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Isolação e mancha de keratinocytes da pele do rato para a análise específica do ciclo de pilha da...
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JoVE Journal Developmental Biology
Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Isolação e mancha de keratinocytes da pele do rato para a análise específica do ciclo de pilha da expressão celular da proteína pela citometria maciça

Full Text
8,123 Views
12:34 min
May 9, 2019

DOI: 10.3791/59353-v

Josiah Fernandez1, Enrique C Torchia1

1Department of Dermatology and Charles C. Gates Center for Regenerative Medicine,University of Colorado Anschutz Medical Campus

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo descreve como isolar os queratinócitos da pele dos modelos do rato, manchar com os anticorpos metal-etiquetados, e analisar pilhas manchadas pela citometria maciça a fim examinar o teste padrão da expressão das proteínas do interesse nas fases diferentes do ciclo de pilha.

Este protocolo é significativo por duas razões principais. Número um, permite que o usuário seja capaz de determinar os estados do ciclo celular das células da pele que foram isoladas de um modelo animal. Também nos permite ser capazes de analisar a expressão proteica nas fases discretas do ciclo celular.

Em comparação com os métodos anteriores de determinação da proliferação celular, nosso método permite uma determinação mais precisa das diferentes fases do ciclo celular, e também podemos analisar mais de 40 marcadores diferentes nos vários estágios da divisão celular. Isso melhora muito a aplicação e versatilidade do método. Este protocolo pode ser usado em pesquisas sobre câncer e em qualquer outro tipo de doença onde há a necessidade de determinar padrões específicos de expressão de proteínas do ciclo celular.

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