Name: Modelo de Mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão Cerebral (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Aprenda a criar um modelo de oclusão de dois vasos para isquemia-reperfusão cerebral em camundongos. Este método permite investigar a patofisiologia do AVC e avaliar intervenções terapêuticas.

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Este trabalho foi financiado pelo Ministério da ciência e tecnologia, Taiwan (mais 106-2320-B-038-024, 105-2221-E-038-007-MY3 mais e mais 104-2320-B-424-001) e Taipei Medical University Hospital (107TMUH-SP-01). Este manuscrito foi editado por Wallace edição académica.

O cuidado animal institucional e comissões de utilização da Academia Sinica e Universidade de medicina de Taipei aprovaram este protocolo para o uso de animais experimentais.
1. modelo MCAO/reperfusão
<ol><li>Fornece os ratos com livre acesso à água e comida até a cirurgia.</li>
	<li>Autoclave a cirúrgica ferramentas e limpar a mesa de cirurgia e equipamentos utilizando etanol a 70%. Use uma máscara cirúrgica e luvas estéreis. Use um esterilizador de grânulo seco para esterilizar os instrumentos cirúrgicos se múltiplas cirurgias do mouse serão realizadas em um experimento.</li>
	<li>Anestesiar um rato de 8 a 12 semanas de idade (massa: 25 – 30 g) usando 0.8% hidrato de cloral, através de uma injeção intraperitoneal. Certifique-se que o mouse anestesiado não tem um reflexo de pedal (como os testes com uma pitada de dedo firme) após o anesthetization.</li>
	<li>Pomada de uso veterinário para evitar ressecamento do olho para o mouse enquanto ele está sob anestesia.</li>
	<li>Use um sistema de pressão não-invasiva para monitorar a pressão de sangue do rato.</li>
	<li>Use um sistema de monitorização fisiológico para monitorar sua temperatura retal e gasometria arterial. Manter a temperatura do corpo em 36,5 ± 0,5 ° C.</li>
	<li>Injecte por via subcutânea o mouse com um antibiótico profilático (cefazolina 25mg/kg)8.</li>
	<li>Posicione o mouse na posição supina na rampa de aquecimento.</li>
	<li>Use tosquiadeiras elétricas para expor a pele por raspar o pelo do rato na região ventral do pescoço, bem como na região entre o olho direito e o ouvido direito.</li>
	<li>Use creme de depilação para limpar a pele do corpo do rato e desinfectar o local cirúrgico alternando scrbus com povidione-iodo e etanol a 70%.</li>
	<li>Use tesoura de íris para cortar uma incisão de 1 cm de comprimento da linha média do pescoço.</li>
	<li>Use pinça íris para dissecar cuidadosamente o CCA livre de nervos vago sem causar danos físicos.</li>
	<li>Use as suturas de seda 5-0 para isolar o CCA.</li>
	<li>Faça uma incisão de 0,3 cm no couro cabeludo no ponto médio entre o olho direito e o ouvido direito.</li>
	<li>Use micro-tesouras para cortar o músculo temporalis para expor o osso zigomático e esquamosal.</li>
	<li>Sob um microscópio estéreo de dissecação, use um microdrill para criar um furo de 2 mm de diâmetro diretamente sobre o MCA distal do lado direito.</li>
	<li>Ligar o porta-malas a MCA distal do lado direito usando uma sutura de 10-0.</li>
	<li>Ocluir o CCA lado direito usando um clipe de aneurisma não-traumática.</li>
	<li>Depois de 10 ou 40 min de isquemia, remova os clips de aneurisma e sutura para restaurar o fluxo sanguíneo para a MCA e CCA.</li>
	<li>Use um clipe de sutura para selar a incisão de pele na cabeça.</li>
	<li>Sele as incisões na pele do colo do útero usando uma única sutura seguida, fechando a pele do pescoço com sutura ou grampo9.</li>
	<li>Injecte por via subcutânea buprenorfina (0,1 mg/kg) para alívio de dor9.</li>
	<li>Manter a temperatura do corpo do rato a 36,5 ± 0,5 ° C na rampa de aquecimento até recuperou totalmente da anestesia. Não retornam o animal que foi submetido a cirurgia para a companhia de outros animais até que ele se recuperou totalmente. Não abandone o animal até que ele recupere a consciência suficiente.</li>
	<li>Posicione o mouse no ringue autoclavados para que livremente pode acessar água e comida depois que ele se recuperou totalmente.</li>
</ol>2. coloração com cloreto de 2,3,5-triphenyltetrazolium
<ol><li>Anestesia o mouse com hidrato de cloral 0,8% através de uma injeção intraperitoneal.</li>
	<li>Use tesoura operacional para decapitar o animal.</li>
	<li>Expor o crânio usando uma tesoura de íris para fazer uma incisão na pele da cabeça.</li>
	<li>Use tesoura manual para cortar anterior do osso frontal.</li>
	<li>Use tesoura de íris para cortar o crânio ao longo da sutura sagital.</li>
	<li>Use um osso rongeur para empurrar de lado frontal e osso parietal e expor o cérebro.</li>
	<li>Use o fórceps de íris para dissecar o cérebro.</li>
	<li>Use uma matriz de cérebro de rato e lâminas de barbear para obter fatias coronais de 2 mm.</li>
	<li>Manche as fatias do cérebro durante 10 minutos a 37 ° C, com cloreto de 2,3,5-triphenyltetrazolium de 2% (TTC) em tampão fosfato salino de 1x.</li>
	<li>Lavar o cérebro 2 x com formol a 10%.</li>
	<li>Conserte o cérebro em formol a 10% em temperatura ambiente por 24 h.</li>
</ol>3. a medição do tamanho do infarto
<ol><li>Organizar as seções sobre uma lâmina de plástico limpo e orientar as seções de rostral ao caudal.</li>
	<li>Digitalize o slide usando um scanner. Coloque uma régua métrica e certifique-se que é visível na imagem digitalizada. Vire o slide e digitalizar o lado reverso.</li>
	<li>Calcule a área de infarto de cada seção utilizando o software ImageJ.<ol>
<li>Abra o arquivo de imagem e configurar a escala da imagem.</li>
		<li>Use a seleção à mão livre para selecionar a área de infarto.</li>
		<li>Use as regiões de Gerenciador de interesse (ROI) para medir a área de interesse.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Soma das áreas de infarto para cada seção e multiplicar o resultado pela espessura de corte para estimar o volume total de infarto.</li>
</ol>4. análise estatística
<ol><li>Use o GraphPad Prism 6 para determinar a significância estatística com Student t-teste. Nota: As barras de erro na barra de gráficos representam erros-padrão da média (SEMs).</li>
	<li>Uso G * poder 3.1 para calcular o tamanho de amostra adequado e realizar uma análise de poder10.</li>
</ol>

<ol><li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology%2C+treatment%2C+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurodegeneration%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11(2011).</li>
<li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunology+of+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neurology%22%5BJournal%5D)">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423(2011).</li>
<li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice%3A+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
<li>Wellons, J. C. 3rd, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li>
<li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+hypoxic+stroke%3A+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput%2C+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li>
<li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia%3A+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li>
<li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106(2016).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li>
<li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%3A+The+Journal+of+the+American+Society+for+Experimental+NeuroTherapeutics%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li>
<li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li>
<li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li>
<li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li>
<li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

O modelo de rato MCAO/reperfusão é um modelo animal, comumente empregado para imitar a isquemia transitória em seres humanos. Este modelo animal pode ser aplicado para as cepas de camundongos transgênicos e nocaute para investigar a fisiopatologia do acidente vascular cerebral. Várias etapas do protocolo são especialmente críticas. (1) o microdrill deve ser usado com cuidado quando criando um buraco no crânio, com ação inadequada facilmente causando sangramento do MCA. (2) o MCA não deve ser danificado, e sangramento dev...

O modelo do rato de isquémia-reperfusão cerebral é uma das abordagens experimentais mais amplamente utilizadas para investigar a fisiopatologia da induzida por isquemia cerebral lesão1. Porque isquémia-reperfusão cerebral ativa o sistema imunológico periférico, células imunitárias periféricas infiltrarem no cérebro isquêmico e causam dano neuronal2. Assim, um modelo de mouse confiável e reprodutível que imita a isquémia-reperfusão cerebral é necessário para compreender a fisiopatologia do acidente vascular cerebral.
C57Bl/6J (B6) ratos são a estirpe mais comumente usada em experimentos de curso porque eles facilmente podem ser manipulados geneticamente. Estão disponíveis dois modelos comuns de MCAO/reperfusão que imitam a condição de isquémia-reperfusão cerebral. O primeiro é o modelo do filamento intraluminal de MCAO proximal, onde um filamento de silício-revestido é empregado para por via intravascular, obstruir o fluxo de sangue na MCA; o filamento de oclusão posteriormente é removido para restaurar o fluxo de sangue3. Uma duração curta de oclusão resulta em uma lesão da região subcortical, Considerando que uma maior duração da oclusão provoca infartos nas áreas corticais e subcorticais. O segundo modelo é o modelo de ligadura de MCAO distal, que envolve a ligadura extravascular do MCA e CCA para reduzir o fluxo de sangue através da MCA, após o qual o fluxo sanguíneo é restaurado através da remoção da sutura e aneurisma clip4. Neste modelo, um infarto é causado nas áreas corticais e a taxa de mortalidade é baixa. Porque a ligadura do modelo MCAO/reperfusão requer craniectomia para expor o site do MCA distal, o site pode ser facilmente confirmado, e analisar se o fluxo de sangue na MCA distal é rompido durante o procedimento é simples.
B6 ratos apresentam consideráveis variações na anatomia de seu círculo de Willis; Isto pode afetar o volume de infarto cerebral de isquémia-reperfusão5,6,7a seguir. Atualmente, este problema pode ser superado através da ligadura do distal MCA8. Neste estudo, podemos estabelecer um método para obstruindo o fluxo sanguíneo do MCA e permitindo a reperfusão após um período pré-determinado de isquemia. Dois vasos de oclusão do modelo de isquémia-reperfusão cerebral induz isquemia transitória do território MCA através da ligadura do MCA bem distal e certo CCA, com fluxo de sangue restaurado após um determinado período de isquemia. Este modelo MCAO/reperfusão induz um infarto de tamanho estável, uma massa de células do sistema imunológico cérebro infiltrando no cérebro isquêmico e um déficit comportamental após isquémia-reperfusão cerebral4.

<table><tbody><tr><td>Bone rongeur</td><td>Diener</td><td></td><td>Friedman</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Sigma</td><td>B-044</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolina</td><td>Sigma</td><td>1097603</td><td></td></tr><tr><td>Hidrato de cloral</td><td>Sigma</td><td>C8383</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio de dissecção</td><td>Nikon</td><td>SMZ-745</td><td></td></tr><tr><td>Clippers elétricos</td><td>Petpro</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10% formalina</td><td>Esterilizador</td> de esferas secas Sigma <td>F5304</td><td></td></tr><tr><td>Germinador</td><td>Braintree Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Iris Forceps</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>10 cm</td></tr><tr><td>Iris Scissors</td><td>Diener</td><td></td><td>9 cm</td></tr><tr><td>Iris Scissors STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>11 cm</td></tr><tr><td>Microdrill</td><td>Stoelting</td><td>FOREEDOM K.1070</td><td></td></tr><tr><td>Micro-tesoura-Vannas</td><td>HEISS</td><td>H-4240</td><td>lâmina 7mm, 8 cm</td></tr><tr><td>Matriz cerebral de rato</td><td>World Precision Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de pressão arterial não invasivo</td><td>Muromachi</td><td>MK-2000ST</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura Operacional STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>14 cm</td></tr><tr><td>Sistema de Monitoramento Fisiológico</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Razor lâminas</td><td>Ever-Ready</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stoelting Aquecedores de Roedores</td><td>Stoelting</td><td>53810</td><td>Almofada de aquecimento</td></tr><tr><td>Clipe de sutura</td><td>Pinças de Stoelting</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>IDEALTEK</td><td></td><td>No.3</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>15672</td><td>Cola cirúrgica</td></tr><tr><td>10-0 sutura</td><td>UNIK</td><td>NT0410</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazólio cloreto</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td></td></tr></tbody></table>

modelo de mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão cerebral

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Neste estudo, um modelo de mouse de oclusão de artéria cerebral média (MCA) é empregado para estudar a isquémia-reperfusão cerebral. Um modelo do rato reprodutível e confiável é útil para investigar a fisiopatologia da isquémia-reperfusão cerebral e determinar potenciais estratégias terapêuticas para pacientes com acidente vascular cerebral. Variações na anatomia do círculo de Willis de C57BL/6 ratos afeta seu volume de infarto após lesão cerebral induzida a isquemia. Estudos têm indicado que oclusão distal do MCA (MCAO) pode superar esse problema e resultar em um tamanho de infarto estável. Neste estudo, podemos estabelecer um modelo de mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão cerebral através da interrupção do fluxo sanguíneo para o MCA certo. Nós distalmente ligate a MCA direita e artéria carótida comum direita (CCA) e restaurar o fluxo sanguíneo após um determinado período de isquemia. Esta lesão de isquemia-reperfusão induz um infarto de tamanho estável e um déficit comportamental. Células imunitárias periféricas infiltrar o cérebro isquêmico no prazo de 24 h infiltração. Além disso, a perda neuronal na área cortical é menor por um longo período de reperfusão. Portanto, este modelo de dois vasos oclusão é apropriado para investigar a resposta imune e recuperação neuronal durante o período de reperfusão após isquemia cerebral.

Este procedimento MCAO/reperfusão produziu um enfarte cortical nas imediações do MCA certo e causou um déficit comportamental. Diferentes graus de isquemia induzida por infarto volume (figura 1AB) e perda neuronal (Figura 1D) foram criados no córtex cerebral da área MCA certo através de um aumento na duração da ligadura. Esta lesão MCAO/reperfusão diminuiu a atividade locomotora do animal a 48 h ...

Para investigar a fisiopatologia do AVC, é criado um modelo do rato de isquémia-reperfusão cerebral. Nós distalmente ligate da artéria cerebral média direita e artéria carótida comum direita e restaurar o fluxo sanguíneo após 10 ou 40 min de isquemia.

Modelo de Mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão Cerebral

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Este modelo de rato de oclusão de dois vasos de isquemia-reperfusão cerebral pode investigar a fisiopatologia do derrame. Este modelo induzirá um volume de infarto estável de uma maior parte das células imunes infiltradas no cérebro isquêmico e o déficit comportamental após isquemia cerebral-reperfusão. Nesse modelo, um infarto é causado nas áreas corticais e a taxa de mortalidade é baixa.Como o modelo de reperfusão de ligadura MCAO requer craniotomia para expor o tamanho da MCA distal, o tamanho pode ser facilmente confirmado, e o exame se o fluxo sanguíneo no MCAO distal é interrompido durante o procedimento é simples. Forneça aos ratos acesso gratuito à água e à comida até a cirurgia. Autoclave as ferramentas cirúrgicas, e use 70% de etanol para higienizar a mesa de cirurgia e equipamentos.Depois de anestesiar um mouse de oito a 12 semanas de idade, certifique-se de que ele não tenha um reflexo de pedal quando testado usando uma pitada firme do dedo do pé. Use pomada veterinária para evitar o ressecamento dos olhos enquanto o rato estiver sob anestesia. Para monitorar a pressão arterial, primeiro remova o cabelo e, em seguida, use um sistema de pressão arterial não invasivo e um

two-vessel-occlusion-mouse-model-of-cerebral-ischemia-reperfusion

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Indução cirúrgica de uma lesão cerebral isquêmico no rato é um modelo amplamente utilizado para a pesquisa acidente vascular cerebral. Aqui nós demonstram a indução de isquemia cerebral focal por oclusão da artéria cerebral média. Visualização do infarto resultantes de coloração histológica e ressonância magnética também é mostrada.

Modelo de isquemia focal cerebral por oclusão Suture Endovascular da artéria cerebral média no Rat

Filamentosas de oclusão da artéria cerebral média é um modelo comum para o estudo de AVC isquêmico em ratos.

Curso de modelagem em Ratos - Oclusão da Artéria Cerebral Média com o modelo de Filamento

A fim de compreender a patofisiologia de acidente vascular cerebral, é importante o uso de modelos fiáveis. Este documento descreve um dos modelos de AVC mais utilizados em camundongos, denominado o meio modelo de oclusão da artéria cerebral (MCAo) (também denominado o filamento intraluminal ou modelo de sutura) com a reperfusão.

Abordagem cirúrgica para oclusão da artéria cerebral média e reperfusão induzida por acidente vascular cerebral em ratos

Descrevemos um modelo de camundongo de AVC induzido pela oclusão da artéria cerebral média usando uma sutura revestida de silicone. O protocolo pode ser aplicado para induzir oclusão permanente ou isquemia temporária, seguida de reperfusão.

Indução de Acidente Vascular Cerebral Isquêmico e isquemia-reperfusão em ratos usando a técnica de oclusão da artéria Oriente e Visualização de infarto Área

Oclusão de filamento intraluminal da artéria cerebral média é o modelo mais frequentemente utilizadas na vivo do acidente vascular cerebral experimental em roedores. Uma abordagem alternativa cirúrgica para permitir a reparação de artéria carótida comum é realizada aqui, que permite a reperfusão da artéria carótida comum e uma reperfusão completa no território da artéria cerebral média.

Oclusão de artéria Cerebral média, permitindo a reperfusão através de reparação de artéria carótida comum em ratos

Este protocolo demonstra um modelo único de acidente vascular cerebral em camundongo com um infarto de tamanho médio e uma excelente taxa de sobrevida. Esse modelo permite que os pesquisadores pré-clínicos do AVC estendam a duração da isquemia, usem camundongos envelhecidos e avaliem os resultados funcionais a longo prazo.

Modelo de Oclusão Transcraniana da Artéria Cerebral Média Modificada para Estudo de Resultados de Acidente Vascular Cerebral em Camundongos Idosos

Este protocolo descreve o modelo de isquemia cerebral focal transitória em camundongos através da oclusão intraluminal da artéria cerebral média. Além disso, exemplos de avaliação de resultados são mostrados usando ressonância magnética e testes comportamentais.

Modelo de Oclusão Transitória da Artéria Cerebral Média do Acidente Vascular Encefálico

Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer um modelo de oclusão da artéria cerebral média distal (dMCAO) por meio de eletrocoagulação transcraniana em camundongos C57BL/6J e avaliar o comportamento neurológico subsequente e as características histopatológicas.

Indução de AVC Isquêmico Agudo em Camundongos Usando a Técnica de Oclusão Distal da Artéria Média

O protocolo atual descreve um modelo de oclusão/reperfusão da artéria cerebral média em ratos que preserva a estrutura anatômica dos vasos cerebrais sem causar danos.

Um modelo de rato de oclusão/reperfusão da artéria cerebral média sem danificar a estrutura anatômica dos vasos cerebrais

Este protocolo apresenta um guia passo a passo para os pesquisadores realizarem o procedimento de oclusão da artéria cerebral média em camundongos usando o método modificado da artéria carótida externa Longa. As modificações apresentadas neste artigo visam aumentar a acurácia da oclusão da artéria cerebral média e garantir a reperfusão completa.

Otimização do Método de Oclusão da Artéria Cerebral Média Longa para Reperfusão Completa

Este protocolo descreve o processo de preparação para a reperfusão da oclusão da artéria cerebral média através da artéria carótida comum.

Preparação de um modelo modificado para reperfusão de oclusão da artéria cerebral média

Aprenda a criar um modelo de oclusão de dois vasos para isquemia-reperfusão cerebral em camundongos. Este método permite investigar a patofisiologia do AVC e avaliar intervenções terapêuticas.

Modelo de Mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão Cerebral

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