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DOI: 10.3791/59437-v
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Este trabalho descreve dois métodos para quantificar as respostas de defesa em Arabidopsis Arabidopsis thaliana após a exposição aos elicitors imunes: o estouro oxidativo transiente, e a inibição do crescimento de plântulas.
Estes ensaios podem ser usados para avaliar e comparar saídas imunológicas de diferentes genótipos vegetais. A principal vantagem dessas técnicas é que elas são rápidas, confiáveis e usam equipamentos de laboratório comuns. Para o ensaio de inibição do crescimento, as mudas do mesmo tamanho e idade devem ser transplantadas e totalmente borradas secas antes de pesar para limitar a variação.
Em quatro a cinco semanas após a germinação, use um soco de biópsia de quatro milímetros para remover um disco de folha por planta arabidopse, evitando a midveina e tomando cuidado para limitar a ferida. Colete os discos em poços individuais de uma placa luminômetro nãoutilada contendo 100 microliters de água duplamente destilada por poço, lado adaxial para cima, para evitar a dessecação. Se avaliar vários elicitors, remova um segundo disco de folha da mesma folha para cada tratamento elicitor e cubra a placa com a tampa para permitir que os discos da folha se recuperem durante a noite à temperatura ambiente.
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