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DOI: 10.3791/59043-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol enables the imaging and quantification of lung-homing human immune cells in a mouse model of allergic inflammation. It provides insights into T cell lung homing under in vivo inflammatory conditions.
O protocolo introduzido aqui permite a caracterização da capacidade pulmonar localizador de linfócitos humanos primários sob condições inflamatórias em vivo. Infiltração pulmonar de enviaram transferidas células imunes humanas em um modelo do rato da inflamação alérgica pode ser fotografada e quantificada por microscopia de fluorescência de luz-folha de tecido pulmonar quimicamente limpo.
Nossa técnica permite a imagem precisa de células imunes humanas acumuladas pelo pulmão em condições inflamatórias in vivo fornecendo insights emocionantes sobre o processo de localização pulmonar das células T. Este protocolo apoia pesquisas translacionais sobre o homing pulmonar de células T e pode, assim, ajudar na identificação de novos alvos para uma terapia otimizada de doenças pulmonares inflamatórias ou alérgicas. Em particular, a capacidade de considerar a influência de propriedades de células imunes específicas da doença, organização de tecidos pulmonares e meio inflamatório na espirro pulmonar das células T torna este método altamente vantajoso.
No geral, nossa técnica é de alto valor para pesquisas imunológicas no campo de doenças pulmonares inflamatórias crônicas, que muitas vezes são impulsionadas por um acúmulo de tecido avassalador de células imunes ativadas. Depois de confirmar a falta de resposta ao beliscão do dedo do dedo em um rato C57 preto 6J de pelo menos 16 gramas, de seis semanas de idade, anestoizado, use um micropipet para entregar lentamente 10 microliters de solução papain recém-preparada em uma narina do mouse uma vez por dia por três dias consecutivos. No dia seguinte à última administração do papain, a camada 10 mililitros de Ficoll médio sob sangue periférico humano de um voluntário saudável pré-diluído em uma proporção de um a dois na PBS para separação gradiente de densidade por centrifugação.
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