Name: Usando flight mills para medir a propensão de vôo e desempenho do west corn rootworm, diabrotica virgifera virgifera (LeConte) (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: Aprenda a usar flight mills para medir a propensão de voo e desempenho de Diabrotica virgifera virgifera em condições controladas. Este método ajuda pesquisadores a entender comportamentos de dispersão para manejo de pragas.

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A assistente de pós-graduação da E.Y.Y., foi apoiada pela National Science Foundation I/UCRC, o Center for Arthropod Management Technologies, o grant no. IIP-1338775 e parceiros da indústria.

1. A lombriga ocidental traseira do milho para testes de vôo
NOTA: Se a idade do adulto deve ser controlada ou conhecida, os adultos devem primeiro ser coletados no campo seguido de criar seus descendentes até a idade adulta para testes. Se a idade do besouro ou um ambiente de criação padronizado não é motivo de preocupação, então testar diretamente adultos coletados em campo pode ser possível, e o protocolo pode começar com a etapa 2.
<ol><li>Colete pelo menos 500 adultos ocidentais do rootworm do milho de um cornfield do interesse assegurar-se de bastante ovos são obtidos para criar números adequados de adultos. Use um aspirador manual para coletar adultos do campo. NOTA: Recomenda-se coletar adultos durante a abundância máxima, por volta do final de julho no Cinturão de Milho dos EUA, para garantir a coleta de ambos os sexos. A maioria dos adultos serão do sexo masculino se coletados mais cedo, enquanto a maioria será do sexo feminino se coletados mais tarde.</li>
	<li>Coloque os adultos machos e fêmeas coletados em uma gaiola de malha contendo orelha de milho picada, tecido de folha de milho, 1,5% sólido de ágar e um substrato de ovidão. Uma gaiola de 18 x 18 x 18 cm (tamanho de malha 44 x 32, 650 μm abertura) pode acomodar até 500 adultos ao mesmo tempo.<ol>
<li>Use o milho cultivado no campo como uma fonte de orelha de milho, que será colhida no R3, ou estágio de leite do desenvolvimento do kernel19. O kernel R3 é amarelo do lado de fora, enquanto o fluido interno é branco leitoso devido à acumulação de amido. As orelhas de milho podem ser congeladas e armazenadas por até um ano até que sejam necessários. Para alimentar o verme, retire a casca e pique o milho em seções transversais horizontais com cerca de 3 cm de espessura. Milho picado é a dieta primária para os adultos e deve ser alterado duas vezes por semana.</li>
		<li>Obter folhas de plantas de milho cultivadas em estufa de qualquer idade. A quantidade de tecido da folha variará com o número de adultos na gaiola. Evite usar plantas de campo, pois podem introduzir doenças.</li>
		<li>Para fazer o ágar sólido, misture 15 g de pó de ágar com 1 L de água DI. Aqueça a mistura até ferver. Despeje o líquido em placas de Petri (100 mm x 15 mm), enquanto ele está quente. Coloque uma tampa na placa de Petri uma vez esfriar e colocá-los em armazenamento frio (6 ° C). Agar fornece adultos com uma fonte de umidade e deve ser mudado duas vezes por semana.</li>
		<li>Para preparar um substrato de ovidão, coloque 40 g de solo de campo peneirado (<180 μm) em uma placa de Petri. Umedeça o solo com água desionizada. Certifique-se de que o solo na parte inferior da placa de Petri parece molhado. Marcar a parte superior do solo umedecido com uma ferramenta de agulha. Retire o substrato de oviposição semanalmente e coloque em uma incubadora a 25° C e 60% RH por pelo menos um mês.</li>
	</ol></li>
	<li>Após a incubação de ovos por um mês, lave o conteúdo do substrato de ovidão através de uma peneira de 250 μm até que todo o solo tenha sido removido. Quantifique os ovos colocando ovos lavados em um cilindro graduado de 10 mL. Há aproximadamente 10.000 ovos por 1 mL.</li>
	<li>Coloque os ovos quantificados em um recipiente de 44 mL e cubra com solo de campo peneirado (<180 μm). Os ovos ocidentais do rootworm do milho submetem-se à diapausa obrigatória com o inverno20. Para quebrar a diapausa, coloque os ovos em armazenamento a frio (6° C) por pelo menos 6 meses. NOTA: Os ovos podem ser mantidos no armazenamento frio por mais de 5 meses, mas a viabilidade do ovo diminui com tempo. Depois de 12 meses, pode haver pouca ou nenhuma escotilha.</li>
	<li>Após um mínimo de 5 meses, retire os ovos do armazenamento a frio e coloque em uma incubadora a 25° C e 60% RH. Neonatos eclodem tão cedo quanto 16 dias após a remoção do armazenamento frio.</li>
	<li>Uma vez que os ovos eclodem, coloque três grãos germinados no fundo de um recipiente de plástico de 44 mL com raízes expostas (ou seja, não cobertas de solo). Use uma escova macia da cerda para transferir 12 neonates à superfície das raizes.</li>
	<li>Adicione 4,5 mL de água DI a 40 mL de solo peneirado (<600 μm). Coloque o solo umedecido sobre os grãos germinados que foram infestados com neonatos e cubra o recipiente com tecido de malha para evitar que as larvas escapem.</li>
	<li>No mesmo dia em que o recipiente de plástico de 44 mL é montado com neonatos, prepare um recipiente de 473 mL com grãos de milho que não germinaram. As larvas do rootworm serão transferidas a este recipiente maior mais tarde. O número de sementes determina a densidade larval desejada por planta. Adicione 120 g de mistura de solo composto por 50% de solo de campo peneirado (<600 μm) e 50% de solo de envasamento umedecido com 20 ml de água desionizada.</li>
	<li>Após 7 dias, transfira todo o conteúdo do recipiente de 44 mL para o contêiner de 473 mL. As larvas serão as segundas estrelas no momento da transferência. NOTA: Esta transferência para um recipiente maior é necessária para fornecer larvas com massa de raiz suficiente para se alimentar através da pupação.</li>
	<li>Observe o surgimento de adultos tipicamente em torno de 26 dias após a escotilha do ovo. Os adultos são pilotos ativos após o surgimento e podem escapar do recipiente de 473 mL ao tentar coletá-los à mão. Em vez disso, use um vácuo com um aspirador para coletar adultos.</li>
	<li>Segregar adultos por sexo e/ou data, se necessário para testes comparativos. O sexo do rootworm ocidental do milho pode ser determinado observando a morfologia do basitarsi protorácico21. Os machos têm basitarsi protorácico largo e quadrado, enquanto os das fêmeas são estreitos e em forma cônica.<ol>
<li>Coloque o besouro em um frasco de plástico de poliestireno transparente de 45 mL e cubra com uma tampa com 6 pequenos buracos (~1 mm de diâmetro).</li>
		<li>Anestesie o besouro. Coloque a extremidade de um tubo ligado a um regulador de tanque CO2 sobre os buracos na tampa e permitir que um fluxo suave de CO2 para entrar no tubo por aproximadamente 10 a 15 s até que o adulto perde o controle sobre a parede do frasco. NOTA: O inseto anestesiado permanecerá imobilizado por cerca de 1 min.</li>
		<li>Coloque o besouro anestesiado, lado ventral para cima, em um fundo de placa de petri de plástico invertido. Coloque cuidadosamente a tampa não invertida da placa de Petri sobre o besouro. Certifique-se de que o tarsi do besouro pressione contra a tampa, permitindo a fácil observação do basitarsi protorácico um microscópio dissecando.</li>
	</ol></li>
	<li>Se o experimento exige que os besouros sejam acasalados antes do voo, use machos com pelo menos 5 dias de idade para acasalar com as fêmeas recém-emergidas. NOTA: O uso de machos mais velhos garante que eles são sexualmente maduros após a sua introdução às fêmeas virgens. As fêmeas são sexualmente maduras após o surgimento de adultos, enquanto os machos exigem de 5 a 7 dias de desenvolvimento pós-emergência para atingir a maturidade sexual22,23.</li>
</ol>2. Iniciar o programa de software da fábrica de voo antes dos testes de voo
NOTA: Os arquivos do programa da fábrica de voo (.vi extensões de arquivo que são executados em uma plataforma de software comercial, ver Tabela de Materiais) e detalhes para seu uso são fornecidos para download através de links ("rotina de análise de dados" e "Instruções Circular Flight Mill", respectivamente) na seção "Fiação e software da fábrica de voo" no site Jones et al.18. Se os programas não funcionarem mais em versões mais recentes ou futuras da plataforma de software, ou se o usuário quiser adicionar novos recursos, as rotinas fornecidas por Jones et al. 18 podem ser modificadas pelo usuário conforme necessário.
<ol><li>Abra o programa de software da fábrica de voo(Figura 3).</li>
	<li>Insira as informações a guia de inicialização.<ol>
<li>Defina o horário de início e o horário de término para a duração desejada do teste de voo. NOTA: Todos os adultos devem ser amarrados e montados em moinhos de vôo por 30 minutos antes do horário de início. Pode levar uma pessoa experiente 30 min a 45 min para amarrar e preparar 16 besouros para testes de vôo (ver Seção 3).</li>
		<li>Definir o limite min (min) para 0. Isso garante que qualquer detecção da passagem do braço de vôo será registrada, e é o padrão recomendado por Jones et al. 18.</li>
		<li>Definir o limite máximo (min) para 1. Aqui, 1 min foi usado. Este valor significa que 1 min deve decorrer entre a detecção do sensor do braço de vôo para "chamar" o fim de um vôo.</li>
		<li>Digite um nome para o arquivo.</li>
		<li>Defina o intervalo de registro de dados brutos (min) para 1. Esse valor controla o intervalo sobre o qual os dados brutos serão compilados para relatórios de saída. Aqui, está definido como 1 min. Assim, a saída das revoluções, por exemplo, será registrada por minuto. NOTA: O intervalo de tempo real entre a digitalização eletrônica da atividade do sensor é muito curto, mas um intervalo de 1 minuto permite a exploração madeireira em uma escala fina o suficiente para a maioria dos fins de pesquisa, enquanto restringe o número de linhas na saída da planilha a um número razoável para examinar de olho.</li>
	</ol>
</li>
	<li>De acordo com a aba De informações sobre o assunto, preencha as colunas rotuladas de identificação, dieta, sexo, espécies e comentários como desejado.</li>
	<li>Clique no botão START localizado no lado esquerdo da tela. O programa começará a coletar dados brutos assim que o Horário Atual corresponda ao horário de início.</li>
</ol>3. Tether rootworm milho ocidental para fábrica de vôo
<ol><li>Dobre um fio de aço de calibre 28 de 40 mm de 90° no centro. NOTA: O fio também pode ser de outro metal, como cobre ou latão.</li>
	<li>Pegue uma pequena quantidade de cera dental, ligeiramente maior do que uma cabeça de alfinete, e rolá-lo entre as pontas dos dedos até que uma bola é formada. Certifique-se de que os dedos estão limpos para evitar detritos, sujeira e óleo de incorporação na cera, porque pode impedir que a cera de adere ao inseto.</li>
	<li>Empurre uma extremidade dos 40 mm o fio dobrado para o centro da bola de cera.</li>
	<li>Anestesie o adulto de teste com CO2, conforme descrito acima (ver 1.11.1 e 1.11.2).</li>
	<li>Coloque o adulto anestesiado em uma superfície plana e posicione seu lado dorsal para cima. Se o besouro não se encontra completamente liso na superfície, reposicione os pés de modo que faça. É importante que o besouro se deite tão liso como possível na superfície para assegurar o posicionamento correto do fio.</li>
	<li>Brevemente (< 1 s) aquecer a cera dentária no fio com um isqueiro butano. Se a cera é aquecida por muito tempo, a cera derretida vai cair fora do fio. Não reutilize a cera se ela tiver caído do fio, pois não aderirá efetivamente à cutícula do inseto.</li>
	<li>Coloque cuidadosamente a extremidade do fio de aço com a cera dentária derretida na superfície dorsal do pronotum, enquanto aponta a outra extremidade do fio, (ou seja, a extremidade sem cera dentária), ao longo da linha média do abdômen. Alternativamente, aponte a extremidade do fio sem a cera dental para a cabeça se desejado. Nesse caso, um besouro voador vai empurrar o braço de vôo em vez de puxá-lo. Certifique-se de que a cera derretida não entrar no elytra ou suas suturas, pois pode impedir ou dificultar o vôo.</li>
	<li>Coloque a extremidade livre do fio na abertura do tubo de metal oco do braço da fábrica de vôo. Certifique-se de que o fio se encaixa apertado o suficiente para manter no lugar por atrito. O besouro amarrado pode ser posicionado para voar no sentido horário ou no sentido anti-horário.</li>
	<li>Imediatamente após a montagem de um besouro, rasgar um pequeno pedaço (~ 1 cm de papel de seda de um tecido maior. Ofereça a parte do tecido ao besouro amarrado que pendura do moinho de vôo para o contato tarsal; a maioria dos besouros vai agarrar o tecido e mantê-lo contra a gravidade até liberá-lo no início de sua primeira atividade de vôo. Isso reduzirá consideravelmente o comportamento inicial de fuga ou pouso. NOTA: A presença humana na sala de testes de voo deve ser limitada à anexação e remoção de adultos das usinas de voo. O período de teste geralmente não começa até que pelo menos 30 min tenham decorrido desde o anexo (ver Nota abaixo de 2.2.1), e os seres humanos não devem estar presentes na sala de vôo durante este tempo ou durante o período de teste em si.</li>
	<li>Remova todos os adultos testados após a conclusão de um teste de fábrica de voo. Retire a conta de cera que liga a corda ao pronotum descascando delicadamente o fio longe do pronotum. A cera se separará facilmente sem danificar a cutícula, tornando o inseto disponível para mais experimentação, se desejar.</li>
</ol>4. Salve os dados coletados do programa da fábrica de voo.
<ol><li>O programa pode ser definido para manual ou auto. Se o programa estiver definido como manual, o usuário deve terminar o programa clicando no botão STOP. Se o programa for definido como AUTO,o programa deixará de coletar dados brutos assim que o Tempo Atual correspondesse ao Tempo Final.</li>
	<li>Clique na SAÍDA após o término do período de testes de voo.</li>
	<li>Certifique-se de que um arquivo TDMS seja salvo o nome do arquivo inserido durante a inicialização do programa (passo 2.2).</li>
	<li>Clique no arquivo TDMS e salve o documento como planilha (.xlsx).</li>
</ol>5. Recuperar parâmetros de voo da planilha salva (.xlsx)
NOTA: Uma planilha pode ser projetada personalizada para manipular a saída de dados brutos do software da fábrica de voo. Aqui, o programa de software foi o mesmo descrito por Jones et al. 18, mas uma rotina adicional foi adicionada para reconhecer e resumir o voo ininterrupto mais longo por um inseto individual durante o período de teste.
<ol><li>Para cada indivíduo que se envolveu em atividade de voo, a planilha incluirá as seguintes informações: número de voo, revoluções totais, horário de início, horário de término e duração do voo em minutos.<ol>
<li>Para calcular a distância total voada durante o período de teste, soma a coluna rotulada de "Rotações Totais" e multiplique-a pela distância voada por revolução. A distância por revolução depende do comprimento do braço de vôo do pivô central para o inseto em anexo. Por exemplo, se essa distância for de 15,9 cm, cada revolução é equivalente a um metro voado. O número total de revoluções também pode ser encontrado na aba 'Test Stats'.</li>
		<li>Para calcular a duração total voada durante o período de teste, soma a coluna rotulada como "Duração de Voo (min)".</li>
		<li>Para determinar a distância e a duração do voo ininterrupto mais longo, acesse a aba 'Estatísticas de Teste' e olhe para a coluna com o rótulo "Voo Mais Longo #'.</li>
		<li>A velocidade do voo pode ser calculada dividindo a distância voada por duração do voo. Para insetos, a velocidade é comumente expressa em m/s ou km/h.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Gillette, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabrotica+virgifera+Lec.+as+a+corn+root-worm%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Diabrotica virgifera Lec. as a corn root-worm.</a> Journal of Economic Entomology. 5 (4), 364-366 (1912).</li>
<li>Rice, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+rootworm+corn%3A+assessing+potential+agronomic%2C+economic%2C+and+environmental+benefits%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Management+Network%22%5BJournal%5D)">Transgenic rootworm corn: assessing potential agronomic, economic, and environmental benefits.</a> Plant Management Network. , (2004).</li>
<li>Gray, M. E., Sappington, T. W., Miller, N. J., Moeser, J., Bohn, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptation+and+invasiveness+of+western+corn+rootworm%3A+Intensifying+research+on+a+worsening+pest%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Adaptation and invasiveness of western corn rootworm: Intensifying research on a worsening pest.</a> Annual Review of Entomology. 54 (1), 303-321 (2009).</li>
<li>Martinez, J. C., Caprio, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IPM+use+with+the+deployment+of+a+nonhigh+dose+Bt+pyramid+and+mitigation+of+resistance+for+western+corn+rootworm+%28Diabrotica+virgifera+virgifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">IPM use with the deployment of a nonhigh dose Bt pyramid and mitigation of resistance for western corn rootworm (Diabrotica virgifera virgifera).</a> Environmental Entomology. 45 (3), 747-761 (2016).</li>
<li>Miller, N. J., Sappington, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+dispersal+in+resistance+evolution+and+spread%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Insect+Science%22%5BJournal%5D)">Role of dispersal in resistance evolution and spread.</a> Current Opinion in Insect Science. 21, 68-74 (2017).</li>
<li>Spencer, J. L., Hibbard, B. E., Moeser, J., Onstad, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behaviour+and+ecology+of+the+western+corn+rootworm+%28Diabrotica+virgifera+virgifera+LeConte%29%5BTitle%5D)+AND+%22Agricultural+and+Forest+Entomology%22%5BJournal%5D)">Behaviour and ecology of the western corn rootworm (Diabrotica virgifera virgifera LeConte).</a> Agricultural and Forest Entomology. 11, 9-27 (2009).</li>
<li>VanWoerkom, G. J., Turpin, F. T., Barret, J. R. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+constant+and+changing+temperatures+on+locomotor+activity+of+adult+western+corn+rootworms+%28Diabrotica+virgifera%29+in+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Influence of constant and changing temperatures on locomotor activity of adult western corn rootworms (Diabrotica virgifera) in the laboratory.</a> Environmental Entomology. 9 (1), 32-34 (1980).</li>
<li>Naranjo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+flight+behavior+of+Diabrotica+virgifera+virgifera+and+Diabrotica+barberi+in+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Comparative flight behavior of Diabrotica virgifera virgifera and Diabrotica barberi in the laboratory.</a> Entomologia Experimentalis et Applicata. 55 (1), 79-90 (1990).</li>
<li>Stebbing, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flight+behavior+of+methyl-parathion-resistant+and+-susceptible+western+corn+rootworm+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29+populations+from+Nebraska%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Flight behavior of methyl-parathion-resistant and -susceptible western corn rootworm (Coleoptera: Chrysomelidae) populations from Nebraska.</a> Journal of Economic Entomology. 98 (4), 1294-1304 (2005).</li>
<li>Dobson, I. D., Teal, P. E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+long-range+reproductive+behavior+of+male+Diabrotica+virgifera+virgifera+LeConte+and+D.+barberi+Smith+and+Lawrence+to+stereoisomers+of+8-methyl-2decyl+propanoate+under+laboratory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Analysis of long-range reproductive behavior of male Diabrotica virgifera virgifera LeConte and D. barberi Smith and Lawrence to stereoisomers of 8-methyl-2decyl propanoate under laboratory conditions.</a> Journal of Chemical Ecology. 13 (6), 1331-1341 (1987).</li>
<li>Spencer, J. L., Isard, S. A., Levine, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free+flight+of+western+corn+rootworm+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29+to+corn+and+soybean+plants+in+a+walk-in+wind+tunnel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Free flight of western corn rootworm (Coleoptera: Chrysomelidae) to corn and soybean plants in a walk-in wind tunnel.</a> Journal of Economic Entomology. 92 (1), 146-155 (1999).</li>
<li>Coats, S. A., Tollefson, J. J., Mutchmor, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+migratory+flight+in+the+western+corn+rootworm+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Study of migratory flight in the western corn rootworm (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> Environmental Entomology. 15 (3), 620-625 (1986).</li>
<li>Coats, S. A., Mutchmor, J. A., Tollefson, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+migratory+flight+by+juvenile+hormone+mimic+and+inhibitor+in+the+western+corn+rootworm+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Regulation of migratory flight by juvenile hormone mimic and inhibitor in the western corn rootworm (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> Annals of the Entomological Society of America. 80 (5), 697-708 (1987).</li>
<li>Kennedy, J. S., Ainsworth, M., Toms, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+studies+on+the+spraying+of+locusts+at+rest+and+in+flight%5BTitle%5D)+AND+%22Anti-Locust+Bull.+L%22%5BJournal%5D)">Laboratory studies on the spraying of locusts at rest and in flight.</a> Anti-Locust Bull. L. 2, 64(1948).</li>
<li>Krogh, A., Weis-Fogh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Roundabout+for+studying+sustained+flight+of+Locusts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">A Roundabout for studying sustained flight of Locusts.</a> Journal of Experimental Biology. 29, 211-219 (1952).</li>
<li>Attisano, A., Murphy, J. T., Vickers, A., Moore, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+flight+mill+for+the+study+of+tethered+flight+in+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A simple flight mill for the study of tethered flight in insects.</a> Journal of Visualized Experiments. (106), e53377(2015).</li>
<li>Okada, R., Pham, D. L., Ito, Y., Yamasaki, M., Ikeno, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+the+flight+ability+of+the+ambrosia+beetle%2C+Platypus+quercivorus+%28Murayama%29%2C+using+a+low-cost%2C+small%2C+and+easily+constructed+flight+mill%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Measuring the flight ability of the ambrosia beetle, Platypus quercivorus (Murayama), using a low-cost, small, and easily constructed flight mill.</a> Journal of Visualized Experiments. (138), e57468(2018).</li>
<li>Jones, V. P., Naranjo, S. E., Smith, T. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJones%2C+VP+%22Insect+ecology+and+behavior%3A+laboratory+flight+mill+studies%22">Insect ecology and behavior: laboratory flight mill studies</a>. , http://entomology.tfrec.wsu.edu/VPJ_Lab/Flight-Mill (Accessed 31 August 2018) (2010).</li>
<li>Abendroth, L. J., Elmore, R. W., Boyer, M. J., Marlay, S. K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAbendroth%2C+LJ+%22Corn+Growth+and+Development%22">Corn Growth and Development</a>. , Iowa State University. Ames, Iowa. PMR 1009 (2011).</li>
<li>Meinke, L. J., Sappington, T. W., Onstad, D. W., Guillemaud, T., Miller, N. J., Komáromi, J., Levay, N., Furlan, L., Kiss, J., Toth, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Western+corn+rootworm+%28Diabrotica+virgifera+virgifera+LeConte%29+population+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Agricultural+and+Forest+Entomology%22%5BJournal%5D)">Western corn rootworm (Diabrotica virgifera virgifera LeConte) population dynamics.</a> Agricultural and Forest Entomology. 11, 29-46 (2009).</li>
<li>Hammack, L., French, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+dimorphism+of+basitarsi+in+pest+species+of+Diabrotica+and+Cerotoma+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Sexual dimorphism of basitarsi in pest species of Diabrotica and Cerotoma (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> Annals of the Entomological Society of America. 100 (1), 59-63 (2007).</li>
<li>Guss, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sex+pheromone+of+the+western+corn+rootworm+%28Diabrotica+virgifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">The sex pheromone of the western corn rootworm (Diabrotica virgifera).</a> Environmental Entomology. 5 (2), 219-223 (1976).</li>
<li>Hammack, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calling+behavior+in+female+western+corn+rootworm+beetles+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Calling behavior in female western corn rootworm beetles (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> Annals of the Entomological Society of America. 88 (4), 562-569 (1995).</li>
<li>Minter, M., Pearson, A., Lim, K. S., Wilson, K., Chapman, J. W., Jones, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+tethered+flight+technique+as+a+tool+for+studying+life-history+strategies+associated+with+migration+in+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Ecological+Entomology%22%5BJournal%5D)">The tethered flight technique as a tool for studying life-history strategies associated with migration in insects.</a> Ecological Entomology. 43, 397-411 (2018).</li>
<li>Ribak, G., Barkan, S., Soroker, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aerodynamics+of+flight+in+an+insect+flight-mill%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The aerodynamics of flight in an insect flight-mill.</a> PLoS One. 12 (11), e0186441(2017).</li>
<li>Riley, J. R., Downham, M. C. A., Cooter, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+performance+of+leafhoppers+on+flight+mills+with+that+to+be+expected+in+free+flight%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Comparison of the performance of leafhoppers on flight mills with that to be expected in free flight.</a> Entomologia Experimentalis et Applicata. 83, 317-322 (1997).</li>
<li>Isard, S. A., Spencer, J. L., Mabry, T. R., Levine, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+atmospheric+conditions+on+high-elevation+flight+of+western+corn+rootworm+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Influence of atmospheric conditions on high-elevation flight of western corn rootworm (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> Environmental Entomology. 33 (3), 650-656 (2004).</li>
<li>Chapman, J. W., Reynolds, D. R., Wilson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-range+seasonal+migration+in+insects%3A+mechanisms%2C+evolutionary+drivers+and+ecological+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology+Letters%22%5BJournal%5D)">Long-range seasonal migration in insects: mechanisms, evolutionary drivers and ecological consequences.</a> Ecology Letters. 18, 287-302 (2015).</li>
<li>Spencer, J. L., Mabry, T. R., Vaughn, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+transgenic+plants+to+measure+insect+herbivore+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Use of transgenic plants to measure insect herbivore movement.</a> Journal of Economic Entomology. 96 (6), 1738-1749 (2003).</li>
<li>Isard, S. A., Spencer, J. L., Nasser, M. A., Levine, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerial+movement+of+western+corn+rootworm%2C+Diabrotica+virgifera+virgifera+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29%3A+diel+periodicity+of+flight+activity+in+soybean+fields%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Aerial movement of western corn rootworm, Diabrotica virgifera virgifera (Coleoptera: Chrysomelidae): diel periodicity of flight activity in soybean fields.</a> Environmental Entomology. 29 (2), 226-234 (2000).</li>
<li>Kim, K. S., Sappington, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+structuring+of+western+corn+rootworm+%28Coleoptera%3A+Chrysomelidae%29+populations+in+the+U.S.+based+on+microsatellite+loci+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Genetic structuring of western corn rootworm (Coleoptera: Chrysomelidae) populations in the U.S. based on microsatellite loci analysis.</a> Environmental Entomology. 34 (2), 494-503 (2005).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Caracterizar o comportamento ocidental do vôo do rootworm do milho é importante para conceber plantas eficazes da gerência da resistência. O comportamento de voo desta praga tem sido estudado em laboratório usando vários métodos, incluindo actógrafos, túneis de voo e usinas de voo. As usinas de voo, conforme descrito e ilustrado neste artigo, permitem que os insetos façam voos ininterruptos para que os pesquisadores possam quantificar parâmetros de voo, como distância, duração, periodicidade e velocidade de voos individu...

O bicho-da-raiz ocidental do milho, Diabrotica virgifera virgifera LeConte (Coleoptera: Chrysomelidae), foi identificado como uma praga do milho cultivado em 19091. Hoje, é a praga mais importante do milho(Zea mays L.) no Cinturão de Milho dos EUA, com larvas alimentando-se de raízes de milho causando a maior parte da perda de rendimento associada a esta praga. Os custos anuais para a gestão e as perdas de produção de milho devido ao enlatamento de milho são estimados em mais de US $ 1 bilhão2. O rootworm ocidental do milho é altamente adaptável, e as populações evoluíram a resistência às estratégias múltiplas da gerência que incluem insecticidas, rotação da colheita, e milho transgênico de Bt3. Determinar dimensões espaciais sobre quais táticas devem ser aplicadas para mitigar o desenvolvimento local de resistência, ou um hotspot de resistência, depende de uma melhor compreensão da dispersão4. As medidas de mitigação não serão bem-sucedidas se estiverem restritas a uma escala espacial muito pequena em torno de um hotspot de resistência, porque adultos resistentes se dispersarão além da área de mitigação5. Compreender o comportamento do vôo do rootworm ocidental do milho é importante criar plantas eficazes da gerência da resistência para esta praga.
Dispersão por vôo desempenha um papel importante na história da vida adulto ocidental corn rootworm e ecologia6, eo comportamento de vôo desta praga pode ser estudada em laboratório. Vários métodos podem ser usados para medir o comportamento de voo em laboratório. Um actógrafo, que restringe o vôo em um plano vertical, pode medir a quantidade de tempo que um inseto está envolvido em voo. Actógrafos têm sido usados para comparar a duração de vôo e padrões de periodicidade de machos e fêmeas ocidentais do rootworm do milho em idades diferentes, tamanhos de corpo, temperaturas, susceptibilidade do insecticida, e exposiçãodoinsecticida7,8, 9. Túneis de voo, que consistem em uma câmara de rastreamento e fluxo de ar direcionado, são especialmente úteis para examinar o comportamento de vôo de insetos ao seguir uma pluma de odor, como componentes de feromônio candidato10 ou voláteis de plantas11. As fábricas de voo são talvez o método mais comum para estudos laboratoriais sobre o comportamento de voo de insetos e podem caracterizar vários aspectos da propensão e desempenho de voo. Fábricas de vôo de laboratório têm sido empregadas em estudos de enveral de milho ocidental para caracterizar a propensão para fazer voos curtos e sustentados, bem como o controle hormonal do vôo sustentado12,13.
As usinas de voo fornecem uma maneira relativamente simples de estudar o comportamento de voo de insetos em condições de laboratório, permitindo que os pesquisadores meçam vários parâmetros de voo, incluindo periodicidade, velocidade, distância e duração. Muitas das fábricas de vôo usadas hoje são derivadas das rotundas de Kennedy et al.14 e Krogh e Weis-Fogh15. As fábricas de voo podem ser diferentes em forma e tamanho, mas o princípio básico permanece o mesmo. Um inseto é amarrado e montado em um braço horizontal radial que esteja livre para girar, com atrito mínimo, sobre um eixo vertical. À medida que o inseto voa para a frente, seu caminho é restrito a circular em um plano horizontal, com a distância percorrida por rotação ditada pelo comprimento do braço. Um sensor é normalmente usado para detectar cada rotação do braço causada pela atividade de vôo do inseto. Os dados brutos incluem rotações por tempo unitário e ocorreu o voo diurno. Os dados são alimentados em um computador para gravação. Os dados de várias fábricas de voo são frequentemente registrados em paralelo, essencialmente simultaneamente, com bancos de 16 e 32 usinas de voo sendo comuns. Os dados brutos são processados por software personalizado para fornecer valores para variáveis como velocidade de voo, número total de voos separados, distância e duração voados e assim por diante.
Cada espécie de inseto é diferente quando se trata do melhor método para amarrar por causa de variáveis morfológicas, como tamanho geral, tamanho e forma da área alvo para anexar a corda, suavidade e flexibilidade do inseto, necessidade e método para anestesia, potencial para sujar as asas e/ou cabeça com adesivo extraviado ou transbordar, e muitos, muitos mais detalhes. Nos casos de amarração visualizada de um bug plataspid16 e um besouro ambrosia17, as respectivas áreas-alvo para fixação de amarração são relativamente grandes e indulgentes de colocação adesiva imprecisa porque a cabeça e as asas são um pouco bem separados do site de anexos. Isso não é para minimizar a dificuldade de amarrar esses insetos, o que é exigente para qualquer espécie. Mas o tome-raiz de milho ocidental é um inseto particularmente desafiador para amarrar: o pronótono é estreito e curto, fazendo apego muito preciso com uma quantidade mínima de adesivo (cera dentária, neste caso) necessária para evitar interferências com a abertura do elytra para o vôo e com a cabeça, onde o contato com os olhos ou antenas pode afetar o comportamento. Ao mesmo tempo, o cabo deve firmemente ser unido para evitar a desalojação por este insecto forte. A demonstração de amarração de adultos do rootworm é a oferta a mais importante neste papel. Deve ser de ajuda para outras pessoas que trabalham com este ou insetos semelhantes, onde o método visualizado aqui poderia ser uma opção útil.
Este artigo descreve métodos usados para efetivamente amarrar e caracterizar a atividade de vôo de adultos ocidentais de enzimlhos de milho que foram criados em diferentes densidades larvais. As fábricas de voo e software utilizado neste estudo (Figura 1) foram derivados de projetos postados na internet por Jones et al.18 Técnicas de amarração foram modificados a partir da descrição em Stebbing et al.9 Uma matriz de 16 usinas de vôo foi alojados em uma câmara ambiental, projetado para controlar a iluminação, umidade e temperatura (Figura 2). Usando esta ou configuração semelhante, juntamente com as seguintes técnicas permite testar fatores que podem influenciar a propensão de vôo e desempenho do enziminho ocidental do milho, incluindo idade, sexo, temperatura, fotoperíodo, e muitos outros.

<table><tbody><tr><td>Isqueiro multiuso de butano</td><td>BIC</td><td>UXMPFD2DC</td><td>Para amolecer a cera ao amarrar</td></tr><tr><td>Frasco de plástico de poliestireno transparente (45 ml)</td> <td>Recipiente e Fornecimento de Freund</td><td>AS112</td><td>Para segurar o besouro enquanto anestesia</td></tr><tr><td>Meios de cultura desidratados, pó de ágar</td><td>Fisher Scientific</td><td>S14153</td><td>Para fazer ágar para reter a umidade para adultos</td></tr><tr><td>Haste de Delrin (1 "de diâmetro, 3,75" de comprimento)</td><td>Muitos fornecedores: podem usar mais barato na internet.</td><td></td><td>Para poste de moinho de vôo</td></tr><tr><td>Cera dental</td><td>DenTek</td><td>47701000335</td><td>Adere a corda de arame para</td></tr><tr><td>ímãs de anel de ferrite de protórax (OD: 0,69", ID: 0,29", Espessura: 0,118"; 7oz pull)</td> <td>Loja de ímãs</td><td>63B06929118</td><td>Opondo-se - para gerar o flutuador.</td></tr><tr><td>Sensor de efeito Hall</td><td>Optikinc</td><td>OHN3120U</td><td>Procure sob sensores magnéticos no lado esquerdo do site da Optekinc e procure o número da peça. Um link é fornecido para fornecedores atuais.</td></tr><tr><td>Tubo hipodérmico (calibre 22; 0,0358" OD x 0,01975 " ID x 0,004" parede)</td><td>Peças pequenas, Inc.</td><td>HTX-22T-12</td><td>Usado para braços de moinho de vôo e haste do eixo principal.</td></tr><tr><td>Incubadora (104.1 x 85.4 x 196.1 cm)</td><td>Percival Scientific</td><td>I-41VL</td><td></td></tr><tr><td>LabVIEW Software do sistema de desenvolvimento completo, plataforma de design de sistema</td><td>National Instruments (ver http://www.ni.com/en-us/shop/labview/select-edition.html)</td><td>LabVIEW 2018 (Edição completa)&nbsp;</td><td>Fornece o ambiente necessário para executar arquivos de moinhos de vôo (extensões .vi) disponíveis para download em Jones et al.18 em http://entomology.tfrec.wsu.edu/VPJ_Lab/Flight-Mill.&nbsp; O LabVIEW 2018 Full é compatível com os sistemas operacionais Win/Mac/Linux.</td></tr><tr><td>Gaiola de malha (18 x 18 x 18 cm)</td><td>MegaView Science Co., Ltd.</td>Tamanho da malha <td>BugDorm-4M1515</td><td>= 44 x 32, 650 &micro; m abertura</td></tr><tr><td>Ferramenta de agulha</td><td>BLICK</td><td>34920-1063</td><td>Para marcar a superfície do solo para postura de ovos em laboratório</td></tr><tr><td>Ímãs de anel de níquel (3/16 " OD x 1/16 " ID x: 1/16" grosso)</td><td>K& J Magnetics</td><td>R311</td><td>Usado para acionar o sensor digital de efeito hall.</td></tr><tr><td>Placa de Petri (100 mm x 15 mm)</td><td>Fisher Scientific</td><td>S33580A</td><td></td></tr><tr><td>Recipiente de plástico (44 ml)</td><td>Dart</td><td>150PC</td><td>Para criação inicial de larvas jovens</td></tr><tr><td>Recipiente de plástico (473 ml)</td><td>Placon</td><td>22885</td><td>Para criação de larvas mais velhas</td></tr><tr><td>Escova redonda (tamanho 2)</td><td>Simply Simmons</td><td>10472906</td><td>Para transferir recém-nascidos recém-nascidos para a superfície das raízes</td></tr><tr><td>Peneira ( 250-&micro; m)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>08-418-05</td><td>Para separar os ovos do solo</td></tr><tr><td>Fio de aço (calibre 28)</td> <td>O Grupo Hillman</td><td>38902350282</td><td></td></tr><tr><td>haste de Teflon (3/8 "de diâmetro, 3/4" de comprimento)</td> <td>United States Plastic Corporation</td><td>47503</td><td>Para aceitar o braço giratório.</td></tr><tr><td>Aspirar</td><td>Gast Fabricação, Inc.</td><td>1531-107B-G288X</td><td>Para aspirar adultos no laboratório</td></tr><tr>Lobby poli<td>branco do passatempo da tela do chiffon</td><td></td><td>194811</td><td>para impedir a fuga das larvas do recipiente de criação</td></tr></tbody></table>

usando flight mills para medir a propensão de vôo e desempenho do west corn rootworm, diabrotica virgifera virgifera (leconte)

Using Flight Mills to Measure Flight Propensity and Performance of Western Corn Rootworm, Diabrotica virgifera virgifera (LeConte)

O bicho-da-raiz ocidental do milho, Diabrotica virgifera virgifera (LeConte) (Coleoptera: Chrysomelidae), é uma praga economicamente importante do milho nos Estados Unidos do norte. Algumas populações desenvolveram resistência a estratégias de manejo, incluindo milho transgênico que produz toxinas inseticidas derivadas da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt). O conhecimento da dispersão ocidental do rootworm do milho é da importância crítica para modelos da evolução, da propagação, e da mitigação da resistência. O comportamento de voo de um inseto, especialmente a longa distância, é inerentemente difícil de observar e caracterizar. As fábricas de voo fornecem um meio de testar diretamente os impactos e consequências do desenvolvimento e do voo em laboratório que não podem ser obtidos em estudos de campo. Neste estudo, as usinas de voo foram usadas para medir o tempo de atividade de voo, o número total de voos e a distância, duração e velocidade dos voos realizados por vermes femininos durante um período de teste de 22 h. Dezesseis fábricas de voo foram alojadas em uma câmara ambiental com iluminação programável, temperatura e controle de umidade. A fábrica de vôo descrita é de um projeto típico, onde um braço de vôo é livre para girar sobre um pivô central. A rotação é causada pelo vôo de um inseto amarrado a uma extremidade do braço de vôo, e cada rotação é gravada por um sensor com um carimbo de tempo. Os dados brutos são compilados por software, que são posteriormente processados para fornecer estatísticas sumárias para parâmetros de interesse de voo. A tarefa mais difícil para qualquer estudo da fábrica de vôo é a apego da corda ao inseto com um adesivo, e o método usado deve ser adaptado a cada espécie. O apego deve ser forte o suficiente para manter o inseto em uma orientação rígida e para evitar o desprendimento durante o movimento, sem interferir com o movimento natural da asa durante o vôo. O processo de apego requer destreza, finesse e velocidade, fazendo imagens de vídeo do processo de enverinhos de valor.

A figura 4 mostra exemplos representativos de saídas esperadas após os testes de voo. Os dados de voo foram obtidos a partir de trabalhos experimentais realizados no Departamento de Entomologia da Iowa State University. Adultos de seis dias de idade, acasalados com encravadas pelo milho ocidental, foram amarrados a fábricas de voo e colocados em uma câmara ambiental controlada situada às 14:10 L:D, 60% RH e 25°C. Os besouros foram deixados nas usinas de voo por 22 horas consecutivas a partir...

As fábricas de voo são ferramentas importantes para comparar como idade, sexo, status de acasalamento, temperatura ou vários outros fatores podem influenciar o comportamentodevoo de um inseto. Aqui descrevemos protocolos para amarrar e medir a propensão de vôo e desempenho do entoinho de milho ocidental diferentes tratamentos.

Usando flight mills para medir a propensão de vôo e desempenho do west corn rootworm, diabrotica virgifera virgifera (LeConte)

The western corn rootworm, Diabrotica virgifera virgifera (LeConte) (Coleoptera: Chrysomelidae), is an economically important pest of corn in the northern ...

Insetos de diferentes idades, status de acasalamento, condições de criação, etc, muitas vezes diferem na propensão de voo ou desempenho. Experimentos em moinhos de voo podem revelar os efeitos relativos de tais fatores no comportamento de voo. Embora difícil de estudar no campo, as usinas de voo permitem uma extensa sondagem de voo sob condições controladas.Gerenciar uma resistência a pragas a inseticidas, incluindo culturas transgênicas, requer a compreensão de seu comportamento de voo. A disbursal da larva de milho ocidental é complexa e os estudos da fábrica de voo estão ajudando a esclarecê-lo. Com a adaptação, este método pode ser aplicado a quase qualquer espécie de inseto, seja pequena ou grande, praga ou não-praga.Amarrar qualquer inseto é a técnica mais difícil de dominar. Besouros com um pequeno pronoto como vermes são especialmente desafiadores. Pratique indivíduos amarrados sem importância aos seus experimentos reais, pois muitos serão descartados.Espera-se uma longa curva de aprendizado para que seja paciente consigo mesmo. Há muitas nuances para amarrar. Assistir vale mais do que mil palavras.Para começar, dobre um fio de aço calibre 28 de 40 milímetros de 90 graus no centro. Lave as mãos para remover detritos, sujeira ou óleo. Pegue uma pequena quantidade de cera dentária ligeiramente maior que uma cabeça de alfinete e role-a entre as pontas dos dedos até formar uma bola.Coloque um besouro adulto em uma superfície plana e posicione seu lado dorsal para cima. Reposicione as pernas, se necessário, para que o besouro fique completamente plano na superfície. Use um isqueiro de butano para aquecer brevemente a cera dentária no fio por menos de um segundo.Não reutilize a cera se ela foi aquecida por muito tempo e caiu do fio, pois não aderirá efetivamente à cutícula do inseto. Após a anestesia do besouro, coloque cuidadosamente a extremidade do fio de aço com a cera dentária derretida na superfície dorsal do pronoto enquanto aponta a outra extremidade do fio sem cera dentária ao longo da linha média do abdômen. Para evitar dificultar o voo, certifique-se de que a cera derretida não entre no elytra ou em suas suturas.Há apenas uma pequena janela de tempo disponível entre aquecer a cera na corda e afixá-la no besouro anestesiado. Mas com bastante prática, amarrar se tornará segunda natureza. Coloque a extremidade livre do fio na abertura do tubo de metal oco do braço da usina de voo.Certifique-se de que o fio se encaixe firmemente o suficiente para ser mantido no lugar por atrito. Imediatamente após a montagem de um besouro, rasgue um pequeno pedaço de papel de tecido de um tecido maior. Ofereça a peça de tecido ao besouro amarrado pendurado na fábrica de voo para contato tarsal.Isso reduzirá muito o comportamento inicial de fuga ou pouso. Tether besouros adicionais para testes de voo. Elimine a presença humana na sala de voo pelo menos 30 minutos antes do início do teste.Antes dos testes de voo, inicie o programa de software da fábrica de voo. Digite as informações na guia de inicialização. Defina o tempo de início e o tempo final para a duração desejada do teste de voo.Defina o limite mínimo para zero minutos. Isso garante que qualquer detecção do braço de voo que passe pelo sensor será registrada. Defina o limite máximo para um minuto, o que garante que um minuto deve passar entre as detecções do braço de voo antes de declarar o fim de um voo.Digite um nome para o arquivo. Defina o intervalo de registro de dados brutos para um minuto para controlar a saída de revoluções registradas a cada minuto. Na guia de informações do assunto, preencha as colunas rotuladas de RG, espécie, idade, sexo, dieta e comentário conforme desejado.Depois disso, retorne à guia de inicialização e deslize o botão no canto superior esquerdo do display da tela para auto. Em seguida, clique no botão iniciar. Uma vez que o tempo atual corresponde à hora de início, o programa começa a coletar dados brutos para quaisquer besouros voadores, como visto na aba status e depuração.Se o programa for definido como automático, o programa pára de coletar dados brutos assim que o tempo atual corresponder ao tempo final. Como alternativa, clique no botão stop para interromper o programa antes do horário de término programado. Clique na saída após o término do período de testes de voo.Certifique-se de que um arquivo TDMS seja salvo sob o nome de arquivo inserido durante a inicialização do programa. Clique no arquivo TDMS e salve o documento como uma planilha. Após a conclusão de um teste de moinho de voo, remova todos os besouros testados em voo.Retire a conta de cera que liga a corda ao pronoto e retire suavemente o fio do pronoto. O inseto está disponível para mais experimentações, se desejar. As fêmeas de seis dias de idade foram deixadas nas usinas de voo por 22 horas consecutivas a partir de 30 minutos antes do início do amanhecer simulado e sua atividade de voo foi registrada.A primeira guia na planilha resultante resume os adultos individuais que foram testados. Para o besouro fêmea amarrado à fábrica de voo número dois, a planilha exibe o número de voos, as revoluções totais por voo, o tempo de início e fim de cada voo e a duração de cada voo. Esta fêmea se envolveu em vários voos independentes, a maioria dos quais eram muito curtos.No entanto, no voo número cinco, a fêmea viajou 1.258 metros em um período de 38 minutos de voo ininterrupto. O besouro fêmea amarrado à fábrica de voo número um não se engajou durante o período de teste para que uma planilha em branco seja exibida. Um resumo dos parâmetros de voo dos dados brutos foi recuperado do software da usina de voo.Os parâmetros de voo totais referem-se à soma de todos os voos de um indivíduo durante o período de teste de 22 horas, enquanto os parâmetros de voo mais longos referem-se ao voo mais longo e ininterrupto durante o teste. É muito importante manusear o besouro com cuidado enquanto amarra. Durante este processo, o besouro é facilmente danificado ou amarrado incorretamente, o que resultará em dados de voo errados.A fácil remoção da cera de corda da cutícula permite testar os efeitos de grupos de voo e tratamento de traços subsequentes de interesse, como fecundidade e longevidade.

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