Name: Protocolo de baixo custo de análise da pegada e caixa de teste de suspensão para ratos aplicada o retenção crônica de estresse (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: Aprenda análise da marcha de baixo custo para avaliar distúrbios motores em camundongos após estresse por contenção. Este método detecta fenótipos motores sem equipamentos caros.

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Este trabalho foi financiado pelo KAKENHI JSPS (sociedade de Japão para a promoção da ciência) (subsídio para C de investigação científica), conceder número 18K 07373 (HS) e subsídios para as universidades privadas.

Todos os experimentos com animais foram conduzidos de uma forma humana. O institucional Animal experimento Comité de Jichi universidade médica aprovado o estudo. O estudo foi realizado em conformidade com o Regulamento institucional para experimento Animal e diretriz Fundamental para a boa conduta do Animal experimento e actividades conexas em instituições acadêmicas de pesquisa sob a jurisdição do MEXT do Japão. Os ratos utilizados neste protocolo tem sido descrito anteriormente21.
1. caixa de teste de suspensão
<ol><li>Registro do peso de cada rato. Marcar a cauda por caneta de marcação para a discriminação individual (por exemplo., uma linha dupla linhas e linhas triplas). Nota: Curvas de crescimento são utilizadas para um índice de saúde geral22.</li>
	<li>Coloque os ratos no quarto experimental pelo menos 30 min antes do teste comportamental. Defina a caixa de suspensão, que consiste de uma caixa clara (25 x 25 x 40 cm3) com uma tampa de rotatable malha na parte superior (Figura 1). A tampa de malha pode ser girada ao longo de uma barra central para que o topo é invertido 180 graus.</li>
	<li>Põe um rato no centro da tampa do engranzamento. Cuidadosamente Abaixe a tampa de malha lateral.</li>
	<li>Medi a latência de queda (tempo de suspensão) do mouse da tampa malha. Nota: Se o mouse não se enquadra dentro de 5 min, grave a latência como 5 min.</li>
	<li>Retorne o rato da gaiola em casa. Limpe a caixa de suspensão com etanol a 70% após cada teste.</li>
</ol>2. pegada análise
Nota: Após a enforcamento de caixa de teste, realizar a análise de pegada.
<ol><li>
Configurar o Runway (Figura 2A).<ol>
<li>Corte um pedaço de papel branco (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm) longitudinalmente em três comprimentos de igual largura. Defina um pedaço de papel branco (9,9 cm x 42 cm) em cima da mesa.</li>
		<li>Ponha a caixa gol escuro na extremidade distal do papel. Coloque outra caixas (aproximadamente o mesmo comprimento que o papel) com as paredes de ambos os lados da pista, impedindo a fuga dos ratos.</li>
		<li>Colocar tinta preta e tinta vermelha em separado de Petri (35 mm de diâmetro).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sessão de treinamento. Nota: Realize a sessão de treinamento apenas em 4 semanas de idade.<ol>
<li>Colocar um rato na extremidade proximal do papel (Face a cabeça em direção a caixa do gol). Acompanho o mouse da extremidade proximal à caixa de objetivo. Remova o mouse da caixa objetivo. Se o mouse parar sobre o papel, empurre suavemente o mouse para a caixa do gol pelo dedo.</li>
		<li>Segure o mouse segurando a nuca entre o polegar e o indicador para limitar o movimento das patas dianteiras. Então, segure as costas e a cauda entre a esfera do polegar e os outros dedos para limitar o movimento dos membros posteriores. Nota: Exploração insuficiente de um rato resulta em borrões de tinta na roupa.</li>
		<li>Mergulhe as partes inferiores das patas dianteiras em tinta vermelha e as partes inferiores dos membros traseiros em tinta preta. Imediatamente, coloque o mouse na extremidade proximal do papel (Face a cabeça em direção a caixa do gol). Acompanho o mouse da extremidade proximal à caixa de objetivo. Se o mouse parar sobre o papel, empurre suavemente o mouse para a caixa do gol pelo dedo.</li>
		<li>Remova o mouse da caixa objetivo. Vá para a sessão de teste.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sessão de teste.
	<ol>
<li>Após a sessão de treinamento, configurar a pista para pegadas com um novo pedaço de papel branco.</li>
		<li>Segure o mouse segurando a nuca entre o polegar e o indicador para limitar o movimento das patas dianteiras. Então, segure as costas e a cauda entre a esfera do polegar e os outros dedos para limitar o movimento dos membros posteriores.</li>
		<li>Mergulhe as partes inferiores das patas dianteiras em tinta vermelha e as partes inferiores dos membros traseiros em tinta preta. Imediatamente, coloque o mouse na extremidade proximal do papel. Acompanho o mouse da extremidade proximal à caixa de objetivo. Nota: Porque os ratos preferem o escuro, andar se torna mais estável conforme o mouse se aproxima da caixa escura objetivo. Se o mouse parar sobre o papel, empurre suavemente o mouse para a caixa do gol pelo dedo. Então, se pegadas de confiança não são obtidas por análise (ver passo 2.4. Análise de pegadas para detalhes) porque o mouse parou, repetir a sessão de teste.</li>
		<li>Retorne o rato da gaiola em casa da caixa de objetivo. Limpe a caixa do gol com etanol a 70% após cada sessão de teste. Secar o papel impresso de pé.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Análise de pegadas
	<ol>
<li>Obter três medidas de cada parâmetro (stride comprimentos dos membros dianteiros e larguras de base membros traseiros, dianteiros e traseiros, sobreposição entre o membro anterior e membro posterior, Figura 2B) com uma régua de papel impresso de pé. Nota: Porque pegadas de extremidades proximais e distais frequentemente mostram grandes variações devido à parada ou correr, escolher a parte com um padrão de marcha constante de pegadas. O parte do meio do pé-impresso papel geralmente será adequado para a análise.<ol>
<li>Para o comprimento do passo, medir as distâncias entre as mesmas partes da pata (pata almofada de dedo do pé).</li>
			<li>Para a largura da base frontal, traçar uma linha entre consecutivas pegadas frontais direita (ou esquerdas). Em seguida, meça o comprimento da linha vertical da almofada da pegada frontal esquerda (ou direita) para a linha desenhada entre as pegadas de direita (ou esquerdas).</li>
			<li>Para a patas traseira largura base, traçar uma linha entre consecutivas pegadas traseiras direita (ou esquerdas). Em seguida, meça o comprimento da linha vertical da almofada da pegada traseira esquerda (ou direita) para a linha desenhada entre as pegadas de direita (ou esquerdas).</li>
			<li>Para sobreposição, medir a distância entre as almofadas de esquerda (ou direita) dianteira e traseiras pegadas.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Média de três medições para cada indivíduo. Use a média individual de cada parâmetro para a análise estatística.<ol>
<li>Para o comprimento do passo, use a média das médias individuais dos avanços da esquerda e direita.</li>
			<li>Para a assimetria do comprimento do passo, use o valor absoluto da diferença entre as médias individuais do membro esquerdo e comprimento do passo de membro direito.</li>
			<li>Para a análise estatística dos outros parâmetros (largura de base da frente, traseira largura base e sobreposição), use a média individual diretamente.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. retenção tensão de carregamento
<ol><li>
Preparação dos tubos de contenção.
	<ol>
<li>Faz 16 buracos (cerca de 2 mm de diâmetro) em um tubo cônico de 50 ml (30 mm de diâmetro x 115 mm de comprimento) ao longo das marcas de escala (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 mL) e a parte traseira de cada escala marcar por broca quadrada (Figura 3). Faça um buraco na ponta do tubo cónico de 50 mL (aproximadamente 5 mm de diâmetro) para respirar, cortando a ponta. Faça um buraco (aproximadamente 4 mm de diâmetro) na tampa do tubo para passar a cauda de ratos.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Carga de estresse
	<ol>
<li>Coloque os ratos na sala experimental.</li>
		<li>Mantenha um mouse segurando a nuca entre o polegar e o indicador. Digite o mouse dentro do tubo de contenção da cabeça. Passe a cauda através do orifício na tampa. Feche a tampa. Nota: Limitar o movimento do membro anterior, porque ratos rejeitaram inserindo o tubo pelas patas dianteiras.</li>
		<li>Manter o mouse delimitado por 2 h em uma mesa à temperatura ambiente. Remova o tubo de retenção para o mouse e voltar para a gaiola em casa. Nota: Os tubos de retenção podem ser reutilizados após uma lavagem e seca.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. experimental horário (Figura 4):
<ol><li>Executar a suspensão da caixa teste e a análise de pegada no mesmo dia em 4 semanas de idade (Veja o passo 1. Teste de caixa de suspensão e o passo 2. Análise de pegada para detalhes) como uma medida de referência em todos os ratos antes do agrupamento em «grupo de stress» e um «grupo de anti-stress». Nota: Aproximadamente 8-10 ratos em ninhadas de 2-3 podem ser adequados para uso em um experimento. Análise de pegada em 4 semanas de idade consiste em sessões de treinamento e teste.</li>
	<li>Aleatoriamente, divida os ratos em um grupo de' stress' e um 'grupo de anti-stress'. Nota: Quando os ratos são utilizados consistindo de várias ninhadas, divida littermates uniformemente em ambos os grupos. Número em cada grupo é composto de aproximadamente 4-5 ratos.</li>
	<li>Aplicar o esforço de contenção ao grupo' stress', 6 vezes ao longo de duas semanas (consulte a etapa 3. Retenção tensão carregando para detalhes). Nota: 6 vezes de retenção são aplicadas a cada duas semanas, seguido por um enforcamento caixa análise de teste e pegada de 6-12 semanas de idade. Não aplique o esforço de contenção no dia do enforcamento teste caixa teste e a análise de pegada.</li>
	<li>Executar a suspensão da caixa teste e a sessão de testes de análise de pegada no mesmo dia em 6, 8, 10 e 12 semanas de idade.</li>
</ol>

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<li>Chu, X., Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((24-hour-restraint+stress+induces+long-term+depressive-likephenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">24-hour-restraint stress induces long-term depressive-likephenotypes in mice.</a> Scientific Reports. 6, 32935(2016).</li>
<li>Freeman, M. L., Sheridan, B. S., Bonneau, R. H., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychological+Stress+Compromises+CD8%2B+T+cell+control+of+latent+herpes+simplex+virus+type+1+infections%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Psychological Stress Compromises CD8+ T cell control of latent herpes simplex virus type 1 infections.</a> The Journal of Immunology. 179 (1), 322-328 (2007).</li>
<li>Lauretti, E., Di Meco, A., Merali, S., Praticò, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+behavioral+stress+exaggerates+motor+deficit+and+neuroinflammation+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Chronic behavioral stress exaggerates motor deficit and neuroinflammation in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Translational Psychiatry. 6, e733(2016).</li>
<li>Quartermain, D., Stone, E. A., Charbonneau, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+stress+disrupts+risk+assessment+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Acute stress disrupts risk assessment behavior in mice.</a> Physiology and Behavior. 59 (4-5), 937-940 (1996).</li>
<li>Bannon, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBannon%2C+D+%22The+Behavioural+effects+of+stress+and+aluminum+toxicity+on+a+mouse+model+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+Parkinsonism-dementia+complex%22">The Behavioural effects of stress and aluminum toxicity on a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis Parkinsonism-dementia complex</a>. , 1-186 (2015).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

A análise de pegada e a caixa de suspensão de teste são simples e pouco dispendiosos testes comportamentais para a função motora dos ratos. Os fenótipos neurocomportamentais em vários modelos de mouse foram detectados com êxito por esses testes. Por exemplo, encurtou o comprimento do passo em esclerose lateral amiotrófica24, aumento do comprimento do passo assimétrico em ataxia-telangiectasia25, aumento do comprimento de sobreposição na doença de Huntington distonia de<sup ...

Distúrbios do movimento são definidos como distúrbios do sistema nervoso, mostrando um excesso ou escassez de movimentos voluntários ou automática1. Em particular, distúrbio da marcha é frequentemente documentado entre os pacientes com distúrbios de movimento2,3,4. Portanto, a análise da marcha é um teste comportamental adequado para a validação de modelos animais de distúrbios do movimento. Em camundongos, análises automatizadas da marcha foram realizadas para andar em velocidade natural5 e em velocidades ajustáveis por esteira6,7. Essas análises fornecem resultados quantitativos de marcha automaticamente. Um método alternativo para detectar o distúrbio da marcha é chamado análise da pegada. Depois rotulando as solas dos pés com tinta, ratos andar no papel, e as pegadas são analisadas. Inicialmente, vaselina e carvão em pó foram utilizados para visualizar a pegada8e então foram substituídos por tinta sobre papel de polígrafo9 e colaborador fotográfico em papel fotográfico10. Um método mais barato e menos tóxico, usando a tinta e o papel do que os outros métodos permanece até à data de11. Análise de pegada é menos caro em comparação com a análise automatizada de5,6,7 e seria útil para avaliar os distúrbios do movimento em modelos do rato para os pesquisadores sem fundos de pesquisa abundante .
O enforcamento teste de caixa é uma espécie de quatro testes de suspensão de membro usando fio gaiola tampa12 e malha de arame de tela13. A caixa é um aparelho com malha rotatable tampa no topo da caixa ao longo de um bar do centro. Além de análise de marcha, o teste pode ser barata e facilmente executado. Portanto, foi realizado o enforcamento teste de caixa para avaliar a força de preensão e equilíbrio, além para a análise de pegada no presente protocolo.
Estresse induz os sintomas de distúrbios de movimento14,15. Déficit motor muitas vezes é induzida por vários estresses crônicas mesmo quando nenhum fenótipo motor espontâneo é observado nos modelos do rato de um movimento transtorno16,17,18. Moderação é um dos métodos comumente usados para o stress, porque o animal não é fisicamente prejudicado19 e custo é menos em comparação com outros métodos, como choque elétrico com aparelhos dedicados a carregar em camundongos e forçado a correr com o uso de uma escada rolante. Contenção por um tubo, que é interpretada por confinar um rato em um tubo cônico de 50ml furada, é mais fácil do que outros métodos, como fio de malha coador, membro gravado e envoltura de animal com gaze (revista20). Neste artigo, resumimos os protocolos do espaço de análise e a caixa de suspensão teste após a contenção por um tubo. Este protocolo nos ajudaria a usar modelos de rato de distúrbios do movimento sem fenótipo motor espontâneo.

<table><tbody><tr><td>Caixa suspensa</td><td>O' hara e Co.</td><td>http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/</td><td></td></tr> <tr><td>Caneta marcadora</td><td>ZEBRA</td><td>MO-120-MC-BK</td><td></td></tr><tr><td>Caixa de gol</td><td>O' hara e Co.</td><td>http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/</td> <td>Acessório para aparelhos de teste de feixe balanceado</td></tr><tr><td>Caixas</td><td>O' hara e Co.</td><td>-</td><td>Parede lateral da pista</td></tr><tr><td>Tinta preta</td><td>Shin-asahi-Tinta</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>vermelha</td><td>Maruyamakogyo</td><td>BC-6</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Petri descartável</td><td>Corning</td><td>351008</td><td>placas de Petri (35 mm de diâmetro)</td></tr><tr><td>Askul Multipaper Super Branco J Monocromático A3</td><td>Askul</td><td>701-712</td><td>Papel branco (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm)</td></tr><tr><td>Tubo cônico de 50 mL</td><td>Corning</td><td></td><td></td>430829</tr><tr><td>Broca quadrada</td><td>KAKURI Corporation</td><td>DIY FACTORY (K32-0313)</td><td></td></tr></tbody></table>

protocolo de baixo custo de análise da pegada e caixa de teste de suspensão para ratos aplicada o retenção crônica de estresse

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Perturbação da marcha é frequentemente observada em pacientes com distúrbios do movimento. Em modelos do rato usados para distúrbios de movimento, análise da marcha é importante teste comportamental para determinar se os ratos imitam os sintomas dos pacientes. Déficit motor muitas vezes é induzida por estresse quando não fenótipo motor espontâneo é observado em modelos do rato. Portanto, a análise da marcha, seguido de estresse de carregamento seria um método sensível para avaliar o fenótipo motor em modelos do rato. No entanto, os pesquisadores enfrentam a exigência de um aparelho caro para obter resultados quantitativos automaticamente a partir da análise da marcha. Para estresse, estresse por métodos simples de carregamento sem aparelhos caros necessários para choque elétrico e forçado a correr é desejável. Portanto, apresentamos um protocolo simples e de baixo custo, consistindo em análise de pegada com papel e tinta, teste de caixa para avaliar a função motora de suspensão, e carga de estresse definido pela moderação com um tubo cónico. O déficit motor de ratos com êxito foram detectado pelo presente protocolo.

Os camundongos machos heterozigotos de Atp1a3 (Atp1a3+ −) que são o modelo do rato para início rápido distonia parkinsonismo e selvagem-tipo littermates foram utilizados no presente protocolo. Atp1a3+ − mostrou significativamente menor comprimento dos passos do membro anterior e membro posterior do que aqueles do tipo selvagem em 4 semanas de idade (Figura 5A e Figura 5B, abra o cí...

O protocolo de baixo custo, composto por análise de pegada e teste de caixa de suspensão após estresse de contenção é útil para avaliar os distúrbios do movimento do modelo do rato.

Protocolo de baixo custo de análise da pegada e caixa de teste de suspensão para ratos aplicada o retenção crônica de estresse

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...

Nosso protocolo usando a análise da marcha é muito útil para determinar se motores de motores de rato de distúrbios de movimento imitam o sintoma do paciente com perturbação da marcha. Assim, a análise da marcha no teste de carregamento de estresse pode ser realizada facilmente, e sem equipamentos caros, para detectar certos fenótipos motores em camundongos, sem efeitos espontâneos. Antes de iniciar o teste comportamental, regisse o peso de cada mouse e use uma caneta de marcação para rotular cada cauda.Quando todos os animais tiverem sido pesados e marcados, coloque os ratos na sala experimental por pelo menos 30 minutos, e coloque uma caixa de suspensão clara, 25 por 25 por 40 centímetros, com uma tampa de malha rotativa, no banco do laboratório. Quando os ratos tiverem se aclimatado, coloque um rato no centro da tampa da malha e vire cuidadosamente a tampa de cabeça para baixo. Em seguida, meça a latência de queda do mouse da tampa da malha, antes de devolver o mouse para sua gaiola doméstica.Quando todos os ratos tiverem sido testados, coloque um pedaço de papel branco de 9,9 por 42 centímetros no banco do laboratório, e coloque uma caixa de gol escura na extremidade distal do papel. Coloque outras caixas, aproximadamente o mesmo comprimento do papel, em ambos os lados da pista para evitar a fuga. E adicione tinta preta e vermelha para separar 35 pratos de Petri mililitros.Para treinar os ratos para a análise, coloque um mouse na extremidade proximal do papel, de frente para a caixa de gol, e deixe o mouse andar da extremidade proximal do papel até a caixa de gol. Quando o rato chega à caixa, esmague suavemente o animal, enfiando as costas e a cauda entre a bola do polegar e os outros dedos, para limitar o movimento dos membros traseiros. E mergulhe os fundos dos membros dianteiros em tinta vermelha, e a parte inferior dos membros traseiros em tinta preta.Em seguida, coloque imediatamente o mouse de volta na extremidade proximal do papel, de frente para a caixa de gol, e deixe o mouse andar da extremidade proximal para a caixa de gol. Após a secagem do ar do papel impresso do pé, use uma régua para obter três medidas do comprimento do passo, medindo as distâncias entre as mesmas partes das impressões da pata. Da largura da base dianteira, desenhando uma linha entre pegadas consecutivas, do mesmo lado, dianteiras, e medindo o comprimento da linha vertical da almofada da pegada frontal, até a linha traçada entre as pegadas.E da largura da base traseira, desenhando uma linha entre pegadas traseiras direitas consecutivas, e medindo o comprimento da linha vertical da almofada da pegada traseira esquerda, até a linha traçada entre as outras pegadas direitas. Para se sobrepor, meça a distância entre as almofadas das pegadas dianteira e traseira. Para preparar um tubo de contenção, use uma broca quadrada para fazer 16 buracos de dois milímetros em um tubo de 50 mililitros ao longo das marcas de escala, e na parte traseira de cada marca de escala.Corte a ponta do tubo para fazer um furo de cinco milímetros, para respirar, e faça um furo de quatro milímetros na tampa do tubo, para a cauda. Para o teste de carregamento de estresse, escrogue um rato e coloque o animal na cabeça do tubo de contenção primeiro, com os membros dianteiros suavemente confinados. Passe a cauda através do orifício na tampa antes de tampar o tubo.E coloque o rato no banco por duas horas em temperatura ambiente. No final do período de carga de estresse, remova o rato do tubo e devolva o animal para sua gaiola doméstica. Como observado nessas figuras representativas, ratos modelo de parkinsonismo de distonia de início rápido heterozigous, demonstram comprimentos de passo dianteiros e passos traseiros significativamente mais curtos, do que seus companheiros de ninhada do tipo selvagem com quatro semanas de idade.Os camundongos modelo de parkinsonismo de início rápido heterozigoso de estresse também exibem comprimentos de passo significativamente mais curtos de ambos os membros do que os de companheiros de ninhada do tipo selvagem estressados com oito semanas de idade. Assimetrias dos comprimentos de passo de ambos os membros não são significativamente diferentes, em qualquer grupo de camundongos, em qualquer idade. A base frontal e as sobreposições de ambos os membros também são semelhantes, em todos os grupos, em todas as idades.A base traseira é significativamente mais ampla nestes camundongos modelo de parkinsonismo heterozigoso de início rápido estressados, do que o observado nos animais do tipo selvagem de estresse com 10 semanas de idade, indicando que o estresse causa déficits motores em camundongos modelo de parkinsonismo heterozigoso de início rápido. Não há diferenças significativas no tempo de enforcamento, entre o tipo selvagem e o mutante, são observadas em animais de quatro a 10 semanas de idade. Aos 12 semanas de idade, no entanto, o tempo de enforcamento de camundongos do tipo selvagem de estresse é significativamente maior do que o dos outros animais, sugerindo que o déficit motor em camundongos modelo de parkinsonismo heterozigoso de início rápido, é distinguido de ratos do tipo selvagem por teste de contenção em animais mais velhos.Coloque o mouse sobre o papel imediatamente após o mouse pendurar as partes inferiores dos membros na tinta para evitar a secagem da tinta antes do teste de caminhada. Testes adicionais para características emocionais, como campo aberto, plus-maze elevado e teste de natação inteiro, podem ser realizados para responder se a anormalidade da marcha resulta apenas de déficit motor. Nosso protocolo pode ser usado para explorar a suscetibilidade ao estresse, alterando o número e a duração do carregamento de estresse, e comparando fenótipos motores entre várias condições de carregamento.Nosso protocolo pode ser usado para explorar a suscetibilidade ao estresse alterando o número e a duração dos carregamentos de estresse, e comparando fenótipos motores entre várias condições de carregamento.

low-cost-protocol-footprint-analysis-hanging-box-test-for-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

O teste de tail-suspensão é validado como um procedimento experimental para avaliar a eficácia antidepressiva de tratamentos com drogas em camundongos. Os ratos são suspensos por suas caudas de seis minutos e escapar comportamentos relacionados são avaliados. Descrevemos os procedimentos utilizados na condução do teste de suspensão da cauda.

O Teste de Suspensão da cauda

Neste vídeo, descrevemos o procedimento de teste de pegada e análise relacionada para avaliar a marcha e a coordenação motora em camundongos.

Avaliação da marcha por análise de pegadas: um método para testar a coordenação motora em camundongos

O protocolo de estresse leve crônico imprevisível (UCMS) é um método validado para estudar mudanças comportamentais e fisiológicas associadas ao estresse crônico e sintomas depressivos. Oito semanas de imposição do protocolo UCMS induzem mudanças comportamentais e maus resultados de saúde em roedores de ambos os sexos.

Uma crônica Protocolo de estresse leve Imprevisível para sintomas depressivos Instigando, mudanças de comportamento e resultados negativos de saúde em Roedores

Aqui nós apresentamos o protocolo imprevisíveis stress leve crônica em ratos. Este protocolo induz um fenótipo de depressivo, como a longo prazo e permite avaliar a eficácia dos antidepressivos putativos em reverter os défices de depressiva como comportamentais e neuromolecular.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

Uma bateria de testes comportamentais abrangente das habilidades motoras, humor — incluindo a interação social, depressão e ansiedade — e cognição destina-se a avaliação repetida das alterações comportamentais relacionadas à neurodegeneração em camundongos.

Uma bateria de testes comportamentais para a avaliação repetida das habilidades motoras, humor e cognição em ratos

Este artigo fornece um protocolo simplificado e estandardizado para a indução do comportamento depressivo-como em ratos cronicamente imobilizados usando um restringidor. Além disso, explicam-se comportamentos e técnicas fisiológicas para verificar a indução da depressão.

Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

Este artigo descreve uma técnica de manuseio em camundongos, a técnica de manuseio 3D, que facilita o manuseio rotineiro reduzindo comportamentos semelhantes à ansiedade e apresenta detalhes sobre duas técnicas relacionadas existentes (manuseio de túneis e caudas).

Técnicas de manuseio para reduzir o estresse em camundongos

O teste de segurança contra ameaças sociais permite uma avaliação simultânea do desenvolvimento de evitação social como uma medida da aprendizagem condicionada aversiva e da capacidade de discriminação de segurança contra ameaças sociais, ambos utilizados para identificar indivíduos suscetíveis e resilientes ao estresse dentro de um único grupo de camundongos machos cronicamente derrotados socialmente.

Teste de segurança contra ameaças sociais revela fenótipos psicossociais relacionados ao estresse

Ao integrar quatro estressores sociais diários, o presente estudo descreve um modelo de estresse social integrado múltiplo (MISS) para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas. Após dez dias de exposição repetida ao MISS, os camundongos desenvolveram fenótipos depressivos e ansiosos, fornecendo assim um modelo animal natural baseado em etiologia para estudar transtornos psiquiátricos em mulheres.

Um modelo de estresse social integrado múltiplo para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas

Este artigo aborda os procedimentos para induzir respostas ao estresse usando o estresse de contenção física em camundongos e ratos. Considerações adicionais que devem ser observadas ao selecionar e usar o estresse de contenção em modelos de roedores são discutidas.

Contenção para induzir estresse em camundongos e ratos

Aprenda análise da marcha de baixo custo para avaliar distúrbios motores em camundongos após estresse por contenção. Este método detecta fenótipos motores sem equipamentos caros.

Protocolo de baixo custo de análise da pegada e caixa de teste de suspensão para ratos aplicada o retenção crônica de estresse

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