Name: Cirurgia do nervo facial no modelo de rato para estudar inibição e regeneração axonal (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-05T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 s
Description: Aprenda técnicas cirúrgicas do nervo facial em modelo de rato para estudar regeneração axonal e avaliar terapias para paralisia facial. Este método permite análise histomorfométrica e imagem em vivo da recuperação neural.

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A S.A.A. é financiada pela Academia Americana de Plástica Facial e Cirurgia Reconstrutiva Leslie Bernstein Grants Program.

Todas as intervenções foram realizadas de acordo com as diretrizes dos Institutos Nacionais de Saúde (NIH). O protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais Institucionais (IACUC) da Universidade de Michigan antes da implementação. Foram utilizados ratos sprague-dawley adultos de dez semanas de idade.
1. Antes do dia da operação
<ol><li>Garanta um estoque adequado de instrumentos cirúrgicos esterilizados, medicamentos analgésicos, medicamentos anestésicos e oxigênio antes do dia de operação. Consulte Tabela de Materiais para obter uma lista completa.</li>
</ol>2. Configuração pré-operatória
<ol><li>Garantir um espaço de trabalho adequado, incluindo espaço para pelo menos dois indivíduos (o cirurgião e um assistente). NOTA: Há necessidade de uma mesa de operação dedicada, espaço para a configuração da máquina de anestesia e espaço de armazenamento adequado para suprimentos esterilizados e de backup.</li>
	<li>Calibrar um microscópio operacional para uso durante os procedimentos. Certifique-se de que o cirurgião tem a capacidade de ajustar as alças do microscópio e os botões de zoom/foco colocando uma tampa esterilizada sobre as alças/botões NOTA: Utilizamos papel alumínio esterilizado sobre as alças/botões.</li>
</ol>3. Anestesia e preparação
<ol><li>Coloque o animal na câmara de anestesia e induza anestesia geral através de 1,8% de isoflurano e 0,9 L/min de oxigênio.<ol>
<li>Confirme um plano adequado de anestesia através de uma avaliação da respiração espontânea e uma avaliação da consciência, avaliando a resposta da careta do animal a uma pitada do dedo do dedo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Aplique lubrificante ocular bilateralmente para se proteger contra irritação ou ressecação da córnea.</li>
	<li>Raspe o local operacional com uma navalha ou cortador automático.<ol>
<li>Estabeleça um método para identificação de ratos neste momento, seja através de uma etiqueta de ouvido ou etiqueta/marcação de cauda.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Administrar uma injeção subcutânea de 0,05 mg/kg de buprenorfina ao longo das costas do animal para profilaxia contra dor pós-operatória.</li>
</ol>4. Abordagem cirúrgica e padrões de lesões
<ol><li>Transfira o animal para a mesa de operação e continue o fluxo de gás através de um nariz. Certifique-se de que uma almofada de aquecimento esteja posicionada sob o animal e o campo estéril para manter a temperatura corporal.</li>
	<li>Coloque a gaze esterilizada (enrolada e presa com fita) para usar como rolo de pescoço para o rato; isso proporcionará uma exposição aprimorada do campo cirúrgico. Observe que o posicionamento adequado do animal é primordial para a identificação e dissecção eficiente dos nervos.</li>
	<li>Prepare a pele facial do animal para o procedimento. Use cloroxidina ou uma solução à base de iodo para esfregar o local cirúrgico 3x, alternando com 70% de etanol, para garantir a desinfecção.</li>
	<li>Planeje e marque a incisão cirúrgica se desejar. Manipule o ouvido ipsilateral em uma direção anterior-posterior para determinar a dobra natural da pele pós-auricular.</li>
	<li>Forme uma incisão de 4-5 mm no vinco pós-auricular usando uma tesoura de íris afiada ou uma lâmina número 15. Isso pode ser expandido posteriormente no procedimento, conforme necessário.</li>
	<li>Dissecar sem rodeios através da fáscia subcutânea imediata e colocar um retrátil micro-Weitlaner para aumentar a exposição. Note que pode haver vasos sanguíneos de pequeno calibre nesta área; estes são melhor evitados retraindo-se superior ou inferiormente através do retrátil Weitlaner.</li>
	<li>Identifique o músculo dizstrico anterior enquanto ele viaja em uma direção inferior-superior em direção à sua inserção ao longo da base do crânio.<ol>
<li>Espalhe suavemente através da barriga muscular ao longo de seu ponto de inserção para revelar o tendão da barriga anterior. Note que o tendão aparece como um processo branco filmado emanando do músculo com uma inserção sólida na base do crânio.</li>
	</ol></li>
	<li>Após a identificação do músculo póstrico anterior e seu tendão, ajuste o retrátil Weitlaner para retrair ainda mais a barriga muscular. Note-se que a região posteriormente exposta é o espaço tridimensional onde está o tronco principal do nervo facial. NOTA: Esta região é limitada superior mente e medialmente pela base do crânio, lateralmente pelo músculo dizstrico anterior, posteromedialmente pelo canal auditivo, e inferiormente pelas estruturas do pescoço, incluindo a artéria temporal superficial.</li>
	<li>Após a exposição adequada, identifique o tronco principal do nervo facial à medida que viaja inferiormente por baixo do tendão do músculo digastric, onde ele sai do forame estilomastóide da base do crânio. Note que o nervo aparece como um cordão branco perolado, envolto na fáscia parótida-massetérica do animal. Pratique cautela ao expor ainda mais o nervo, pelas seguintes razões.<ol>
<li>Evite dissecção agressiva, ou spreads perpendiculares, para se proteger contra lesões neuropraxia mediadas por estiramento.</li>
		<li>Evite dissecção agressiva posterior e medialmente direcionada para se proteger contra violar os tecidos finos sobrepostos ao canal auditivo, pois isso poderia introduzir a flora do ouvido médio no campo cirúrgico.</li>
		<li>Evite danificar a artéria temporal superficial através de uma dissecção ampla mediana e inferiormente dirigida. Note que uma lesão será identificada por sangramento pulsante.<ol>
<li>Se a artéria estiver ferida, aplique pressão imediata com um aplicador de ponta de algodão ou gaze estéril através de fórceps. Agentes hemostáticos ou selante de fibrina líquida podem ser colocados nas proximidades. Tenha em mente que o animal pode exigir uma injeção subcutânea de 0,9% de solução salina estéril para estabilização de fluidos.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Rastreie o tronco principal distalmente dissecando ao longo do nervo em uma direção inferior, distalmente a partir da saída do forame estilmastóide.<ol>
<li>Estender a incisão original para permitir uma exposição completa do nervo e seus ramos. Tome cuidado para evitar uma ruptura da glândula parótida, pois isso pode resultar em sialocele pós-operatória.</li>
	</ol></li>
	<li>Induzir os padrões de lesão desejados da seguinte forma.<ol>
<li>Para uma lesão de esmagamento, use fórceps de joalheria de superfície lisa para agarrar firmemente o nervo e comprimi-lo9. Aplique pressão constante e reprodutível no nervo por um período de 30 s para garantir uma lesão de esmagamento adequada.</li>
		<li>Para uma simples transsecção, segure a fáscia sobreposta ao nervo, ou o epineúrio imediato, com fórceps de dentes finos, e use microtesouras afiadas para transcicar o nervo de forma limpa no ponto desejado com um único corte. Tome cuidado para evitar o excesso de tração no nervo com os fórceps.</li>
		<li>Para um modelo de lacuna nervosa, crie a lacuna nervosa desejada usando um método semelhante à lesão de transsecção simples. Use o eixo esterilizado de um aplicador com ponta de algodão para o comprimento do espaço nervoso desejado intraoperatório para garantir a similaridade do padrão de lesão entre os animais.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Fechamento da ferida
<ol><li>Irrigar a ferida com soro retumae e secá-la com gaze estéril.</li>
	<li>Aproxime as bordas da pele de forma simples e subcuticular com suturas absorvíveis, ou use cola de pele ou clipes de ferida, que também são aceitáveis para o fechamento da ferida. Coloque um ponto enterrado tomando uma mordida profunda para superficial de uma borda da pele e, em seguida, uma subsequente mordida superficial-profunda da borda da pele oposta.</li>
</ol>6. Recuperação pós-operatória
<ol><li>Administrar uma injeção subcutânea de analgésico anti-inflamatório não esteróide (como 0,05 mg/kg de buprenorfina e 0,5 mg /kg de Carprofinen) para o controle da dor pós-operatória. Coloque a injeção nas costas do animal.</li>
	<li>Cesse a administração do agente anestésico e permita que o animal inale oxigênio por mais 1 min.</li>
	<li>Coloque o animal em um aquecedor (através de uma lâmpada de calor), gaiola asséptica desprovida de material de cama para evitar a ingestão acidental. Observe que o animal normalmente demonstrará sinais de recuperação dentro de 1-2 min e pode parecer desorientado, com uma recuperação retardada da função da perna traseira.</li>
	<li>Devolva os animais para suas gaiolas na unidade habitacional adequada e administre analgésicos pós-operatórios no dia pós-operatório #1 para garantir a profilaxia contínua contra a dor.</li>
	<li>Monitore os animais 2x por dia para avaliar se há sinais de desnutrição, irritação corneana ou infecção no local cirúrgico, e mantenha registros cirúrgicos apropriados.<ol>
<li>Administre 0,9% de soro fisiológico estéril de forma subcutânea se houver perda significativa de peso.</li>
		<li>Aplique a pomada lubrificante ocular diariamente até que o reflexo de piscar do animal seja restabelecido.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

Os autores não têm nada para revelar.

O modelo de lesão do nervo facial de rato emergiu como o sistema mais versátil para a avaliação de fatores neurotróficos devido à sua acessibilidade cirúrgica, padrão de ramificação e significância fisiológica27,29,33,34,35,36. A combinação de demonstração de vídeo e aplicação de dados de animais transgênicos abre novas possi...

A lesão do nervo craniano na região da cabeça e do pescoço pode ser secundária às etiologias congênitas, infecciosas, idiopáticas, iatrogênicas, traumáticas, neurológicas, oncológicas ou sistêmicas1. O nervo craniano VII, ou nervo facial, é comumente afetado. A incidência de disfunção do nervo facial pode ser significativa, pois afeta de 20 a 30 por 100.000 pessoas a cada ano2. Os principais ramos motores do nervo facial são os ramos temporal, zigomático, bucal, mandibular marginal e cervical; dependendo do ramo envolvido, as consequências podem incluir incompetência oral ou baba, secura da córnea, obstrução do campo visual secundária à ptose, disartria ou assimetria facial2,3. A morbidade a longo prazo inclui o fenômeno da sincinese, ou movimento involuntário de um grupo muscular facial, com tentativa de contração voluntária de um grupo muscular facial distinto. A sincinese ocular-oral é a mais comum da regeneração aberrante como sequela da lesão do nervo facial e causa comprometimento funcional, constrangimento, diminuição da autoestima e má qualidade de vida3. A lesão aos ramos individuais dita as funções que estão seletivamente comprometidas.
O tratamento clínico da lesão do nervo facial não é bem padronizado e está precisando de mais pesquisas para melhorar os resultados. Esteróides podem aliviar o inchaço agudo do nervo facial, enquanto o Botox é útil para os movimentos sincinéticos temporizados; mas, as principais opções reconstrutivas no armamentário do praticante envolvem intervenção cirúrgica através de reparação nervosa, substituição ou reanimação3,4,5,6. Dependendo do tipo de lesão do nervo facial sustentada, o cirurgião do nervo facial pode utilizar uma série de opções. Para uma transsecção simples, a reanastomose nervosa é útil, enquanto o reparo do cabo-enxerto é mais adequado para um defeito nervoso; para uma restauração da função, o cirurgião pode escolher procedimentos de reanimação facial estática ou dinâmica. Em muitos casos de lesão do nervo facial e posterior reparação, mesmo nas mãos de cirurgiões nervosos faciais experientes, o melhor resultado ainda resulta em assimetria facial persistente e comprometimento funcional7.
Esses resultados subótimos estimularam extensas pesquisas sobre a regeneração do nervo facial. Amplos tópicos de interesse incluem aperfeiçoar e inovar técnicas de reparação nervosa, determinar o efeito de vários fatores de regeneração nervosa e avaliar o potencial de inibidores neurais específicos para ajudar a combater o resultado a longo prazo da sincinese8,9,10,11. Embora os modelos in vitro possam ser usados para avaliar algumas características de fatores pró-crescimento ou inibidores, a verdadeira pesquisa translacional sobre este assunto é melhor realizada através de modelos animais traduzíveis.
A decisão de qual modelo animal utilizar pode ser desafiadora, pois os pesquisadores utilizaram tanto animais de grande porte, como ovinos e modelos de pequenos animais, como camundongos12,13. Embora modelos de animais de grande porte ofereçam visualização anatômica ideal, seu uso requer equipamentos especializados e pessoal não disponível facilmente ou facilmente. Além disso, impulsionar um estudo para demonstrar efeito pode ser altamente proibitivo de custos e potencialmente não dentro do escopo viável de muitos centros científicos. Assim, o modelo animal pequeno é mais utilizado. O modelo do camundongo pode ser utilizado para avaliar uma série de desfechos relacionados à cirurgia do nervo facial; no entanto, o comprimento limitado do nervo pode restringir a capacidade do cientista de modelar certos padrões, como lesões de grande lacuna14.
Assim, o protótipo de murina de rato emergiu como o modelo workhorse através do qual o cientista pode realizar procedimentos cirúrgicos inovadores ou utilizar fatores inibidores ou pró-crescimento e avaliar o efeito em uma ampla gama de parâmetros de desfecho. A anatomia do nervo facial do rato é previsível e facilmente abordada de forma reprodutível. Sua escala maior, em comparação com o modelo do mouse, permite a modelagem de uma ampla gama de defeitos cirúrgicos, variando de transsecção simples a lacunas de 5 mm15,16. Isso permite ainda a aplicação de intervenções complexas no local do defeito, incluindo a colocação tópica do fator, injeções intraneurais do fator e a colocação de isoenxertos ou pontes17,18,19,20,21,22,23.
A natureza dócil do rato, sua anatomia confiável e sua propensão à regeneração nervosa eficaz permitem a coleta de muitas medidas de desfecho em resposta aos padrões cirúrgicos acima mencionados da lesão24. Através do modelo de rato, o cientista do nervo facial é capaz de avaliar respostas eletrofisiológicas a lesões, desfechos histológicos nervosos e musculares através da imunohistoquímica, desfechos funcionais através do movimento de rastreamento da almofada vibrissal e avaliação do fechamento dos olhos, e alterações micro e macroscópicas por meio de microscopia fluorescente ou confocal, entre outras11,22,23,25,26,27,28,29. Assim, o protocolo a seguir irá delinear uma abordagem cirúrgica para o nervo facial do rato e os padrões de lesão que podem ser induzidos.

<table><tbody><tr><td>1,8% de isoflurano</td><td>VetOne</td><td>13985-030-40</td><td></td></tr><tr><td>11-0 microssuturas de nylon</td><td>AROSuture</td><td>TK-117038</td><td></td></tr><tr><td>4-0 sutura monocryl</td><td>VWR</td><td>75982-084</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina SR</td><td>ZooPharm</td><td>MIF 900-006</td><td></td></tr><tr><td>Carprofeno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MFCD00079028</td><td></td></tr><tr><td>Clorexidina</td><td>VWR</td><td></td><td></td>IC19135805</tr><tr><td>Pinça de joalheiro</td><td>VWR</td><td>21909-458</td><td></td></tr><tr><td>Micro afastador Weitlaner</td><td>VWR</td><td>82030-146</td><td></td></tr><tr><td>Micro-tesoura</td><td>VWR</td><td>100492-348</td><td></td></tr><tr><td>Mini tesoura de tenotomia</td><td>VWR</td><td>89023-522</td><td></td></tr><tr><td>Lâmina de bisturi número 15</td><td>VWR</td><td>102097-834</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio cirúrgico</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gel para os olhos de petrolato</td><td>Pharmaderm</td><td>B002LUWBEK</td><td></td></tr><tr><td>Água estéril</td><td>VWR</td><td>89125-834</td><td></td></tr><tr><td>Adesivo tecidual</td><td>Vetbond,</td><td>3M NC9259532</td><td></td></tr><tr><td>Almofada condutora de água</td><td>Sistema de alívio de água</td><td>ARS2000B</td><td></td></tr><tr><td>Bupivacaína</td><td></td><td></td><td>Utilização como analgésico local</td></tr></tbody></table>

cirurgia do nervo facial no modelo de rato para estudar inibição e regeneração axonal

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

Este protocolo descreve métodos consistentes e reprodutíveis para estudar a regeneração e inibição axonal em um modelo de lesão do nervo facial de rato. O nervo facial pode ser manipulado ao longo de toda a sua extensão, desde seu segmento intracraniano até seu curso extratemporal. Existem três tipos primários de lesão nervosa utilizados para o estudo experimental de propriedades regenerativas: esmagamento nervoso, transsecção e abertura nervosa. A gama de possíveis intervenções é vasta, incluindo manipulação cirúrgica do nervo, parto de reagentes neuroativos ou células, e manipulações centrais ou de órgãos finais. As vantagens deste modelo para estudar a regeneração nervosa incluem simplicidade, reprodutibilidade, consistência entre espécies, taxas de sobrevivência confiáveis do rato e um tamanho anatômico aumentado em relação aos modelos murina. Suas limitações envolvem uma manipulação genética mais limitada versus o modelo do rato e a capacidade regenerativa superlativa do rato, de modo que o cientista do nervo facial deve avaliar cuidadosamente os pontos de tempo para recuperação e se traduzir resultados para animais superiores e estudos humanos. O modelo de rato para lesão do nervo facial permite parâmetros funcionais, eletrofisiológicos e histomorfométricos para a interpretação e comparação da regeneração nervosa. Assim, possui um enorme potencial para promover a compreensão e o tratamento das consequências devastadoras da lesão do nervo facial em pacientes humanos.

Após o procedimento cirúrgico inicial, existem dois tipos principais de medidas de desfecho: medidas seriais no animal vivo e medidas que requerem sacrifício do animal. Exemplos de medidas seriais incluem ensaios eletrofisiológicos, como uma medição potencial de ação muscular composta30, avaliações do movimento muscular facial através de laser assistido ou videografia significa9, ou mesmo imagens ao vivo repetitivas de recrescimento do nervo...

Este protocolo descreve uma abordagem reprodutível para a cirurgia do nervo facial no modelo de rato, incluindo descrições de vários padrões induziveis de lesão.

Cirurgia do nervo facial no modelo de rato para estudar inibição e regeneração axonal

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...

Este protocolo pode ajudar os cientistas a estudar os resultados após lesões no nervo facial e métodos para melhorar a regeneração em muitos parâmetros diferentes. A principal vantagem dessa técnica é que a anatomia de ratos permite fácil acesso ao nervo facial, e sua grande escala nos permite estudar todos os padrões de lesões relevantes. As aplicações desta técnica se estendem para a reabilitação dos pacientes após lesão do nervo facial.Como potencial regenerativo, o rato fornece um modelo experimental reprodutível e conciso. E este método pode fornecer insights sobre terapias cirúrgicas e médicas para parese de nervos faciais ou paralisia. E é traduzível para outros modelos de cabeça e pescoço ou outros nervos periféricos.Operar sob um microscópio usando ambas as mãos pode ser um desafio. Recomendo praticar usando a versão binóculo sob o microscópio antes de tentar uma dissecção do nervo facial. Após confirmar a falta de resposta ao aperto do dedo do pé, aplique pomada nos olhos do rato e raspe a área cirúrgica.Estabeleça um método para identificação de ratos e coloque um rolo de gaze sob o pescoço. Desinfete a pele exposta com três clorexidinas alternadas e 70% de etanol e coloque o rato sob um microscópio estéreo. Manipule o ouvido ipsilateral em uma direção anterior-posterior para determinar a dobra natural da pele pós-uricular.Use uma lâmina número 15 para fazer uma incisão de dois a três milímetros no vinco pós-auricular. O planejamento e a colocação da incisão são os passos mais críticos para garantir a identificação confiável do nervo facial, minimizando o tamanho da ferida. Disseca sem rodeios através da fáscia subcutânea imediata e coloque um retrátil micro-Weitlaner para aumentar a exposição ao tecido.Identifique o músculo digastric anterior enquanto ele viaja em uma direção inferior a superior em direção à sua inserção ao longo da base do crânio. Espalhe suavemente pela barriga muscular ao longo do ponto de inserção muscular para revelar o tendão da barriga digastrica anterior. O tendão aparecerá como um processo branco filmado emanando do músculo com uma inserção sólida na base do crânio.Após a identificação do músculo digastric anterior e seu tendão, ajuste o retrátil weitlaner para retrair ainda mais a barriga muscular. A região exposta é o espaço tridimensional no qual está o tronco principal do nervo facial. Dissecar ao longo do nervo em uma direção inferior distally a partir da saída do foramen estilomastoide.Para induzir um padrão de lesão de esmagamento, use fórceps de joalheiro de superfície lisa para agarrar firmemente e comprimir o nervo aplicando pressão constante e reprodutível por 30 segundos para garantir uma lesão de esmagamento apropriada. Para uma simples transeção, segure o epineurium imediato sobredilhando o nervo com fórceps de dentes finos, e use microscissores afiados para transectar o nervo de forma limpa no ponto desejado com um único corte. Para um modelo de lacuna nervosa, use pinças ajustáveis para definir o comprimento da lacuna nervosa desejada para garantir padrões de lesão semelhantes entre os animais e transectar o nervo como apenas demonstrado.Após a ção experimental, irrigar a ferida com soro fisiológico e secar o tecido com gaze estéril. antes de fechar a incisão da pele de acordo com as diretrizes institucionais. Aqui, imagens ao vivo do tronco principal do nervo facial com uma lesão de esmagamento aproximadamente dois a três milímetros distal até o ponto de ramificação do primeiro PES em um rato adulto transgênico Thy1-GFP é mostrado.A avaliação do retorno gradual da fluorescência em uma, duas, três e quatro semanas após a lesão pode ser usada como marcador para monitorar a regeneração nervosa nesses animais transgênicos. A análise histomorfométrica pode ser usada para obter imagens transversais da divisão mandibular marginal permitindo quantificação do diâmetro axonal, quantidade de detritos, fibra nervosa, porcentagem de medidas nervosas e de densidade. É importante ajustar frequentemente a colocação do retrátil conforme necessário para garantir que os nervos anatômicos relevantes sejam visíveis ao identificar o nervo facial.Após este procedimento, os nervos e músculos relevantes podem ser colhidos para análise imunohistoquímica para avaliar o grau de regeneração em relação a outros grupos experimentais. Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para os pesquisadores no estudo dos desfechos funcionais após lesão do nervo facial. Especificamente, como realizar o fenômeno da sintetização.

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Este vídeo demonstra um protocolo cirúrgico em um modelo de rato, detalhando as etapas desde a preparação da anestesia até a indução da lesão do nervo facial. Este protocolo é útil para estudar a regeneração nervosa e técnicas cirúrgicas em pesquisas médicas.

Induzindo uma lesão do nervo facial em um modelo de rato

Este vídeo demonstra a indução de dor neuropática orofacial em um modelo de rato pela ligação do nervo infraorbital. Isso resulta em danos e inflamação nos nervos, causando sinalização anormal da dor e mimetizando condições de dor crônica, que podem ser usadas para estudar o ensaio de dor orofacial.

Induzindo dor neuropática orofacial em um modelo de rato por meio de ligaduras nervosas infraorbitais

Fonte: Deseure, K., et al. Lesão por Constrição Crônica do Nervo Infraorbital do Rato (IoN-CCI) para Estudo da Dor Neuropática do Trigêmeo. J. Vis. Exp. (2015). Este vídeo demonstra um método para induzir dor neuropática em um modelo de rato por meio da constrição do nervo infraorbital. Depois de expor o nervo infraorbital e amarrar ligaduras para contraí-lo, a resposta imune no local da lesão aumenta a excitabilidade dos neurônios vizinhos, que transmitem sinais de dor ao cérebro.

Indução de dor neuropática em um modelo de rato por constrição do nervo infraorbital

Fonte: Olmstead, D. N., et al., Axotomia do nervo facial em camundongos: um modelo para estudar a resposta do motoneurônio à lesão. J. Vis. Exp. (2015). Este vídeo demonstra o procedimento de esmagamento do nervo facial em um camundongo, onde a dissecção contundente através de pontos de referência importantes expõe o tronco do nervo facial no forame estilomastóideo. As pinças são então usadas para comprimir o tronco nervoso, induzindo danos axonais e interrompendo a transmissão do sinal...

Realizando a axotomia de esmagamento no nervo facial em um modelo de camundongo

Fonte: Cheah, M., et al. Injeção do gânglio da raiz dorsal e lesão por esmagamento da raiz dorsal como modelo para regeneração sensorial do axônio. J. Vis. Exp. (2017). Este vídeo demonstra um procedimento passo a passo para injetar uma suspensão viral nos gânglios da raiz dorsal (DRGs) e induzir uma lesão axonal controlada por meio de um esmagamento da raiz dorsal em um rato anestesiado. O protocolo envolve a exposição dos DRGs, a entrega de um vetor viral promotor de crescimento para...

Modelagem da regeneração sensorial do axônio em um rato usando injeção do gânglio da raiz dorsal e lesão por esmagamento da raiz dorsal

Células olfativas ensheathing (OECO) são células da crista neural que permitem o crescimento dos neurônios olfativos primários. Esta propriedade específica pode ser utilizado para transplantação celular. Apresentamos aqui um modelo de transplante celular baseado na utilização de OECs em um modelo de lesão do nervo laríngeo.

Transplante de células olfativas Ensheathing para avaliar a recuperação funcional após a lesão do nervo periférico

Apresentamos um protocolo cirúrgico detalhando como realizar uma axotomia de corte ou esmagamento no nervo facial do camundongo. A axotomia do nervo facial pode ser empregada para estudar a resposta fisiológica à lesão nervosa e testar técnicas terapêuticas.

Axotomia do nervo facial em ratos: um modelo para estudo de resposta motoneuron para Injury

Este protocolo apresenta o uso de uma injeção de gânglio da raiz dorsal (DRG) com um vetor viral e uma lesão concomitante por esmagamento da raiz dorsal em um rato adulto como modelo para estudar a regeneração sensorial do axônio. Este modelo é adequado para investigar o uso da terapia gênica para promover a regeneração sensorial do axônio.

Dorsal Root Injection gânglio da raiz dorsal e lesão por esmagamento como um modelo para Sensorial Axon Regeneração

Aqui, apresentamos um protocolo que combina eletroporação in vivo e desnervação do músculo levantador do auro longo do crânio (LAL). Este procedimento permite o estudo do papel potencial das proteínas derivadas do músculo na regeneração da sinapse neuromuscular.

Eletroporação In Vivo Combinada e Reinervação de Curto Prazo do Músculo Esquelético do Elevador do Crânio Longo do Auris

Este protocolo mostra como retrogradamente rótulo células ganglionares da retina, e como posteriormente fazer uma lesão por esmagamento do nervo óptico, a fim de analisar a sobrevivência das células ganglionares da retina e apoptose. É um modelo de doença experimental para diferentes tipos de neuropatia óptica, incluindo glaucoma.

Nervo Óptico um modelo murino de lesão por esmagamento Estudo de Sobrevivência de células da retina Gânglio

Aprenda técnicas cirúrgicas do nervo facial em modelo de rato para estudar regeneração axonal e avaliar terapias para paralisia facial. Este método permite análise histomorfométrica e imagem em vivo da recuperação neural.

Cirurgia do nervo facial no modelo de rato para estudar inibição e regeneração axonal

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