Avaliação de biomarcadores em Glioma por imuno-histoquímica na parafina Glioma 3D Neurosphere culturas

Este protocolo é significativo porque pode ser usado para estudar a presença de biomarcador de glioma por um método que preserva a estrutura 3D das neurosferas tumorais. A principal vantagem deste protocolo é que a morfologia das neurosferas é mantida em comparação com o método citospina no qual as células são submetidas a manipulação estressante e se tornam achatadas. Este método pode ser aplicado a qualquer outro sistema de cultura tecidual em que as células são cultivadas em 3D e a manutenção da estrutura é importante.

Para começar, cultura neurosferas tumorais ou NS em um frasco T-25 até que as células sejam confluentes. Eleja o tumor NS em um tubo cônico de 15 mililitros. Impellet o NS a 300 Gs por cinco minutos.