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DOI: 10.3791/58818-v
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Nós descrevemos um método simples para a rápida quantificação dos polifosfatos inorgânicos em diversas bactérias, incluindo espécies de micobactérias, Gram-positivas e Gram-negativas.
O polifosfato inorgânico é um elemento-chave na resposta ao estresse bacteriano. Mas os métodos mais antigos para extrair e medir o pólipo em bactérias são complexos e intensivos em mão-de-obra. A principal vantagem desta técnica é que ela permite quantificação rápida, sensível e barata dos níveis de pólipo em uma variedade de diferentes espécies bacterianas.
O procedimento será demonstrado por Arya Pokhrel, uma estudante de graduação do meu laboratório. Para começar, cresça bactérias lactobacillus reuteri em meio de indução de enzimas malic sem cistina a 37 graus celsius durante a noite sem tremer. Centrifugar um mililitro desta cultura durante a noite em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro para colher células suficientes para produzir um total de 50 a 100 microgramas de proteína celular.
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