Name: Medindo níveis de stress biofísicos e psicológicos após visitação a três locais com diferentes níveis de natureza (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 33 s
Description: Aprenda a medir níveis de stress biofísicos e psicológicos após visitação a ambientes naturais. Este método utiliza amostras de saliva para analisar cortisol e α-amilase, complementando questionários de autoavaliação.

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Este estudo foi financiado em parte através do programa de subsídio de pesquisa da faculdade (FRGP) patrocinado pela escola de saúde pública da Universidade de Indiana, Bloomington, IN. Os autores gostariam de agradecer a Dr. Alison Voight e Melissa Page por sua assistência editorial e comentários construtivos.

Este estudo segue as políticas e diretrizes do programa de proteção de pesquisa humana do Conselho de revisão institucional da Universidade de Indiana.
1. seleção de localização
<ol><li>Selecione o número de sites (n) com base em diferentes níveis de natureza. Nota: escolhemos três sites para o nosso trabalho. Usando um continuum baseado em níveis de "naturalidade", o site A foi considerado o mais natural e é composto por cerca de 1.200 hectares de cumes arborizadas que fazem fronteira com um lago e situado dentro de uma floresta decídua. As atividades mais comuns incluem caminhadas e observação da vida selvagem. O site B foi um parque municipal de 33 hectares com caminhos pedestres, lugares para encontros, playgrounds e espaço aberto para atividades recreativas. O local C era uma instalação urbana, interna do exercício com o mais baixo nível de naturalidade. Todos os três locais estão na proximidade relativamente próxima a uma cidade de tamanho médio (população estimada de 46.000 pessoas) no centro-oeste dos Estados Unidos.</li>
</ol>2. triagem e preparação dos participantes
<ol><li>Recrutamento participante completo antes que os sujeitos participem de experiências recreativas. Nota: para os sites A e B, os sujeitos foram abordados pelo pesquisador no estacionamento da entrada do parque. Para o site C, os assuntos foram abordados na recepção da instalação de exercício indoor. Para controlar as diferenças no tipo de atividade, os assuntos recrutados para ambos os sites A e B foram predominantemente caminhadas, enquanto que para o site C a atividade principal estava em execução ou andando na pista indoor.</li>
	<li>Durante o recrutamento, lembre os sujeitos a cumprirem as diretrizes relacionadas à coleta de amostras de cortisol salivar. Eles não devem comer ou beber 10 min antes de fornecer amostras de saliva. Nota: deve-se notar que, neste caso, as amostras de saliva não foram normalizadas para volume ou diluição (concentração)-ou seja, se os participantes foram adequadamente hidratados e/ou fizeram mudança de hidratação entre as coletas amostrais.</li>
	<li>Dê braçadeiras vermelhas (ou vestuário equivalentemente perceptível) para cada participante para permitir a identificação fácil quando emergir no final de seus engajamentos.</li>
	<li>Atribua uma alocação de tempo de 30-40 min para que todos os assuntos entre os três sites passem um período de tempo semelhante em cada site. Exclua assuntos que gastam substancialmente mais ou menos tempo do que o restante da amostra.</li>
	<li>Mantenha o tipo de atividade engajado consistente. Nota: neste caso, a actividade "Medium" foi caminhar ou fazer caminhadas. Foram excluídos da amostra indivíduos que exerçam atividades substancialmente diferentes de caminhada ou caminhada. Por exemplo, os indivíduos que estavam pescando, picnicking, ou levantamento de peso não foram incluídos nas amostras respectivas.</li>
</ol>3. condições e desenho experimental
<ol><li>Use um projeto Quasi-experimental do pre-teste/borne-teste.</li>
	<li>Depois de identificar os sujeitos e ao concordar em participar, peça a cada sujeito que leia e assine um formulário do IRB explicando a natureza voluntária, o propósito e os procedimentos do estudo.</li>
	<li>Após este processo, dar aos sujeitos uma peça de roupa (por exemplo, braçadeira vermelha) para a identificação futura e obter medidas fisiológicas e psicológicas dos níveis de stress (ou seja, PSQ, 1-2 ml de saliva que é cuspir ou babou em um tubo de ensaio). Colete amostras do final da tarde para o início da noite. Nota: estes dados foram coletados por pesquisadores ambos 1) pouco antes de os sujeitos entraram no site e 2) imediatamente após o término da visitação para o site.</li>
</ol>4. amostras de saliva
<ol><li>Para evitar a diluição da amostra, peça aos sujeitos que não comam, bebam ou enxaguem as bocas 10 min antes de fornecer amostras de saliva.</li>
	<li>Peça aos sujeitos que forneçam amostras de saliva de 1-2 mL (excluindo espuma) pouco antes da experiência recreativa e imediatamente após a conclusão da experiência.</li>
	<li>Colete amostras de saliva usando um método de babar passivo:<ol>
<li>Forneça aos indivíduos um 2 na palha bebendo plástica para babar em um CryoVial de 2 ml (veja a tabela de materiais).</li>
		<li>Instruir os sujeitos a permitir que a saliva para a piscina em suas bocas, em seguida, Baba para baixo a palha e no CryoVial. De acordo com a coleta de saliva e conselhos de manuseio (2011), 1 mL (excluindo espuma) é adequado para a maioria dos testes.</li>
		<li>As amostras de rótulos com um número de identificação de 3 dígitos atribuído (ou seja, 001) e uma letra para indicar o tempo de coleta de dados (ou seja, A representa o pré-teste, B representa o pós-teste; onde 001A representa a amostra de saliva fornecida pelo participante 001 antes de conduzir o experiência recreativa).</li>
		<li>Depois que a amostra é recolhida e etiquetada, deve então ser armazenada congelada temporariamente em uma caixa esteróide da espuma completamente do gelo seco para não mais do que 2 h.</li>
		<li>Transportar as amostras marcadas para um laboratório e armazenar a-80 ° c até ser analisado.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. quantificação da α-amilase
Nota: neste ensaio, α-amilase hidrolisa 2-chloro-p-Nitrophenyl-α-d-maltotrioside para 2-chloro-nitrophenol e formas de glicose, 2-chloro-p-Nitrophenyl-α-d-maltoside, maltotriose, e glicose. A reação é monitorada em uma absorbância de 405 nm, o que corresponde à atividade da α-amilase na amostra. Este ensaio demonstra linearidade entre 0 e 2000 U/L.
<ol><li>
Materiais
	<ol>
<li>Utilizou um conjunto de reagentes de amilase líquida (ver tabela de materiais) para quantificar a α-amilase em amostras de saliva. Todos os reagentes são fornecidos como líquidos prontos para uso e armazenados a 0-4 ° c.</li>
		<li>Utilize um leitor de vários modos (ver tabela de materiais) capaz de ler uma densidade óptica a 405 nm com uma temperatura controlada para 37 ° c durante o ensaio.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Análise
	<ol>
<li>Descongele as amostras no gelo antes da análise.</li>
		<li>Diluir amostras 1:10 com 1X PBS (10 μL de saliva + 90 μL de PBS).</li>
		<li>Analise cada amostra em duplicado.</li>
		<li>Equilibrar o reagente de amilase a 20-25 ° c durante pelo menos 30 min.</li>
		<li>Adicionar 0,1 mL de reagente de amilase a uma microplaca de poço de 96 para cada amostra.</li>
		<li>Pré-incubar a microplaca a 37 ° c durante um mínimo de 5 min.</li>
		<li>Adicionar 2,5 μL da amostra ao reagente de amilase.</li>
		<li>Faça uma leitura inicial após 60 s.</li>
		<li>Continue as leituras a cada 60 s por um adicional de 2 min.</li>
		<li>Calcule a diferença média de absorbância por minuto (Δabs/min).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Cálculo
	<ol>
<li>Para calcular a atividade da amilase, use a seguinte fórmula: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59272/59272eq1.jpg"> Onde ΔABS/min = alterações na diferença de absorvância por minuto; TV = volume total do ensaio (0,1025 ml); * 1000 = conversão de U/mL para U/L; MMA = absorptividade milimolar de 2-cloro-p-nitrofenol = 12,9; SV = volume amostral (0, 25 ml); e LP = caminho de luz (1 cm). Substituindo dá: <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/59272/59272eq2.jpg"> Portanto, multiplicar o Δabs/min por 3178x o fator de diluição (10) para obter amilase em U/L.</li>
		<li>Para amostras acima de 2000 U/L (linearidade do ensaio) diluir ainda mais (pelo menos 2x usando PBS) e re-ensaio, em seguida, multiplicar o resultado da α-amilase pelo fator de diluição adicional.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. quantificação do cortisol
Nota: neste ensaio, o cortisol livre é quantificado na saliva usando uma curva padrão de cortisol. Os padrões e as amostras diluídas são adicionados a uma placa do de microtitulação que seja pre-Coated com um anticorpo. Um conjugado da cortisol-peroxidase é adicionado aos poços, seguido pela adição de um anticorpo monoclonal ao cortisol. A quantidade de ligação de cortisol/peroxidase conjugada diminui à medida que a concentração de cortisol na amostra aumenta.
<ol><li>
Materiais
	<ol>
<li>Use um kit de imunoensaio de enzima cortisol (ver tabela de materiais) para quantificar o cortisol em amostras de saliva. Todos os reagentes necessários para realizar este ensaio estão incluídos no kit. Todos os componentes do kit são armazenados a 0-4 ° c antes de chegarem à data de expiração.</li>
		<li>Use um espectrofotômetro capaz de ler uma densidade óptica (OD) em 450 nm (ver tabela de materiais), bem como software capaz de usar gravações od do leitor de placa para executar quatro parâmetros de curva logística (4 PLC) encaixe.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparação do reagente
	<ol>
<li>Permitir que todos os reagentes equilibrem a 20-25 ° c durante um mínimo de 30 min.</li>
		<li>Diluir o tampão de ensaio de cortisol 1:5 utilizando água desionizada.</li>
		<li>Diluir o tampão de lavagem 1:20 utilizando água desionizada. Nota: os tampões do ensaio e da lavagem são estáveis por 3 meses quando armazenados em 0-4 ° c.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparação da amostra
	<ol>
<li>Descongele as amostras no gelo antes da análise.</li>
		<li>Diluir amostras 1:10 com tampão de ensaio de cortisol (20 μL de saliva + 180 μL de tampão) e utilizar dentro de 2 h de preparação.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Elaboração de normas
	<ol>
<li>Tubos de ensaio de vidro da etiqueta #1-#7.</li>
		<li>Pipet 225 μL de tampão de ensaio no tubo #1 e 125 μL de tampão em tubos #2-#7.</li>
		<li>Adicione 25 μL da solução do estoque do cortisol ao tubo #1 e ao vortex.</li>
		<li>Remover 125 μL de tampão do tubo #1 e adicioná-lo ao tubo #2, em seguida, vortex.</li>
		<li>Repita as diluições seriais para tubos #3-#7. Nota: as concentrações finais de cortisol de cada norma são mostradas na tabela 1.</li>
		<li>As normas devem ser utilizadas dentro de 2 h de preparação.</li>
	</ol>
</li>
</ol><table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>Padrão</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
			<td>#7</td>
		</tr>
<tr>
<td>Volume do tampão do ensaio (μL)</td>
			<td>225</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
		</tr>
<tr>
<td>Adição</td>
			<td>Estoque STD</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
		</tr>
<tr>
<td>Volume de adição (μL)</td>
			<td>25</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
		</tr>
<tr>
<td>Concentração final (pg/mL)</td>
			<td>3200</td>
			<td>1600</td>
			<td>800</td>
			<td>400</td>
			<td>200</td>
			<td>100</td>
			<td>50</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabela 1: tabela de preparação da curva padrão.
<ol start="5"><li>
Análise
	<ol>
<li>Use o layout da placa abaixo na Figura 1 como um guia para configurar a microplaca.</li>
		<li>Recomenda-se a utilização de uma pipeta multicanal para adição de reagentes.</li>
		<li>Adicionar 50 μL de amostras ou normas no número adequado de poços na chapa. Amostras e padrões devem ser executados em duplicado.</li>
		<li>Adicione o buffer de ensaio (75 μL) nos poços de ligação não específica (NSB).</li>
		<li>Adicione o tampão de ensaio (50 μL) nos poços de ligação máxima (B0) e nos poços padrão zero (em branco).</li>
		<li>Adicionar 25 μL do conjugado de cortisol a cada poço.</li>
		<li>Adicione 25 μL do anticorpo do cortisol a cada poço, à exceção dos poços de NSB.</li>
		<li>Bata suavemente o lado da placa para misturar os reagentes.</li>
		<li>Cubra com o aferidor da placa e agitar à temperatura ambiente (RT) a 20-25 ° c por 1 h.</li>
		<li>Retire o conteúdo do poço e enxague cada um bem 4x com tampão de lavagem (300 μL). Bata a placa para secar em toalhas absorventes entre laves.</li>
		<li>Adicione o substrato TMB a cada poço (100 μL).</li>
		<li>Incubar a placa a 20-25 ° c durante 30 min sem agitação.</li>
		<li>Adicione a solução de paragem a cada poço (50 μL).</li>
		<li>Leia a densidade óptica em cada poço da microplaca em 450 nm.</li>
		<li>Média das densidades ópticas para cada padrão, em seguida, amostra e subtrair a densidade óptica média para os poços NSB.</li>
		<li>Calcule o% Bound (B/B0) para todas as amostras usando controles de ligação máxima (B0).</li>
		<li>Crie uma curva padrão usando software capaz de ajuste de curva de regressão logística de quatro parâmetros, calculado a partir da curva% B/B0.</li>
		<li>Multiplicar o resultado pelo fator de diluição (10) para obter valores de cortisol em pg/mL.</li>
		<li>As amostras com densidades ópticas que caem acima do padrão o mais elevado devem mais ser diluídas com amortecedor do ensaio e re-analisado, a seguir o resultado deve ser multiplicado pelo fator adicional da diluição.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59272/59272fig1.jpg"> Figura 1 : Layout da placa de exemplo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59272/59272fig1large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
7. medição psicológica (questionário de stress percebido)
<ol><li>Medir os níveis psicológicos dos sujeitos que utilizam o PSQ publicado por Fliege et al.13, que inclui quatro fatores (preocupação, tensão, tensão, alegria) e utiliza 20 itens.</li>
	<li>Peça ao sujeito que preencha o PSQ pouco antes de sua experiência recreativa e imediatamente após a conclusão da experiência.</li>
	<li>Marque questionários com um número de identificação de 3 dígitos idêntico ao nível de estresse biophysiológico de cada sujeito.</li>
</ol>

<ol><li>Hansmann, R., Hug, S., Seeland, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+and+stress+relief+through+physical+activities+in+forests+and+parks%5BTitle%5D)+AND+%22Urban+Forestry+and+Urban+Greening%22%5BJournal%5D)">Restoration and stress relief through physical activities in forests and parks.</a> Urban Forestry and Urban Greening. 6, 213-225 (2007).</li>
<li>Krantz, D. S., McCeney, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+psychological+and+social+factors+on+organic+disease%3A+A+critical+assessment+of+research+on+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of psychological and social factors on organic disease: A critical assessment of research on coronary heart disease.</a> Annual Review of Psychology. 53, 341-369 (2002).</li>
<li>Ward Thompson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+green+space+is+linked+to+less+stress+in+deprived+communities%3A+Evidence+from+salivary+cortisol+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Landscape+and+Urban+Planning%22%5BJournal%5D)">More green space is linked to less stress in deprived communities: Evidence from salivary cortisol patterns.</a> Landscape and Urban Planning. 105, 221-229 (2012).</li>
<li>Haluza, D., Schonbauer, R., Cervinka, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Green+perspectives+for+public+health%3A+A+narrative+on+the+physiological+effects+of+experiencing+outdoor+nature%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Green perspectives for public health: A narrative on the physiological effects of experiencing outdoor nature.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 11, 5445-5461 (2014).</li>
<li>Korpela, K. M., Ylen, M., Tyrväinen, L., Silvennomen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determinants+of+restorative+experiences+in+everyday+favorite+places%5BTitle%5D)+AND+%22Health+and+Place%22%5BJournal%5D)">Determinants of restorative experiences in everyday favorite places.</a> Health and Place. 14, 636-652 (2008).</li>
<li>Mantler, A., Logan, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+environments+and+mental+health%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Natural environments and mental health.</a> Advances in Integrative Medicine. 2, 5-12 (2015).</li>
<li>Mayer, F. S., McPherson-Frantz, C., Bruehlman-Senecal, E., Dolliver, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+is+nature+beneficial%3F+the+role+of+connectedness+to+nature%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Why is nature beneficial? the role of connectedness to nature.</a> Environment and Behavior. 41, 307-643 (2009).</li>
<li>Pretty, J., Peacock, J., Sellens, M., Griffin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mental+and+physical+health+outcomes+of+green+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environal+Health+Research%22%5BJournal%5D)">The mental and physical health outcomes of green exercise.</a> International Journal of Environal Health Research. 15, 319-337 (2005).</li>
<li>Ulrich, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+recovery+during+exposure+to+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Stress recovery during exposure to natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 11, 201-230 (1991).</li>
<li>Kaplan, S., Talbot, J. F. Psychological Benefits of a Wilderness Experience. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKaplan%2C+S+%22Behavior+and+the+Natural+Environment%22">Behavior and the Natural Environment</a>. Altman, I., Wohlwill, J. F. , Springer. Boston, MA. 163-203 (1983).</li>
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<li>Gidlow, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Where+to+put+your+best+foot+forward%3A+Psycho-physiological+responses+to+walking+in+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Where to put your best foot forward: Psycho-physiological responses to walking in natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 45, 22-29 (2016).</li>
<li>Ewert, A., Chang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levels+of+nature+and+stress+response%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Sciences%22%5BJournal%5D)">Levels of nature and stress response.</a> Behavioral Sciences. 8 (5), 49(2018).</li>
<li>Wyles, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+some+natural+environments+more+psychologically+beneficial+than+others%3F+The+importance+of+type+and+quality+on+connectedness+to+nature+and+psychological+restoration%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Are some natural environments more psychologically beneficial than others? The importance of type and quality on connectedness to nature and psychological restoration.</a> Environment and Behavior. 51 (2), 111-143 (2019).</li>
</ol>

Os autores não declaram conflitos de interesse.

O objetivo deste estudo é identificar potenciais mudanças no estresse por meio de instrumentos biofísicos e psicológicos após visitação recreativa para três diferentes configurações com diferentes níveis de natureza. Tanto o cortisol quanto a α-amilase demonstraram ser indicadores confiáveis de níveis de estresse psicológico. O procedimento do ensaio da amilase descrito neste estudo foi adaptado a um formato do poço 96. Quando os níveis de amilase na saliva são elevados, as mudanças de absorbância ocorrem rapidamente. Po...

Níveis elevados de estresse têm sido ligados a muitas condições de saúde graves, como doenças cardíacas, obesidade e distúrbios psicológicos1,2,3. Um crescente corpo de pesquisa sugere que a proximidade ou visitação a ambientes naturais, como parque e paisagens não desenvolvidas, pode ter um efeito notável no bem-estar psicológico e diminuição dos níveis de stress1,4, 5,6,7,8,9,10. Explicações para os efeitos das configurações naturais e níveis de estresse incluíram o seguinte: (1) as configurações naturais fornecem locais para a atividade física8,11 e (2) os visitantes de ambientes naturais têm a capacidade de se concentrar em mais processos de pensamento não-tarefa, levando assim a uma redução na fadiga de atenção12. Para determinar os efeitos da natureza na redução do estresse, este estudo utiliza um autorrelato de estresse psicológico (PSQ) e dois biomarcadores à base de saliva, cortisol e α-amilase, após visitação a três locais de recreação diferentes. Estes locais variam entre os seus níveis de "naturalidade" e incluem um cenário de natureza selvagem, Parque Municipal e instalações de fitness e recreação locais.
Este estudo tem como objetivo abordar as seguintes questões de pesquisa: (RQ1) existem diferenças nos níveis de estresse biofísico medidos por cortisol salivar e α-amilase quando comparados em todos os três sítios (isto é, natural, semi-natural, construído)? (RQ2) Existem diferenças nos níveis de estresse psicológico medidos pelo PSQ (manifestado por quatro construtos: demandas, preocupações, tensão e alegria) quando comparados em todos os três sítios (isto é, natural, semi-natural, construído)?

<table><tbody><tr><td>Kit de Imunoensaio Enzimático de Cortisol</td><td>DetectX</td><td>K003-H1</td><td>O kit de Imunoensaio Enzimático de Cortisol foi projetado para medir quantitativamente o cortisol presente em extratos fecais secos, saliva, urina, soro, plasma e amostras de meios de cultura.</td></tr><tr><td>Etiquetas criogênicas para armazenamento criogênico</td><td>Fisherbrand</td><td>5-910-A</td><td>Adesivo exclusivo resiste a temperaturas extremas</td></tr><tr><td>Conjunto de reagentes de amilase líquida (CNPG3)</td><td>Pointe Scientific</td><td>A7564</td><td>Para a determinação cinética quantitativa da atividade da &alfa;-amilase no soro humano.</td></tr><tr><td>Tubos de Polipropileno de Fundo Redondo 2mL com Tampa de Rosca Externa</td><td>Greiner Bio-One</td><td>07-000-257</td><td>2.0 ml U-BTM Cryo.s polipropileno autoportante esterilizado</td></tr><tr><td>Synergy Multi-Mode Microplate Reader</td><td>BioTek</td><td></td><td>É um leitor de microplacas de absorbância, fluorescência e luminescência de canal único que usa um design de óptica dupla para realizar medições de amostras em formato de microplaca.</td></tr></tbody></table>

medindo níveis de stress biofísicos e psicológicos após visitação a três locais com diferentes níveis de natureza

Measuring Biophysical and Psychological Stress Levels Following Visitation to Three Locations with Differing Levels of Nature

A visitação a ambientes naturais tem sido associada à redução do estresse psicológico. Embora a maioria das pesquisas relacionadas ao estresse dependesse de formatos de autorrelato, um número crescente de estudos agora incorpora hormônios e catalisadores biológicos relacionados ao estresse, como o cortisol e a α-amilase, para medir os níveis de estresse. Aqui apresentamos um protocolo para examinar os efeitos sobre os níveis de estresse biofísico e psicológico após visitação a três locais diferentes com níveis diferentes de natureza. Os níveis de estresse psicológico biofísico e autorrelatado são medidos imediatamente após a entrada dos locais selecionados e pouco antes dos visitantes saírem do local. Usando um método "drool", a medida biofísica consiste em 1-2 mL de amostras de saliva fornecidas por sujeitos do estudo após a entrada em um dos três locais de estudo. Conforme prescrito pela literatura existente, a saliva é coletada dentro de um período de 45 minutos após o término do engajamento do visitante no local. Após a coleta de saliva, as amostras são rotuladas e transportadas para um laboratório biológico. O cortisol é a variável Biofísica de interesse neste estudo e medido por meio de um processo ELISA com um leitor de placas TECAN. Para mensurar o estresse autorreferido, o questionário de estresse percebido (PSQ), que relata níveis de preocupação, tensão, alegria e demandas percebidas. Os dados são recolhidos em todos os três locais no final da tarde até o início da noite. Quando comparados em todas as três configurações, os níveis de estresse, medidos tanto pelos marcadores biológicos quanto pelos autorrelatos, são significativamente menores após a visitação até o cenário mais natural.

Descrição da amostra Utilizando uma técnica de amostragem de cotas, este estudo recrutou 35 visitantes de cada um dos três sítios. No total, 105 indivíduos foram recrutados neste estudo, incluindo 63 machos e 42 fêmeas. As idades médias dos visitantes recrutados em três locais diferentes foram de 25,9 anos (site A), 37,2 anos (site B) e 28,8 anos (site C). Também foram registradas as frequências de visitação dos sujeitos aos três sítios selecionados. Para o local A e o local C, a maioria dos assuntos ...

O objetivo deste trabalho é identificar mudanças nos níveis de estresse após a visitação em três diferentes configurações e descrever os métodos utilizados na identificação de níveis de estresse com base em medidas de cortisol salivar, α-amilase e um autorrelato psicológico Instrumento.

Medindo níveis de stress biofísicos e psicológicos após visitação a três locais com diferentes níveis de natureza

Visitation to natural environments has been linked to psychological stress reduction. Although most stress-related research has relied on self-report ...

Aqui apresentamos um protocolo, usado para examinar os efeitos sobre os níveis de estresse biofísico e psicológico após uma visitação a três locais com diferentes níveis de natureza. Estamos interessados em saber se um site com níveis mais altos de naturalidade será mais eficaz em ajudar os participantes a reduzir seus níveis de estresse. Além do uso do questionário de autorre relato, a principal vantagem do uso dessa técnica é que analisar os níveis de cortisol e amilase coletados das amostras de saliva dos participantes pode nos dar uma leitura mais precisa e uma melhor compreensão de como nosso corpo realmente responde após a visitação aos locais de recreação.Demonstrando o procedimento estará o Dr. Hocevar, professor da Universidade de Indiana. Comece se apresentando ao assunto. Fornecer-lhes um formulário de consentimento para assinar explicando a natureza voluntária, propósito e procedimentos do estudo.Dê ao sujeito uma braçadeira vermelha para identificação futura. Obtenha medidas fisiológicas e psicológicas dos níveis de estresse através de amostras de saliva, pouco antes da experiência recreativa, e imediatamente após a conclusão da experiência. Colete uma amostra de saliv

measuring-biophysical-psychological-stress-levels-following

Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Neste vídeo vamos descrever um método para avaliar a reação psicofisiológica pessoa ao estresse usando biofeedback. Nós também irá apresentar as diretrizes gerais para o planejamento de tratamento.

Avaliação do estresse psicofisiológico Usando Biofeedback

Este artigo descreve um protocolo para a indução de estresse psicológico nos participantes, o que permite aos pesquisadores para medir psicológicos, fisiológicos e respostas neuroendócrina ao estresse dentro de participantes individuais ou entre grupos.

O Trier Protocolo de teste de estresse social para induzir Estresse Psicológico

Um protocolo de estudo é apresentado sobre como avaliar as associações entre ouvir música e estresse psicobiológico (medido por níveis subjetivos de estresse, cortisol salivar e alfa-amilase salivar) na vida diária. São fornecidos conselhos sobre desenho do estudo, materiais, métodos, seleção de participantes e manuseio estatístico. Resultados representativos são apresentados e discutidos.

Avaliando os efeitos da música de escuta sobre Stress psicobiológica na Vida Diária

Aqui, apresentamos um protocolo que provocou reatividade do cortisol em uma amostra adolescente adolescente mexicana vulnerável utilizando uma versão modificada do Teste de Stress Social Trier (TSST). As amostras de saliva foram coletadas no início, 15, 30 e 45 min após o início do TSST. Pesquisas futuras poderiam utilizar este TSST modificado com jovens vulneráveis.

Um Teste de Stress Social Modificado de Trier para Vulneráveis ​​Mexicano-Adolescentes

O stress é um componente inevitável e persistente da vida e estão sendo consideradas abordagens holísticas para a sua gestão. Uma metodologia padronizada foi criada para demonstrar a viabilidade de um protocolo de gerenciamento de estresse baseado na respiração que pode ser usado com tecnologia portátil comercialmente disponível.

Um programa de gerenciamento de estresse baseado na Comunidade: Usando dispositivos Wearable para avaliar todo o corpo respostas fisiológicas em configurações não-laboratório

É proposto um protocolo para avaliar soluções baseadas em wearables de pulso commercial-off-the-shelf (COTS) para estimar o stress em estudantes. O protocolo é realizado em duas fases, um teste de indução de estresse de base laboratorial inicial e uma fase de monitoramento ocorrendo na sala de aula, enquanto o estudante está realizando atividades acadêmicas.

Avaliação de Wearables Commercial-Off-The-Shelf pulso para estimar o Stress em estudantes

Experiências de realidade virtual (VR) podem ser difícil de implementar e exige planejamento meticuloso. Este protocolo descreve um método para a concepção e implementação de experimentos VR que coletam dados fisiológicos de participantes humanos. Os experimentos no quadro de ambientes virtuais (EVA) é empregado para acelerar este processo.

Experiências de realidade virtual com medidas fisiológicas

Aqui, apresentamos um método misto original, combinando uma quantitativa e uma abordagem qualitativa para examinar com precisão as experiências dos participantes durante o teste de Stress Social de Trier e o teste de esforço Social de Trier para grupos.

Enactive abordagem fenomenológica para o teste de Stress Social Trier: ponto de vista métodos mistos

O presente protocolo introduz um aplicativo auto-desenvolvido não comercial para coletar dados em tempo real no local, incluindo escalas psicológicas, localização GPS, frequência cardíaca e nível de saturação de oxigênio no sangue, bem como os procedimentos operacionais do aplicativo. Um estudo empírico realizado em Taiwan em 2020 foi usado como exemplo de aplicação.

Um aplicativo para emparelhamento com dispositivos vestíveis para monitorar o status de saúde pessoal

Aqui, apresentamos um protocolo para investigar os efeitos de exposições imersivas em realidade virtual 360 graus na natureza sobre o humor e a incorporação. Os participantes experimentam ambientes florestais e marinhos em posturas sentadas e em pé, com avaliações que utilizam escalas padronizadas para avaliar os resultados terapêuticos das intervenções de saúde mental.

Terapia da Natureza em VR: Incorporação e Regulação Emocional por Ambientes Virtuais Imersivos

Aprenda a medir níveis de stress biofísicos e psicológicos após visitação a ambientes naturais. Este método utiliza amostras de saliva para analisar cortisol e α-amilase, complementando questionários de autoavaliação.

Medindo níveis de stress biofísicos e psicológicos após visitação a três locais com diferentes níveis de natureza

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