fluxo
<ol><li>
Exposição de concentração multi
	<ol>
<li>Defina a velocidade de fluxo dos bicos de injeção através do fornecimento de ar limpo a 11 L/min através da entrada do aerossol. 11 Selecione porta bocais para cada quatro estágios.</li>
		<li>Medir a taxa de fluxo para conectar o medidor de vazão ao bocal do selecionado.</li>
		<li>Repita a etapa 3.1.2 3 x para verificar a reprodutibilidade.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Exposição individual-concentração
	<ol>
<li>Defina a velocidade de fluxo dos bicos de injeção através do fornecimento de ar limpo em 48 L/min através da entrada do aerossol. Selecione aleatoriamente 24 bicos de porta entre as 48 portas. Medida 3 x para verificar a reprodutibilidade.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. teste de uniformidade de partículas
<ol><li>
Exposição multiconcentration
	<ol>
<li>Defina a distribuição de tamanho de partícula dos bicos injetores, fornecendo as partículas geradas em 11 L/min através da entrada de aerossol (faça isso como descrito na secção 2).</li>
		<li>Selecionados aleatoriamente seis bocais de porta entre os quatro estágios; medida 3 x para verificar a reprodutibilidade.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Exposição individual-concentração
	<ol>
<li>Defina a distribuição de tamanho de partícula dos bicos injetores, fornecendo as partículas geradas em 20 L/min e ar puro a 28 L/min, perfazendo um total de 48 L/min através da entrada de aerossol (conforme descrito em 2.4 e 2.5).</li>
		<li>Selecione aleatoriamente seis bocais de porta entre os quatro estágios.</li>
		<li>Medir a concentração de partículas, para conectar o SMPS ao bocal do selecionado.</li>
		<li>Repita a etapa 4.2.3 3 x para verificar a reprodutibilidade.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. teste contaminação cruzada
<ol><li>Conjunto de três estágios, no caso da exposição multiconcentration.</li>
	<li>Conecte dois geradores com concentrações diferentes de solução e uma linha de ar limpo para as três etapas respectivas.</li>
	<li>Defina a distribuição de tamanho de partícula dos bicos injetores, fornecendo as partículas geradas e ar puro em 11 L/min através da entrada de aerossol (conforme descrito em 2.4 e 2.5).</li>
	<li>Selecionado aleatoriamente um bocal porta de todas as três fases.</li>
	<li>Medir a concentração de partículas, para conectar o SMPS para a porta selecionada.</li>
	<li>Repita o passo 5.5 x 15 para verificar a reprodutibilidade.</li>
</ol>

<ol><li>Phalen, R. F. Methods in Inhalation Toxicology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPhalen%2C+RF+%22Inhalation+Exposure+Methods%22">Inhalation Exposure Methods</a>. Phalen, R. F. , CRC Press. Boca Raton, FL. 69-84 (1997).</li>
<li>Moss, O. R., James, R. A., Asgharian, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+exhaled+air+on+inhalation+exposure+delivered+through+a+directed-flow+nose-only+exposure+system%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Influence of exhaled air on inhalation exposure delivered through a directed-flow nose-only exposure system.</a> Inhalation Toxicology. 18, 45-51 (2006).</li>
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<li>OECD TG 403. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+guideline+of+the+testing+of+chemicals+403%3A+Acute+inhalation+toxicity+testing%22">OECD guideline of the testing of chemicals 403: Acute inhalation toxicity testing</a>. , OECD. Paris, France. (2009).</li>
<li>OECD TG 436. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+guideline+of+the+testing+of+chemicals+436%3A+Acute+inhalation+toxicity+-+Acute+Toxic+Class+Method%22">OECD guideline of the testing of chemicals 436: Acute inhalation toxicity - Acute Toxic Class Method</a>. , OECD. Paris, France. (2009).</li>
<li>OECD GD 39. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Series+on+testing+and+assessment+Number+39%3A+Guidance+document+on+acute+Inhalation+toxicity+testing%22">Series on testing and assessment Number 39: Guidance document on acute Inhalation toxicity testing</a>. , OECD. Paris, France. (2009).</li>
<li>OECD TG 412. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+guideline+of+the+testing+of+chemicals+412%3A+Subacute+inhalation+toxicity+testing%22">OECD guideline of the testing of chemicals 412: Subacute inhalation toxicity testing</a>. , OECD. Paris, France. (2018).</li>
<li>OECD TG 413. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+guideline+of+the+testing+of+chemicals+413%3A+Subchronic+inhalation+toxicity+testing%22">OECD guideline of the testing of chemicals 413: Subchronic inhalation toxicity testing</a>. , OECD. Paris, France. (2018).</li>
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<li>Oldham, M. J., Phalen, R. F., Robinson, R. J., Kleinman, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+a+portable+whole-body+mouse+exposure+system%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Performance of a portable whole-body mouse exposure system.</a> Inhalation Toxicology. 16, 657-662 (2004).</li>
<li>Oldham, M. J., Phalen, R. F., Budiman, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Predicted+and+Experimentally+Measured+Aerosol+Deposition+Efficiency+in+BALB%2FC+Mice+in+a+New+Nose-Only+Exposure+System%5BTitle%5D)+AND+%22Aerosol+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Comparison of Predicted and Experimentally Measured Aerosol Deposition Efficiency in BALB/C Mice in a New Nose-Only Exposure System.</a> Aerosol Science and Technology. 43, 970-997 (2009).</li>
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<li>Jeon, K., Yu, I. J., Ahn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+newly+developed+nose-only+inhalation+exposure+chamber+for+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of newly developed nose-only inhalation exposure chamber for nanoparticles.</a> Inhalation Toxicology. 24 (9), 550-556 (2012).</li>
<li>Ji, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-Eight-Day+Inhalation+Toxicity+Study+of+Silver+Nanoparticles+in+Sprague-Dawley+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Twenty-Eight-Day Inhalation Toxicity Study of Silver Nanoparticles in Sprague-Dawley Rats.</a> Inhalation Toxicology. 19, 857-871 (2007).</li>
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<li>Pauluhn, J., Thiel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+approach+to+validation+of+directed-flow+nose-only+inhalation+chambers%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A simple approach to validation of directed-flow nose-only inhalation chambers.</a> Journal of Applied Toxicology. 27, 160-167 (2007).</li>
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 <a target="_blank" href="http://www.hse.gov.uk/research/rrpdf/rr274.pdf">http://www.hse.gov.uk/research/rrpdf/rr274.pdf</a> (2004).</li>
<li>Hansen, S. Charging of aerosol particles - An investigation of the possibility of using Americium-241 for SMPS chargers. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://lup.lub.lu.se/student-papers/record/8950313">http://lup.lub.lu.se/student-papers/record/8950313</a> (2018).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

Testes de toxicidade de inalação é atualmente o melhor método para avaliar materiais aerossol (partículas e fibras), vapores e gases inalados pelo sistema respiratório humano14,15. Existem dois métodos de exposição por inalação: todo o corpo e nariz somente. No entanto, um sistema único nariz minimiza a exposição por rotas noninhalation, tais como pele e olhos e permite testar com quantidades mínimas do artigo de teste, tornando-se o método preferencial de exposi...

Testes de toxicidade de inalação são o método mais confiável para avaliar os riscos de agentes químicos, partículas, fibras e nanomateriais1,2,3. Assim, mais agências reguladoras exigem a apresentação de toxicidade por inalação por dados de teste, quando a exposição a produtos químicos, partículas, fibras e nanomateriais é via inalação4,5,6,7 ,8. Atualmente, existem dois tipos de sistemas de toxicidade de inalação: exposição de corpo inteiro e nariz somente sistemas. Um sistema de teste de toxicidade por inalação padrão, todo o corpo ou somente nariz, requer pelo menos quatro câmaras para expor animais como ratos e camundongos para quatro diferentes concentrações, ou seja, controle de ar fresco e concentrações baixa, moderada e alta7 , 8. a organização para cooperação econômica e desenvolvimento (OCDE) teste diretrizes sugerem que a concentração alvo selecionado deverá permitir a identificação dos órgãos (com o alvo) e demonstração de uma resposta clara concentração7 ,8. O nível de alta concentração deve resultar em um nível claro de toxicidade, mas não causar mortalidade ou sinais persistentes que podem levar à morte ou evitar uma avaliação significativa do resultados7,8. Realizável nível ou alta concentração máxima dos aerossóis pode ser alcançada ao mesmo tempo atender o padrão de distribuição de tamanho de partícula. O nível de concentração moderada deve ser espaçado para produzir uma gradação de efeitos tóxicos entre aquele de baixa e alta concentrações7,8. O nível de baixa concentração, que de preferência seria um NOAEC (concentração não observado-efeitos adversos), deve produzir pouco ou nenhum sinal de toxicidade7,8. Câmara de corpo inteiro expõe os animais em uma condição de desenfreada em gaiolas com fio, enquanto a nariz somente câmara expõe um animal em uma condição contido no tubo confinado. A contenção impede a perda de aerossol por vazamento em torno do animal. Devido ao grande volume da câmara de corpo inteiro, requer um grande número de artigos do teste para ser exposto aos animais experimentais, enquanto o sistema de retenção do tubo no sistema de exposição somente nariz dificulta a circulação de animais e pode causar desconforto ou asfixia. No entanto, as orientações da OCDE inalação toxicidade teste reguladoras preferem o uso de inalação somente nariz sistemas4,5,6,7,8.
No entanto, acomodando um sistema de quatro câmaras, ou todo o corpo ou somente de nariz, é caro, espaço-consumindo e requer um sistema de limpeza e circulação de ar interno. Além disso, um sistema de quatro câmaras também pode exigir geradores de artigo de teste separado para expor os animais para as concentrações desejadas e um aparelho de medição separada para monitorar as concentrações de artigo de teste. Portanto, desde testes de toxicidade de inalação padrão envolve um investimento significativo, um sistema de exposição de corpo inteiro ou somente nariz mais conveniente e econômico precisa ser desenvolvido para uso em instalações de pequena investigação. Durante a criação de uma câmara de inalação, fluidos computacional, Modelagem dinâmica (CFD) é também frequentemente usada para atingir a partícula, gás ou vapor uniformidade9,10,11,12,13 . Avaliação por análise numérica e validação de resultados experimentais já foi realizados para a câmara de exposição de corpo inteiro para ratos10. Por exemplo, a trajetória de fluxo e partículas do ar ter sido modelada usando CFD, e a uniformidade de distribuição de partículas foi medida em nove partes do corpo inteiro câmara10. Além disso, a câmara somente nariz foi avaliada por análise numérica por CFD13. Depois disso, foi realizada avaliação para a câmara de exposição somente nariz, comparando os resultados da análise numérica, com um estudo experimental utilizando nanopartículas13.
Este estudo apresenta um sistema de câmara de inalação somente nariz que pode expor os animais experimentais para quatro diferentes concentrações em uma câmara. Inicialmente concebido usando CFD e uma análise numérica, o sistema proposto é comparado com um estudo experimental utilizando partículas de cloreto de sódio nanoescala para validar a uniformidade e a contaminação cruzada. Os resultados aqui apresentados indicam que a câmara somente nariz apresentada que pode expor os animais de quatro diferentes concentrações pode ser usada para estudos de exposição de animais em pequena escala acadêmico e instalações de pesquisa. A análise numérica é definida da seguinte maneira, da mesma forma como a definição de experimento. Para single-concentração exposição, o fluxo de aerossol para a torre interior é definido como 48 L/min e o fluxo de bainha para a torre exterior é definido como 20 L/min. Para a exposição de multiconcentration, o fluxo de aerossol para a torre interna de entrada é 11 L/min para cada fase. A pressão diferencial de saída mantém-se em -100 Pa para manter um bom fluxo de exaustão e impedir o escapamento. Supor que os detentores de animais são fechados e vazio.

<table><tbody><tr><td>FLUENT V.17.2&nbsp;</td><td>Medidor</td> de fluxo de massa (MFM) <td>do software</td>ANSYS <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>TSI 4043</td><td></td></tr><tr><td>SMPS (medidor de partículas de mobilidade de varredura)</td> <td>Grimm&nbsp;</td><td>Atomizador SMPS+C</td><td></td></tr><tr><td>5-Jet&nbsp;</td><td>HCTM</td><td>5JA-1000</td><td></td></tr><tr><td>Controlador de fluxo de massa (MFC)</td><td>Horiba</td><td>S48-32</td><td></td></tr></tbody></table>

desenvolvimento de uma câmara de teste de toxicidade de inalação somente nariz que fornece quatro concentrações de exposição de partículas nanométricas

Development of a Nose-only Inhalation Toxicity Test Chamber That Provides Four Exposure Concentrations of Nano-sized Particles

Usando uma análise numérica baseada no computarizados dinâmica dos fluidos, uma câmara de toxicidade de inalação somente nariz com quatro concentrações diferentes de exposição é projetada e validada para a uniformidade do campo de fluxo e a contaminação cruzada entre os portos de exposição para cada concentração. Os valores de campo de fluxo projetado são comparados com os valores de medição de exposição portas localizados horizontalmente e verticalmente. Para este efeito, partículas de cloreto de sódio nanoescala são geradas como teste de partículas e apresentou à câmara de inalação para avaliar a contaminação cruzada e a concentração de manutenção entre as câmaras, para cada grupo de concentração. Os resultados indicam que a câmara de inalação multiconcentration projetado pode ser usada na toxicidade de inalação animais testes sem contaminação cruzada entre grupos de concentração. Além disso, a câmara de toxicidade de inalação multiconcentration projetado também pode ser convertida em uma câmara de inalação de single-concentração. Testes suplementares com gás, vapor orgânico ou não-nanoescala partículas irão garantir o uso da câmara no teste de inalação de outros artigos de teste.

Montagem experimental
A Figura 1 mostra um diagrama esquemático de um sistema de câmara de inalação somente nariz, incluindo um gerador de partículas com um MFC, câmara somente nariz e instrumentos de medição de partículas para o monitoramento da qualidade do ar, controlador e módulo de escape, baseado no secção 2 do protocolo.
Projeto de anális...

Uma câmara de toxicidade de inalação somente nariz capaz de testar a toxicidade de inalação em quatro concentrações de exposição diferente foi desenhada e validada para a uniformidade do campo de fluxo e a contaminação cruzada entre os portos de exposição para cada concentração. Aqui, apresentamos um protocolo para confirmar que a câmara projetada é eficaz para testes de toxicidade de inalação.

Desenvolvimento de uma câmara de teste de toxicidade de inalação somente nariz que fornece quatro concentrações de exposição de partículas nanométricas

Using a numerical analysis based on computerized fluid dynamics, a nose-only inhalation toxicity chamber with four different exposure concentrations is ...

Apresentamos um protocolo de teste que cumpre as Diretrizes da OCDE para testes de toxicidade por inalação para exposição de concentração única e múltipla. A câmara de inalação de múltiplas concentrações, que pode testar até quatro concentrações de exposição ao mesmo tempo, será mais econômica para pequenos institutos de pesquisa. Para começar a testar uma câmara de concentração única, sele a câmara e verifique se há vazamentos em 500 e 500 pascals negativos por 30 minutos cada.Em seguida, coloque a temperatura do ar limpo para 23 graus Celsius e 45% de umidade relativa. Comece a fluir ar limpo através da entrada do aerossol e da bainha a 48 e 20 litros por minuto, respectivamente. Coloque o diferencial de pressão de escape para 100 pascals negativos.Uma vez estabilizado o fluxo, meça as velocidades de fluxo em três portas selecionadas aleatoriamente de cada nível para confirmar que o fluxo é uniforme. A vazão deve ser de cerca de um litro por minuto. Repita as medidas mais duas vezes.Em seguida, pare o fluxo de ar e carregue uma solução de cloreto de sódio de 0,1% em peso no sistema de geração de aerossol. Inicie a geração de aerossol a 20 litros por minuto com ar limpo como o gás transportador. Diluir o aerossol com 28 litros por minuto de ar limpo.Configure um sistema de medição de tamanho de partícula e selecione aleatoriamente três portas de cada nível da câmara. Meça a distribuição do tamanho da partícula em cada porta selecionada três vezes. Para começar a configurar uma câmara de multi-concentração, verifique se há vazamentos e ajuste o fornecimento de ar limpo para 23 graus Celsius e 45% de umidade relativa.Defina o escapamento para manter uma pressão diferencial de 100 pascals negativos. Em seguida, conecte um suprimento de ar limpo a uma porta no compartimento superior e comece a fluir ar limpo através do compartimento a 11 litros por minuto. Uma vez estabilizado o fluxo, meça a velocidade de fluxo em cada porta disponível do compartimento superior três vezes.Repita este processo para os outros três compartimentos. Em seguida, carregue uma solução de cloreto de sódio de 0,1% em peso no gerador de aerossol. Configure o sistema de diluição do aerossol para produzir um fluxo de aerossol a 11 litros por minuto.Conecte a entrada do aerossol ao compartimento superior, aguarde a estabilização do fluxo e selecione aleatoriamente seis portas desse compartimento. Meça a distribuição do tamanho das partículas em cada uma dessas portas três vezes usando o sistema de medição de tamanho de partículas. Repita este processo para cada compartimento.Lave os compartimentos com ar limpo por 30 minutos quando estiver completo. Em seguida, conecte uma entrada de ar limpo ao compartimento superior e flua ar limpo através dele a 11 litros por minuto. Configure o sistema de diluição do aerossol para fluxos de aerossol de baixa concentração e alta concentração a 11 litros por minuto.Conecte a linha de baixa concentração ao segundo compartimento mais alto e a linha de alta concentração ao compartimento inferior. Espere 10 minutos para que os fluxos se estabilizem. Em seguida, selecione aleatoriamente uma porta de cada um dos três compartimentos e meça a concentração de aerossol nos portos selecionados 15 vezes cada para verificar se há contaminação cruzada.Ambas as câmaras de exposição de concentração única e multi-concentração apresentaram boa uniformidade de fluxo em cada nível horizontal da câmara. Os fluxos normalizados foram próximos aos valores calculados durante a modelagem do sistema. A uniformidade do bom fluxo também foi observada verticalmente na câmara de concentração única.A câmara multi-concentração tem apenas um nível de portas por compartimento, de modo que as medidas diretas de uniformidade vertical não eram aplicáveis. A concentração de partículas também era uniforme horizontalmente para ambas as câmaras, e era uniforme verticalmente para a câmara de concentração única. As concentrações de aerossóis em diferentes compartimentos da câmara multi-concentração apresentaram relativamente pouca variação em 15 medições, indicando mínima contaminação cruzada entre compartimentos.É importante verificar se há reprodutibilidade ao longo do procedimento, especialmente durante o teste experimental de avaliação de desempenho de teste de contaminação cruzada. Os testes de avaliação de desempenho podem ser estendidos comparando o resultado experimental com a modelagem da dinâmica computacional do fluido do sistema de câmara.

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A inalação de nanopartículas de aerossóis facilidade de exposição de corpo inteiro foi construído para o dióxido de titânio nano-sized...

Todo o corpo de nanopartículas de aerossóis exposições por inalação

Este protocolo destina-se a demonstrar o método de exposição de culturas de células a produtos químicos tóxicos inalados. Exposição de diferenciado interface ar-líquido (LPA) culturas de células epiteliais das vias aéreas oferece um modelo único de exposição das vias aéreas de gases tóxicos como o cloro. Nesse artigo, descrevem efeito de exposição ao cloro em culturas de interface ar-líquido de células epiteliais e de cultura submersa de cardiomiócitos. Em sistemas de exposição in vitro...

A cultura in vitro modelo celular para Toxic Chemical Testing Inhaled

Projetamos e desenvolvemos uma configuração eficaz de aerossolização de nanopowder e protocolo operacional. O sistema gerou aerossóis de nanopartículas com concentrações numéricas estáveis e distribuições de tamanho por longos períodos, exigindo apenas pequenas quantidades de material de teste (mín. 200 mg).

Um sistema para criar aerossóis de nanopartículas estáveis ​​de Nano pó

A liberação de nanopartículas é testada usando um sistema de câmara que inclui um contador de partículas de condensação, um contador óptico de partículas e portas de amostragem para coletar amostras de filtro para análise de microscopia. O sistema de câmara proposto pode ser usado efetivamente para testes de liberação de nanomateriais com uma faixa de dados repetível e consistente.

Ensaios de nanopartículas de lançamento a partir de um composto que contém Nanomaterial Usando um sistema de câmara

A unidade de inalação aqui descritos possam gerar, de amostra para a caracterização, e uniformemente depositar um aerossol da droga nos pulmões de roedores. Isto permite a determinação de pré-clínica da eficácia e segurança das doses de medicamentos depositados nos pulmões; dados fundamentais que permitem o desenvolvimento de medicamentos inalados clínica.

Pó seco e nebulizada de inalação de aerossóis de produtos farmacêuticos entregue no Ratos Usando um nariz somente Sistema de Exposição

Os usuários de cigarro eletrônico (e-cig) estão a aumentar em todo o mundo. Pouco, no entanto, é conhecido sobre os efeitos de saúde induzidos por aerossóis inalados e-cig. Este artigo descreve uma técnica de geração de aerossol e-cig apropriada para exposições de animais e estudos toxicológicos posteriores. Esses protocolos são necessários para estabelecer sistemas de exposição experimentalmente reproduzíveis e padronizada e-cig.

Geração de aerossol de cigarro eletrônico por um dispositivo de máquina-Vaping de terceira geração: aplicativo para estudos toxicológicos

Aqui, apresentamos um protocolo para realizar exposições de aerossol de celular portátil e medir a resposta celular. O método utiliza células, crescidas na interface ar-líquido, imitando a fisiologia na vivo . Observou-se resposta celular de aerossóis de nanopartículas de cobre como estresse oxidativo através da geração de espécies reativas de oxigênio e citotoxicidade como liberação de lactato desidrogenase.

Um novo portátil em Vitro Cassette exposição para amostragem de aerossol

Apresentamos um sistema robusto, transferível e preditivo de exposição in vitro para a triagem e monitoramento de partículas transmitidas pelo ar sobre sua citotoxicidade pulmonar aguda, expondo células pulmonares humanas cultivadas na interface ar-líquido (ALI).

Avaliação da toxicidade da inalação aguda de partículas transmitidas por expor células pulmonares humanas cultivadas na Interface Ar-Líquido

Descrito é o método de cultura celular e exposição de um modelo brônquico in vitro para exposição realista e repetida de inalação a partículas para testes de toxicidade.

Um modelo epitelial de interface ar-líquido para exposição de inalação realista e repetida a partículas aéreas para testes de toxicidade

Os cartuchos vape destilados de cannabis são dispositivos alimentados por bateria que aerossolizam extratos contendo altas concentrações de canabinóides. A ausência de modelos pré-clínicos estabelecidos para esses produtos cria desafios no estudo de seus efeitos fisiológicos. Para resolver essa lacuna, foi desenvolvido um modelo murino de inalação pré-clínico padronizado para destilados de cannabis vaporizados.

Desenvolvimento de um modelo pré-clínico de inalação para testar destilados de cannabis vaporizados

Aprenda a validar uma câmara de inalação somente nariz para testes de toxicidade com múltiplas concentrações simultâneas. Este protocolo econômico segue diretrizes da OCDE e minimiza contaminação cruzada entre compartimentos.

Desenvolvimento de uma câmara de teste de toxicidade de inalação somente nariz que fornece quatro concentrações de exposição de partículas nanométricas (Vídeo) | JoVE Journal

Desenvolvimento de uma câmara de teste de toxicidade de inalação somente nariz que fornece quatro concentrações de exposição de partículas nanométricas

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