Name: Um eletrodo de Nanopore sem fio fechado-tipo de análise de nanopartículas única (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 31 s
Description: Aprenda a fabricar um eletrodo de nanopore sem fio fechado para análise eletroquímica de nanopartículas únicas. Este método oferece alta resolução temporal e corrente para estudos em nanociência.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Esta pesquisa foi apoiada pela Fundação Nacional de ciências naturais da China (61871183,21834001), inovação programa de Shanghai Municipal educação Comissão (2017-01-07-00-02-E00023), o projeto "Chen Guang" da educação Municipal Xangai Comissão e Fundação de desenvolvimento de educação de Shanghai (17CG 27).

1. preparação de soluções
Nota: Preste atenção às precauções gerais de segurança para todos os produtos químicos. Descarte de produtos químicos em uma coifa e usar luvas, óculos e um jaleco. Manter líquidos inflamáveis, longe do fogo ou faíscas. Todas as soluções aquosas foram preparadas com água ultrapura (18,2 MΩ cm a 25 ° C). As soluções preparadas foram filtradas usando um filtro de tamanho de poros de 0,22 μm.
<ol><li>
Preparação da solução de KCl
	<ol>
<li>Dissolva 0,074 g de cloreto de potássio em 100 mL de água desionizada.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparação da solução de4 NaBH
	<ol>
<li>Dissolva 0,018 g de borohidreto de sódio em 10 mL de etanol.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparação da solução de4 HAuCl
	<ol>
<li>Dissolva 0,010 g de cloreto de potássio em 1 mL de solução de Ácido cloroáurico 1%.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparação de borracha de silicone
	<ol>
<li>Misture a borracha de silicone, que contém a parte A e parte B (ver Tabela de materiais) na proporção de 1:1 em volume.</li>
		<li>Use a borracha de silicone misturadas para pintar uma área de reação no slide imediatamente durante o tempo de pote de 1 min.</li>
		<li>Cure a borracha do silicone preparado no slide por 5 min.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparação de nanopartículas de ouro30
	<ol>
<li>Adicione 4,8 mL Ácido cloroáurico com uma fração em massa de 1% a 40 mL de água desionizada com agitação vigorosa.</li>
		<li>Aqueça a solução à ebulição.</li>
		<li>Adicione 10 mL de uma solução de citrato trissódico com uma fração em massa de 1% na solução.</li>
		<li>Aquece a solução para um adicional 15 min até a solução final é vermelha na cor. Nota: No nosso caso, a solução de Ácido cloroáurico foi rapidamente reduzida em citrato trissódico, e observou-se que a solução rapidamente mudou de amarelo-claro a escuro-preto.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. preparação da instalação Experimental
<ol><li>
Preparação do atual sistema de medição
	<ol>
<li>Ligue o sistema de medição atual contendo o amplificador atual (consulte a Tabela de materiais) e sistema de aquisição de dados de baixo ruído (ver Tabela de materiais)</li>
		<li>Ligue o modo de tensão-braçadeira.</li>
		<li>Defina a largura de banda do filtro à taxa de 10 kHz e amostragem de 100 kHz.</li>
		<li>Montar uma gaiola cobre caseira específica concebida para proteger o ruído externo para células experimentais e o pré-amplificador no microscópio invertido (ver Tabela de materiais).</li>
		<li>Aterre o shell da gaiola de Faraday, conchas do amplificador e sistema de microscópio invertido.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Instalação do sistema de detecção de campo escuro
	<ol>
<li>Geração do ouro nanotip dentro do nanopipette é monitorada pelo microscópio de campo escuro –. Nota: Um sistema de microscópio invertido (ver Tabela de materiais) é usado para tirar imagens e espectros de dispersão. Uma câmera de CCD digital verdadeiro-cor é empregada para tirar fotos do eletrodo nanopipette e nanopore. Um condensador de campo escuro [abertura numérica (NA) = 0,8 – 0,95)] é utilizado para formar uma iluminação de campo escuro. 10 X (at = 0.3), 20 X (at = 0,45) e 40 X (at = 0.6) objectivos são usados para coletar imagens de WNE o tipo fechado. Detecção de fluorescência é usada mais, verificar se existem lacunas entre a nanotip e a parede interna do nanopipette. Esta experiência é realizada por outro EMCCD (ver Tabela de materiais) também integrado no microscópio invertido, e a luz de excitação é uma lâmpada de mercúrio incorporado com um filtro passa-faixa de 450-490 nm.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. fabricação de tipo fechado WNE
<ol><li>
Fabricação de nanopipettes
	<ol>
<li>Colocar os capilares de quartzo (ver Tabela de materiais) em um tubo de centrífuga de 15 mL cheio com acetona por 10 min de limpeza ultra-sônica.</li>
		<li>Decantar a acetona e, em seguida, adicionar etanol no tubo de centrífuga mesmo.</li>
		<li>Colocar o tubo de centrifugação em um líquido de limpeza ultra-sônico para 10 min de limpeza.</li>
		<li>Colocar os capilares no outro tubo de centrífuga de 15 mL com água desionizada para remoção do etanol, com 10 min de limpeza ultra-sônica.</li>
		<li>Ultra-sônico continuamente limpo os capilares três vezes com água desionizada para remover o etanol residual.</li>
		<li>Seque os capilares usando um fluxo de gás nitrogênio.</li>
		<li>Manter os capilares num tubo de centrífuga, limpa e nova.</li>
		<li>Ligue o extrator de laser CO2 (ver Tabela de materiais)</li>
		<li>Pré-aqueça o extrator para 15-20 min garantir uma potência constante do laser.</li>
		<li>Instale o capilar limpo no puxador.</li>
		<li>Defina os parâmetros puxando de calor do filamento, velocidade, atraso e força de tracção no painel do extrator de laser CO2 para um diâmetro específico. O parâmetro detalhado para puxar um 30 nm de diâmetro nanopipette neste protocolo é mostrado na tabela 1 (Figura 1).</li>
		<li>Corrigir o nanopipette preparado em uma placa de Petri com o adesivo reutilizável (veja a Tabela de materiais) para a caracterização mais.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Fabricação de fechado-tipo WNE
	<ol>
<li>Injecte 10 μL da solução preparada de4 HAuCl do nanopipette com um microloader.</li>
		<li>Centrifugue a nanopipette por 5 min a cerca de 1878 x g para a remoção de bolhas de ar na nanopipette. Nota: Para este passo, colocamos o nanopipette com a ponta virada para baixo em um suporte caseiro dentro de um tubo de centrífuga de 2 mL.</li>
		<li>Corrigir o nanopipette em uma lamela com a borracha de silicone preparado (consulte a etapa 1.4) e definir a área dentro do nanopipette como o lado "cis" e como o "trans" do lado de fora.</li>
		<li>Espere 5 minutos até que a borracha seja curada.</li>
		<li>Coloca o conjunto integrado na tabela objetiva do microscópio invertido.</li>
		<li>Ativar e ajustar a iluminação de campo escuro para focalizar a ponta nanopipette sob um objectivo de microscópio X 10.</li>
		<li>Alterar para 20 X e 40 X objetivos, para uma maior resolução espacial.</li>
		<li>Coloque um eletrodo de Ag/AgCl dentro do nanopipette.</li>
		<li>Coloque o eletrodo de Ag/AgCl outros aterrado para o lado de trans .</li>
		<li>Conecte um par de eletrodos de Ag/AgCl o pré-amplificador.</li>
		<li>Ligue o sistema de medição atual e o software correspondente (ver Tabela de materiais) para a gravação de corrente iônica.</li>
		<li>Definir o potencial aplicado a 300 mV.</li>
		<li>Adicione lentamente 150 μL de solução de4 NaBH no lado trans para desencadear a reação entre HAuCl4 e NaBH4 (Figura 2). Nota: A redução de NaBH4 em solução aquosa ocorre a uma taxa de reação violenta. Portanto, a geração de H2 o redução da NaBH4 pode induzir a uma estrutura defeituosa da nanotip pela geração de cáries durante o crescimento de ouro nanotip.</li>
		<li>Simultaneamente, eletricamente e opticamente gravar o rastreamento atual e o campo escuro imagem/dispersão espectros usando os atuais medição e campo escuro sistemas de detecção (Figura 3). Nota: A solução de etanol é volátil sob iluminação de campo escuro. Preste atenção para o volume de etanol durante o processo de fabricação.</li>
		<li>Desligue o potencial aplicado após iônica atual rastreamento volta a 0 PA.</li>
		<li>Lave o preparado WNE tipo fechado com fluindo deionizada do fundo para a ponta.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Caracterização de fechado-tipo WNE
	<ol>
<li>Caracterizar o tipo fechado WNE com um microscópio eletrônico de varredura (MEV), que é um método geral para a caracterização da nanopipettes22,31,32,33,34 .</li>
		<li>Use um experimento fluorescente de íons cálcio para verificar a condição da selagem do ouro nanotip dentro do nanopipette.<ol>
<li>Injecte 10 μL de solução de CaCl2 lado cis da solução WNE e Fluo-8 tipo fechado no lado de trans .</li>
			<li>Conecte os eletrodos de Ag/AgCl o headstage.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Aplique um viés de 400 mV potencial e usar o EMCCD (consulte a Tabela de materiais) para monitorar a resposta de fluorescência na área de ponta. Use o feixe de íons de foco (FIB) para esculpir o tipo fechado WNE da ponta ao fundo e, em seguida, determinar o comprimento da camada interior metálica ou nanotip com caracterização de SEM.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Nanopartículas única colisão com WNE tipo fechado
	<ol>
<li>Altere a solução nas laterais trans e cis para uma solução de KCl após a fabricação de WNE o tipo fechado.</li>
		<li>Transferi 50 μL de solução de nanopartículas de ouro 30 nm para o lado de trans . Gravar o sinal da corrente de eventos de colisão de nanopartículas único em um potencial de 300 mV (Figura 5).</li>
		<li>Altere a tensão aplicada para monitorar a frequência, amplitude e mudança de forma do sinal atual.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Vajda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subnanometre+platinum+clusters+as+highly+active+and+selective+catalysts+for+the+oxidative+dehydrogenation+of+propane%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Subnanometre platinum clusters as highly active and selective catalysts for the oxidative dehydrogenation of propane.</a> Nature Materials. 8 (3), 213-216 (2009).</li>
<li>Liu, G. L., Long, Y. T., Choi, Y., Kang, T., Lee, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantized+plasmon+quenching+dips+nanospectroscopy+via+plasmon+resonance+energy+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantized plasmon quenching dips nanospectroscopy via plasmon resonance energy transfer.</a> Nature Methods. 4 (12), 1015-1017 (2007).</li>
<li>Hu, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+production+and+high+photocatalytic+activity+of+ZnS+nanoporous+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edtion%22%5BJournal%5D)">Mass production and high photocatalytic activity of ZnS nanoporous nanoparticles.</a> Angewandte Chemie International Edtion. 44 (8), 1269-1273 (2005).</li>
<li>Martinez, B., Obradors, X., Balcells, L., Rouanet, A., Monty, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+temperature+surface+spin-glass+transition+in+%CE%B3-Fe+2+O+3+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Review+Letters%22%5BJournal%5D)">Low temperature surface spin-glass transition in γ-Fe 2 O 3 nanoparticles.</a> Physical Review Letters. 80 (1), 181(1998).</li>
<li>Fang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmonic+Imaging+of+Electrochemical+Reactions+of+Single+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Accounts+of+Chemical+Research%22%5BJournal%5D)">Plasmonic Imaging of Electrochemical Reactions of Single Nanoparticles.</a> Accounts of Chemical Research. 49 (11), 2614-2624 (2016).</li>
<li>Mirkin, M. V., Sun, T., Yu, Y., Zhou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrochemistry+at+One+Nanoparticle%5BTitle%5D)+AND+%22Accounts+of+Chemical+Research%22%5BJournal%5D)">Electrochemistry at One Nanoparticle.</a> Accounts of Chemical Research. 49 (10), 2328-2335 (2016).</li>
<li>Murray, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoelectrochemistry%3A+metal+nanoparticles%2C+nanoelectrodes%2C+and+nanopores%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Reviews%22%5BJournal%5D)">Nanoelectrochemistry: metal nanoparticles, nanoelectrodes, and nanopores.</a> Chemical Reviews. 108 (7), 2688-2720 (2008).</li>
<li>Anderson, T. J., Zhang, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-Nanoparticle+Electrochemistry+through+Immobilization+and+Collision%5BTitle%5D)+AND+%22Accounts+of+Chemical+Research%22%5BJournal%5D)">Single-Nanoparticle Electrochemistry through Immobilization and Collision.</a> Accounts of Chemical Research. 49 (11), 2625-2631 (2016).</li>
<li>Fu, K., Bohn, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanopore+Electrochemistry%3A+A+Nexus+for+Molecular+Control+of+Electron+Transfer+Reactions%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Central+Science%22%5BJournal%5D)">Nanopore Electrochemistry: A Nexus for Molecular Control of Electron Transfer Reactions.</a> ACS Central Science. 4 (1), 20-29 (2018).</li>
<li>Zaino, L. P., Ma, C., Bohn, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanopore-enabled+electrode+arrays+and+ensembles%5BTitle%5D)+AND+%22Microchimica+Acta%22%5BJournal%5D)">Nanopore-enabled electrode arrays and ensembles.</a> Microchimica Acta. 183 (3), 1019-1032 (2016).</li>
<li>Katemann, B. B., Schuhmann, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+and+Characterization+of+Needle-Type%5BTitle%5D)+AND+%22Electroanalysis%22%5BJournal%5D)">Fabrication and Characterization of Needle-Type.</a> Electroanalysis. 14 (1), 22-28 (2002).</li>
<li>Penner, R. M., Heben, M. J., Longin, T. L., Lewis, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+and+use+of+nanometer-sized+electrodes+in+electrochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Fabrication and use of nanometer-sized electrodes in electrochemistry.</a> Science. 250 (4984), 1118-1121 (1990).</li>
<li>Watkins, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zeptomole+voltammetric+detection+and+electron-transfer+rate+measurements+using+platinum+electrodes+of+nanometer+dimensions%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Zeptomole voltammetric detection and electron-transfer rate measurements using platinum electrodes of nanometer dimensions.</a> Analytical Chemistry. 75 (16), 3962-3971 (2003).</li>
<li>Liu, Y., Li, M., Zhang, F., Zhu, A., Shi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+Au+Disk+Nanoelectrode+Down+to+3+nm+in+Radius+for+Detection+of+Dopamine+Release+from+a+Single+Cell%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Development of Au Disk Nanoelectrode Down to 3 nm in Radius for Detection of Dopamine Release from a Single Cell.</a> Analytical Chemistry. 87 (11), 5531-5538 (2015).</li>
<li>Li, Y., Bergman, D., Zhang, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+electrochemical+response+of+1-3+nm+Pt+disk+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Preparation and electrochemical response of 1-3 nm Pt disk electrodes.</a> Analytical Chemistry. 81 (13), 5496-5502 (2009).</li>
<li>Kasianowicz, J. J., Brandin, E., Branton, D., Deamer, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+individual+polynucleotide+molecules+using+a+membrane+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Characterization of individual polynucleotide molecules using a membrane channel.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (24), 13770-13773 (1996).</li>
<li>Cao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+oligonucleotides+of+different+lengths+with+a+wild-type+aerolysin+nanopore%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">Discrimination of oligonucleotides of different lengths with a wild-type aerolysin nanopore.</a> Nature Nanotechnology. 11 (8), 713-718 (2016).</li>
<li>Cao, C., Long, Y. -T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+Nanopores%3A+Confined+Spaces+for+Electrochemical+Single-Molecule+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Accounts+of+Chemical+Research%22%5BJournal%5D)">Biological Nanopores: Confined Spaces for Electrochemical Single-Molecule Analysis.</a> Accounts of Chemical Research. 51 (2), 331-341 (2018).</li>
<li>Sha, J. J., Si, W., Xu, W., Zou, Y. R., Chen, Y. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glass+capillary+nanopore+for+single+molecule+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Science+China-Technological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Glass capillary nanopore for single molecule detection.</a> Science China-Technological Sciences. 58 (5), 803-812 (2015).</li>
<li>Ying, Y. L., Zhang, J., Gao, R., Long, Y. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanopore-based+sequencing+and+detection+of+nucleic+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">Nanopore-based sequencing and detection of nucleic acids.</a> Angewandte Chemie International Edition. 52 (50), 13154-13161 (2013).</li>
<li>Lan, W. J., Holden, D. A., Zhang, B., White, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle+transport+in+conical-shaped+nanopores%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle transport in conical-shaped nanopores.</a> Analytical Chemistry. 83 (10), 3840-3847 (2011).</li>
<li>Karhanek, M., Kemp, J. T., Pourmand, N., Davis, R. W., Webb, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+DNA+molecule+detection+using+nanopipettes+and+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Single DNA molecule detection using nanopipettes and nanoparticles.</a> Nano Letters. 5 (2), 403-407 (2005).</li>
<li>Morris, C. A., Friedman, A. K., Baker, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+nanopipettes+in+the+analytical+sciences%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Applications of nanopipettes in the analytical sciences.</a> Analyst. 135 (9), 2190-2202 (2010).</li>
<li>Yu, R. -J., Ying, Y. -L., Gao, R., Long, Y. -T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confined+Nanopipette+Sensing%3A+From+Single+Molecules%2C+Single+Nanoparticles+to+Single+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+Interntaional+Edition%22%5BJournal%5D)">Confined Nanopipette Sensing: From Single Molecules, Single Nanoparticles to Single Cells.</a> Angewandte Chemie Interntaional Edition. , (2018).</li>
<li>Gao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+30+nm+Nanopore+Electrode%3A+Facile+Fabrication+and+Direct+Insights+into+the+Intrinsic+Feature+of+Single+Nanoparticle+Collisions%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+Interntaional+Edition%22%5BJournal%5D)">A 30 nm Nanopore Electrode: Facile Fabrication and Direct Insights into the Intrinsic Feature of Single Nanoparticle Collisions.</a> Angewandte Chemie Interntaional Edition. 57 (4), 1011-1015 (2018).</li>
<li>Ying, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymmetric+Nanopore+Electrode-Based+Amplification+for+Electron+Transfer+Imaging+in+Live+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Asymmetric Nanopore Electrode-Based Amplification for Electron Transfer Imaging in Live Cells.</a> Journal of the American Chemical Society. 140 (16), 5385-5392 (2018).</li>
<li>Gao, R., Ying, Y. L., Hu, Y. X., Li, Y. J., Long, Y. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+Bipolar+Nanopore+Electrode+for+Single+Small+Molecule+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Wireless Bipolar Nanopore Electrode for Single Small Molecule Detection.</a> Analytical Chemistry. 89 (14), 7382-7387 (2017).</li>
<li>Gao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Self-Assembly+of+Homogenous+Microcyclic+Structures+Controlled+by+a+Silver-Coated+Nanopore%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Dynamic Self-Assembly of Homogenous Microcyclic Structures Controlled by a Silver-Coated Nanopore.</a> Small. 13 (25), 1700234-n/a (2017).</li>
<li>Kim, B. K., Kim, J., Bard, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrochemistry+of+a+single+attoliter+emulsion+droplet+in+collisions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Electrochemistry of a single attoliter emulsion droplet in collisions.</a> Journal of the American Chemical Society. 137 (6), 2343-2349 (2015).</li>
<li>Lee, P. C., Meisel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adsorption+and+surface-enhanced+Raman+of+dyes+on+silver+and+gold+sols%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Adsorption and surface-enhanced Raman of dyes on silver and gold sols.</a> Journal of Physical Chemistry. 86 (17), 3391-3395 (1982).</li>
<li>Steinbock, L. J., Otto, O., Chimerel, C., Gornall, J., Keyser, U. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detecting+DNA+folding+with+nanocapillaries%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Detecting DNA folding with nanocapillaries.</a> Nano Letters. 10 (7), 2493-2497 (2010).</li>
<li>Gong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+in-flow+detection+of+single+DNA+molecules+using+glass+nanopipettes%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Label-free in-flow detection of single DNA molecules using glass nanopipettes.</a> Analytical Chemistry. 86 (1), 835-841 (2013).</li>
<li>Cadinu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Double+Barrel+Nanopores+as+a+New+Tool+for+Controlling+Single-Molecule+Transport%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Double Barrel Nanopores as a New Tool for Controlling Single-Molecule Transport.</a> Nano Letters. 18 (4), 2738-2745 (2018).</li>
<li>Bell, N. A., Keyser, U. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digitally+encoded+DNA+nanostructures+for+multiplexed%2C+single-molecule+protein+sensing+with+nanopores%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">Digitally encoded DNA nanostructures for multiplexed, single-molecule protein sensing with nanopores.</a> Nature Nanotechnology. 11 (7), 645-651 (2016).</li>
</ol>

Os autores declaram não há conflitos de interesses.

Fabricação de um nanopipette bem definido é o primeiro passo no processo de fabricação WNE tipo fechado. Centrando-se um laser de CO2 para o centro do capilar, um capilar separa em dois nanopipettes simétricos com pontas cônicas nanoescala. O diâmetro é facilmente controlado, variando de 30-200 nm, ajustando os parâmetros do extrator a laser. É de notar que os parâmetros para puxar podem variar para extratores de pipeta diferente. A temperatura ambiental e umidade também podem influenciar o diâmetro final do n...

Nanopartículas têm atraído grande atenção devido a diversas características tais como a sua capacidade catalítica, características ópticas, electroactivity e elevados rácios de superfície e o volume1,2,3, 4. Análise Eletroquímica de nanopartículas única é um método direto para compreender os processos químicos e eletroquímicos intrínsecos a nível de escala nanométrica. Para obter medições altamente sensíveis de nanopartículas única, duas abordagens eletroquímicas foram aplicadas anteriormente para ler informações de nanopartículas de atual respostas5,6,7. Dentre essas abordagens envolve imobilizando ou capturar uma nanopartícula individual na interface do nanoelectrode para o estudo de electrocatalysis8,9. A outra estratégia é impulsionada por nanopartículas única colisão com a superfície de um eletrodo, que gera uma flutuação transitória atual do processo dinâmico de redox.
Ambos os métodos requerem uma interface sensor ultra-sensível nanoescala que coincide com o diâmetro de nanopartículas único. No entanto, fabricação tradicional de nanoelectrodes principalmente incorporou os sistemas microeletromecânicos (MEMS) ou laser puxando técnicas, que são entediantes e undisciplinable10,11,12, 13. Por exemplo, fabricação de MEMS-baseado de nanoelectrodes é cara e exige o uso de uma sala limpa, restringindo a produção em massa e popularização do nanoelectrodes. Por outro lado, laser puxando a fabricação de nanoelectrodes baseia-se fortemente na experiência dos operadores durante a selagem e puxar um fio de metal dentro do capilar. Se não bem fechado no capilar, o fio de metal a lacuna entre a parede interna do nanopipette e o fio pode introduzir ruído de fundo em excesso atual dramaticamente e ampliar o eletroativos Detetando a área. Estas desvantagens principalmente diminuem a sensibilidade do nanoelectrode. Por outro lado, a existência de uma lacuna pode aumentar a área do eletrodo e reduzir a sensibilidade do nanoelectrode. Como consequência, é difícil garantir um desempenho reprodutível devido as morfologias incontrolável eléctrodo em cada processo de fabricação14,15. Portanto, um método de fabricação geral de nanoelectrodes com excelente reprodutibilidade é urgentemente necessária para facilitar a exploração eletroquímica das características intrínsecas de nanopartículas única.
Recentemente, a técnica de nanopore foi desenvolvida como uma abordagem elegante e livre de rótulo para única molécula análise16,17,18,19,20. Devido à sua fabricação controlável, o nanopipette fornece um confinamento de escala nanométrica, com um diâmetro uniforme, variando de 30-200 nm por um laser capilar extrator21,22,23,24 . Além disso, este procedimento de fabricação simples e reprodutível garante a generalização da nanopipette. Recentemente, propusemos um eletrodo de nanopore sem fio (WNE), que não exige a selagem de um fio de metal dentro do nanopipette. Através de um processo de fabricação facile e reprodutível, o WNE possui um depósito de metal de nanoescala dentro do nanopipette para formar um eletroativos interface25,26,27,28 . Desde que o WNE possui uma estrutura bem definida e morfologia uniforme de seu confinamento, alcança alta resolução atual, bem como a constante de tempo de baixa resistência-capacitância (RC) para a realização de alta resolução temporal. Nós relatamos anteriormente dois tipos de WNEs, tipo aberto e fechado-tipo, para a realização de análise de entidade única. O tipo aberto WNE emprega uma camada nanometal depositada na parede interna de uma nanopipette, que converte a corrente farádica de uma única entidade para o iônico de resposta atual26. Geralmente, o diâmetro de um tipo aberto WNE é cerca de 100 nm. Para diminuir ainda mais o diâmetro do WNE, apresentamos o WNE de tipo fechado, em que um nanotip de metal sólido ocupa totalmente a ponta de nanopipette através de uma abordagem química-eletroquímica. Esse método pode rapidamente gerar um 30 nm ouro nanotip dentro de um confinamento de nanopore. A interface bem definida na área da ponta de um tipo fechado WNE garante uma relação sinal-ruído elevada para medições eletroquímicas de nanopartículas única. Como uma nanopartículas de ouro carregada colide com o WNE de tipo fechado, um processo de carga-descarga ultra rápido na interface ponta induz uma resposta de feedback capacitivo (CFR) no rastreamento atual iônica. Comparado a um anterior nanopartículas única colisão estudo através de um nanoelectrode com metal fio dentro de29, o tipo fechado WNE mostrou uma maior resolução atual do pA de ± 0,1 0,6 pA (RMS) e a maior resolução temporal de 0,01 ms.
Aqui, descrevemos um procedimento de fabricação detalhada para um tipo fechado WNE que controlou altamente dimensões e excelente reprodutibilidade. No presente protocolo, uma reação simples entre AuCl4– e BH4– é projetado para gerar um nanotip de ouro que bloqueia completamente o orifício de um nanopipette. Então, bipolar eletroquímica é adotada para o crescimento contínuo de uma nanotip de ouro que atinge o comprimento de vários micrômetros dentro do nanopipette. Este procedimento simples permite a implementação desta fabricação de nanoelectrode, que pode ser realizada em qualquer laboratório de química geral sem um equipamento caro e sala limpa. Para determinar o tamanho, morfologia e estrutura interna de um tipo fechado WNE, este protocolo fornece um procedimento de caracterização detalhada com o uso de um microscópio eletrônico de varredura (MEV) e espectroscopia de fluorescência. Um exemplo recente é destacado, que mede diretamente as interações intrínsecas e dinâmicas de nanopartículas de ouro (AuNPs) colidindo em direção a nanointerface de um tipo fechado WNE. Acreditamos que o tipo fechado WNE pode abrir um novo caminho para futuros estudos eletroquímicos de células vivas, nanomateriais e sensores de nível único-entidade.

<table><tbody><tr><td>Acetona</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>650501</td><td>Altamente inflamável e volátil</td></tr><tr><td>Balança analítica</td><td>Mettler Toledo</td><td>ME104E</td><td></td></tr><tr><td>Amplificador Axopatch 200B</td><td>Molecular Devices</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Blu-Tack adesivo reutilizável</td><td>Tubo</td> de centrífuga Bostik <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Corning Inc.</td><td></td><td>Tubos de centrífuga com tampa CentriStar, 15 ml</td></tr> de <tr><td>ácido cloroáurico</td><td>Energia Química</td><td>E0601760010</td><td>HAuCl4</td></tr><tr><td>Clampfit 10.4 software</td><td>Molecular Devices</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Digidata 1550A digitalizador</td><td>Molecular Devices</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DS Fi1c câmera CCD de cor verdadeira</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ecoflex 5 Silicone de cura de adição borracha</td><td>Smooth-On</td><td>17050377</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Reference 2 pipetas</td><td>Eppendorf</td><td>492000904</td><td>10, 100 e 1000 &micro; L</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>24102</td><td>Gaiola</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>de Faraday</td></tr> altamente inflamável e volátil Cobre <tr><td>iXon 888 EMCCD</td><td>Andor</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga</td><td>Axygen Scientific</td><td></td><td>0,6, 1,5 e 2,0 mL</td></tr><tr><td>Microloader</td><td>Eppendorf</td><td>5242 956.003</td><td>20 &micro; L</td></tr><tr><td>Vidro de Cobertura de Microscópio</td><td>Fisher Scientific</td><td>LOT 16938</td><td>20 mm*60 mm-1 mm de espessura</td></tr><tr><td>Purificador de água Milli-Q Evaporador</td> de <td>Feixe de Elétrons</td><td>Millipore</td><td>SIMS00000</td> Denton</tr><tr><td>P-2000 extrator de laser</td><td>Sutter Instrument</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pontas de pipeta</td><td>Axygen Scientific</td><td></td><td>10, 200 e 1.000 &micro; L</td></tr><tr><td>Cloreto de potássio,+D25+A2:F2+A2:F25</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P9333-500G</td><td>KCl</td></tr><tr><td>Pipetas de quartzo</td><td>Sutter</td><td>QF100-50-7.5</td><td>O.D.:1.0 mm, I.D.:0.5 mm, 75 mm de comprimento</td></tr><tr><td>Refrigerador</td><td>Siemens</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diluente de silicone</td><td>Smooth-On</td><td>1506330</td><td></td></tr><tr><td>Fio de prata</td><td>Alfa Aesar</td><td>11466</td><td></td></tr><tr><td>Sódio borohidreto,</td> <td>Tianlian Chem. Tech.</td><td>71320</td><td>NaBH4</td></tr><tr><td>Ti-U microscópio de campo escuro invertido</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

um eletrodo de nanopore sem fio fechado-tipo de análise de nanopartículas única

A Closed-Type Wireless Nanopore Electrode for Analyzing Single Nanoparticles

Medir as características intrínsecas de nanopartículas única por nanoelectrochemistry detém importância fundamental profunda e tem impactos potenciais em Nanociência. No entanto, analisar eletroquimicamente nanopartículas única é um desafio, como o sensoriamento nanointerface é incontrolável. Para responder a este desafio, descrevemos aqui a fabricação e caracterização de um eléctrodo de tipo fechado sem fio nanopore (WNE) que apresenta uma morfologia altamente controlável e excelente reprodutibilidade. Facile fabricação de WNE permite a preparação de nanoelectrodes bem definidas em um laboratório de química geral sem o uso de um equipamento caro e sala limpa. Uma aplicação de 30 nm WNE tipo fechado na análise de nanopartículas de ouro única na mistura também é destacada, que mostra uma alta resolução atual do pA 0,6 e alta resolução temporal de 0.01 MS. acompanhado por sua excelente morfologia e pequenas diâmetros, mais potenciais aplicações de WNEs fechado-tipo podem ser expandidos de caracterização de nanopartículas para detecção de única molécula/íon e sondagem de célula única.

Vamos demonstrar uma abordagem superficial para fabricar um bem definido 30 nm nanopore sem fio eléctrodo com base em um nanopipette cônico de quartzo. A fabricação de um nanopipette é demonstrada na Figura 1, que inclui três etapas principais. Uma conta com um diâmetro interno de 0,5 mm e diâmetro externo de 1,0 mm é fixada no puxador e, em seguida, um laser é focado no centro do capilar para derreter o quartzo. Aplicando forças aos terminais do capilar, ele...

Aqui, apresentamos um protocolo para a fabricação de um eléctrodo de tipo fechado sem fio nanopore e subsequente medida eletroquímica de nanopartículas único colisões.

Um eletrodo de Nanopore sem fio fechado-tipo de análise de nanopartículas única

Measuring the intrinsic features of single nanoparticles by nanoelectrochemistry holds deep fundamental importance and has potential impacts in ...

Medir eletroquimicamente a característica intrínseca da nanopartícula única é de grande importância na nanociência. Este método demonstra uma maneira simples, mas altamente reprodutível de construir um eletrodo de nanoporos sem fio para análise rápida de nanopartículas únicas. O tamanho da nanoeletrídico pode chegar a até 30 nanômetros por este método de fabricação simples.A resolução atual e a resolução temporal durante a análise são 0,6 picoamps e 0,01 milissegundos, respectivamente. Prevê-se que este eletrodo de nanoporo sem fio será utilizado para análise secular in vivo e não invasiva devido ao tamanho nanoescala da ponta nanoeletro. A propriedade de ressonância plasmônica da superfície localizada da ponta nano de ouro e a visão óptica perfeita dos nanopipettos cruzados poderiam permitir a detecção óptica elétrica em nanoesponíveis.Pesquisadores interessados na fabricação de eletrodo de nanoporo sem fio devem dominar o processo de derramamento de nanopipette. Porque este é um passo crucial no procedimento. Eles devem prestar atenção à temperatura ambiental e à umidade ao derramar a pipeta.Primeiro adicione 4,8 mililitros de ácido cloroaurico com uma fração de massa de 1%a 40 mililitros de água deionizada com agitação vigorosa. Em seguida, aqueça a solução para ferver. Adicione rapidamente 10 mililitros de uma solução de citrato de trisódio com uma fração de massa de 1% na solução.Aqueça a solução por mais 15 minutos até que a solução final esteja de cor vermelha. Coloque os capilares de quartzo em um tubo de centrífuga de 15 mililitros cheio de acetona e limpo em um limpador ultrassônico por dez minutos. Quando terminar, retire a acetona e adicione etanol.Em seguida, coloque o tubo de centrífuga no limpador ultrassônico por mais dez minutos de limpeza. Em seguida, coloque os capilares de quartzo em outro tubo de centrífugas de 15 mililitros com água desionizada para remoção do etanol, e realize a limpeza ultrassônica por 10 minutos. Seque os capilares de quartzo usando um fluxo de gás nitrogênio e armazene-os em um tubo de centrífuga limpo.Depois disso, ligue um puxador laser de dióxido de carbono e pré-aqueça por 15-20 minutos para garantir uma potência laser constante. Instale um capilar de quartzo limpo no puxador de laser de dióxido de carbono pré-aquecido. Defina os parâmetros de puxar de calor, filamento, velocidade, atraso e força de puxar no painel do puxador de laser de dióxido de carbono para um diâmetro específico.Fixar a nanopipette preparada em uma placa de petri com um adesivo reutilizável para caracterização posterior. Injete 10 microliters da solução de ácido cloroaurico preparada na nanopipette com um microcarregador. Centrifugar a nanopipette por cinco minutos em torno de 1.878 vezes G para a remoção de bolhas de ar na nanopipette.Após a centrifugação, fixar a nanopipette em um deslizamento de tampa com borracha de silicone previamente preparada, e definir a área dentro da nanopipette como o lado cis e fora como o lado trans. Depois de esperar cinco minutos para a borracha curar, coloque o conjunto integrado na mesa objetiva de um microscópio invertido. Ligue e ajuste a iluminação do campo escuro para focar a ponta de nanopipette sob um objetivo de microscópio de 10x.Mude para um objetivo de 40x para maior resolução espacial. Em seguida, coloque um eletrodo de cloreto de prata dentro da nanopipette. Em seguida, coloque um segundo eletrodo de cloreto de prata aterrado no lado trans.Conecte os eletrodos de cloreto de prata a um pré-amplificador. Ligue o sistema de medição atual e o software correspondente para gravação de corrente iônica. Em seguida, defina o potencial aplicado para 300 milvolts.Agora adicione lentamente 150 microliters de solução de boroidrídaride de sódio ao lado trans para desencadear a reação entre o ácido cloroauúrico e o boroidido de sódio. Simultaneamente, registosetrica e opticamente o traço atual e os espectros de dispersão de imagens de campo escuro usando os sistemas de medição de medição e detecção de campo escuro. Desligue o potencial aplicado após o rastreamento da corrente iônica retornar a zero picoamps.Lave o tipo WNE fechado preparado com água deionizada fluindo do fundo para a ponta. Altere a solução nos lados trans e cis para uma solução de cloreto de potássio após a fabricação do tipo fechado WNE. Transfira 50 microliters da solução nanopartical de ouro nanomolar de 30 nanomolar para o lado trans.Em seguida, regise o sinal atual de eventos de colisão de nanopartículas únicas com um potencial de 300 milvolts. Por fim, altere a tensão aplicada para monitorar a frequência, amplitude e mudança de forma do sinal de corrente. A fabricação de uma nanopipette inclui três passos principais.Um microcapilário com um diâmetro interno de 0,5 milímetros e diâmetro externo de 1 mililitro é fixado no puxador, e um laser é então focado no centro do capilar para derreter o quartzo. Ao aplicar forças nos terminais do capilar, ele finalmente separa e forma duas partes com pontas cônicas nanoescala. O procedimento de gerar uma nanofina de ouro dentro da ponta de nanopipette, após o processo de puxar é mostrado aqui.Um sistema de caracterização in situ foi usado para monitorar o processo de fabricação do tipo fechado WNE por gravação simultânea das imagens de resposta atual e campo escuro. Vista superior As imagens SEM da nanopipette nua e do tipo fechado WNE são mostradas aqui após íons de foco dividirem uma imagem sem visão lateral fornece a morfologia da nanofina de ouro dentro do tipo fechado WNE. Nos experimentos de colisão de nanopartículas únicas, as nanopartículas de ouro são adicionadas ao lado trans do WNE.O excelente desempenho de ruído deste CNE revela os sinais ocultos com uma alta frequência de sinal. Ao gerar a ponta nano de ouro, um baixo potencial aplicado deve ser usado para gerar a interface eletroquímica. Um alto potencial aplicado poderia acelerar a geração de ouro e resultar em estruturas defeituosas na ponta nano.A alta resolução de contraste e a alta resolução especial deste método podem ajudar os pesquisadores a entender melhor o processo de transferência de elétrons na escala nano. O boroidido de sódio é perigoso e reagirá violentamente com água. Por favor, tenha cuidado ao preparar a solução de boroidido de sódio.

a-closed-type-wireless-nanopore-electrode-for-analyzing-single

Research

JoVE Journal

Chemistry

Química

Um método de usar solid-state nanoporos para monitorar a adsorção não-específica de proteínas em uma superfície inorgânica é descrita. O método emprega o princípio de pulso-resistivo, permitindo a adsorção a ser sondado em tempo real e ao nível de moléculas individuais. Porque o processo de adsorção de proteínas é única longe do equilíbrio, propomos o emprego de matrizes paralelas de nanoporos sintéticos, permitindo que para a determinação quantitativa da taxa de reação aparente de primeira...

Monitoramento adsorção de proteínas com Solid-state Nanoporos

Descrevemos a fabricação do dispositivo e protocolo de medição para nanotubos baseados em biossensores de alta freqüência de carbono. A técnica de detecção de alta frequência atenua a iônica (Debye) efeito fundamental de triagem e permite nanotubo de biosensor para ser operado em soluções de força iônica alta onde biossensores eletrônicos convencionais falham. Nossa tecnologia oferece uma plataforma única para o ponto de atendimento (POC) biossensores eletrônicos que operam em condições...

Fabricação de Nanotubos de Carbono de Alta Frequência Nanoelectronic Biosensor de Sensoriamento em High Solutions força iônica

A metodologia para a elaboração nanoporos de estado sólido em solução para experimentos de translocação biomoleculares é apresentado. Através da aplicação de pulsos curtos de altos campos elétricos, o diâmetro nanopore pode ser controlada com precisão subnanometer ampliado e suas características de ruído elétrico melhorado significativamente. Este procedimento é realizado in situ, utilizando equipamento de laboratório, em condições experimentais.

Ajustar o tamanho e minimizando o ruído de Solid-state Nanoporos

Vesículas extracelulares desempenham papéis importantes em processos fisiológicos e patológicos, incluindo a coagulação, as respostas imunes e cancro ou como agentes terapêuticos potenciais na entrega da droga ou medicina regenerativa. Este protocolo apresenta métodos para a quantificação e caracterização tamanho de vesículas extracelulares isolados e não-isolados em vários fluidos usando ajustável sensor de pulso resistiva.

Quantificação e Tamanho-profiling de vesículas extracelulares Usando Sintonizável resistiva Pulso Sensing

O protocolo apresentado descreve a análise do transporte mediado por proteínas de membrana no nível do transportador único usando bicamadas lipídicas livres de solvente que abrangem os poros. Isso é alcançado pela criação de chips de matriz de nanoporos produzidos em massa, combinados com aquisição e análise de dados altamente paralelas, permitindo o estabelecimento futuro de telas efetoras de proteínas de membrana.

Membrane Transport processos analisados ​​por um Sistema Nanopore Chip altamente paralelos na resolução Protein Individual

Aqui usamos um nanoporo sintonizável poliuretano integrados em uma técnica de detecção de impulsos resistiva para caracterizar nanopartículas química da superfície por meio da medição das velocidades das partículas de translocação, que pode ser usado para determinar o potencial Zeta de nanopartículas individuais.

Determinação do Potencial Zeta de nanopartículas de translocação através de velocidades por meio de um Tunable Nanopore: Utilizando partículas modificadas-ADN como um Exemplo

Nanopore tecnologia de sequenciamento biomoléculas tem amplas aplicações nas ciências da vida, incluindo a identificação de patógenos, monitorização da segurança dos alimentos, análise genômica, monitoramento ambiental metagenomic e caracterização de bactérias resistência aos antibióticos. Neste artigo, o processo de sequenciamento de DNA de solo metagenomic para identificação de espécies, usando a tecnologia de sequenciamento de nanopore é demonstrado.

Sequenciamento de DNA Nanopore para análise de solo Metagenomic

Aqui, apresentamos um protocolo para detectar clusters de oxigênio de metal discretos, polioxometalatos (POMs), no limite de molécula única usando uma plataforma eletrônica baseada em nanoporos biológica. O método fornece uma aproximação complementar às ferramentas analíticas tradicionais da química usadas no estudo destas moléculas.

Caracterização física de alta resolução de nanopartículas metálicas únicas

O sequenciamento de nanopore é uma nova tecnologia que permite o sequenciamento econômico em locais remotos e configurações pobres em recursos. Aqui, nós apresentamos um protocolo para arranjar em seqüência dos mRNAs do sangue inteiro que é compatível com tais circunstâncias.

Sequenciamento de mRNA de sangue total usando sequenciamento de nanoporos

O protocolo descreve como monitorar eventos eletroquímicos em nanopartículas individuais usando espectroscopia de espalhamento Raman e imagens aprimoradas por superfície.

Rastreando Eletroquímica em Nanopartículas Únicas com Espectroscopia e Microscopia de Espalhamento Raman Intensificado por Superfície

As pinças plasmônicas usam ressonância plasmônica de superfície localizada em nanoestruturas de ouro para capturar nanopartículas únicas, incluindo proteínas, dentro de um campo óptico em escala nanométrica. Mudanças no sinal espalhado revelam a presença de proteínas e dinâmica conformacional, permitindo o monitoramento sem modificações de fluoróforos ou amarração de superfície.

Monitoramento da dinâmica conformacional de proteínas únicas não modificadas usando pinças plasmônicas

Aprenda a fabricar um eletrodo de nanopore sem fio fechado para análise eletroquímica de nanopartículas únicas. Este método oferece alta resolução temporal e corrente para estudos em nanociência.

Um eletrodo de Nanopore sem fio fechado-tipo de análise de nanopartículas única

Explorar mais vídeos