Name: Modelo murino de estenose venosa central usando fístula Aortocaval com estenose de saída (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: Aprenda a criar um modelo murino de estenose venosa central usando fístula aortocaval com estenose de saída. Esta técnica reproduz o curso clínico da fístula arteriovenosa humana para estudar falhas de maturação.

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Este trabalho foi apoiado pelo Instituto Nacional de saúde dos EUA (NIH) Grant R01-HL128406; o departamento de Estados Unidos da Veterans Affairs laboratório biomédico pesquisa e desenvolvimento programa mérito Review Award I01-BX002336; bem como com os recursos e o uso de instalações no VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

Todos os experimentos foram realizados com a aprovação do Comitê institucional de cuidados e uso de animais da Universidade de Yale (IACUC).
1. anestesia e procedimentos pré-operatórios
<ol><li>Esterilizar todos os instrumentos cirúrgicos e materiais por autoclavagem. Ligue o dispositivo de suporte térmico para ter a certeza de que está quente (40 – 42 ° c).</li>
	<li>Coloc um rato velho de 9-11-Week C57Bl/6 em uma câmara acrílica da indução e anestesiá-la com o isoflurano vaporizado de 2,5% e o oxigênio de 0,8 L/min. A indução anestésica demora cerca de 3 min.</li>
	<li>Retire o rato da câmara. Confirme um plano profundo da anestesia por uma pitada do dedo do pé, por uma pitada da orelha e por uma pitada da cauda. Coloque o mouse em posição supina na área cirúrgica e entregar 2,5% isoflurano usando máscara de silicone. Fornecer buprenorfina em 0,1 mg/kg analgésico e aplicar pomada oftálmicas aos olhos.</li>
	<li>Retire a pele do lado ventral do pescoço para o abdômen inferior usando Nair, um removedor de pêlos.</li>
	<li>Limpe e desinfete o local cirúrgico usando uma esfoliação em duas etapas com 10% de iodo-povidona e 70% de isopropanol. Aplique um drapejar cirúrgico.</li>
</ol>2. procedimentos operativos
<ol><li>
Exposição dos locais da braçadeira e da punctura
	<ol>
<li>Prepare instrumentos estéreis e use luvas estéreis para manter a esterilidade durante toda a cirurgia.</li>
		<li>Faça uma incisão abdominal profunda na pele com um bisturi a partir do nível da borda inferior do fígado para um pouco acima do púis. Corte através da musculatura com tesouras para abrir a cavidade abdominal.</li>
		<li>Insira um retractor no abdômen e puxe as entranhas para o lado direito. Mantenha-os húmidos envolvendo uma gaze salina encharcada. Retreive a bexiga e as vesículas seminais (em camundongos machos) e retirá-los para o lado caudal. Dissecar o mesentério entre o reto e o retroperitoneum com um suporte da micro-agulha para obter uma vista completa da aorta e do IVC.</li>
		<li>Dissecar a aorta infra-renal e o bloco do en de IVC dos tecidos retroperitoneal circunvizinhos laterais e dorsais com um suporte da micro-agulha para cruzá-los junto.</li>
		<li>Dissecar os tecidos circundantes para expor o local da punção aórtica em aproximadamente três quartos da distância da veia renal esquerda até a bifurcação aórtica.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Dissecção de IVC
	<ol>
<li>Dissecar entre o IVC infra-renal e a aorta imediatamente longe do ponto de origem à veia renal esquerda. Estender a dissecção distalmente ao meio caminho entre a veia renal esquerda e a bifurcação aórtica, de modo que o IVC infra-renal, ascendente e a jusante ao stenosis, possa ser observado postoperatively. Nota: a dissecção contundente entre o IVC e a aorta deve ser realizada de imediato distal à veia renal esquerda, onde o tecido conjuntivo entre o IVC e a aorta é relativamente solto.</li>
		<li>Faça uma janela para separar o IVC da aorta a esse nível e dissecar o IVC do tecido circundante. Coloque um 8-0 sutura do monofilamento da poliamida primeiramente abaixo do IVC e da aorta (Figura 1a), a seguir Posicione a sutura abaixo somente do IVC (Figura 1b) puxando a extremidade da sutura através da janela. Nota: uma vez que o IVC é frágil, a dissecação ao longo da adventícia aórtica é útil para fazer uma janela para impedir que o IVC, bem como pequenas IVC ou ramos aórticos de ser danificado. Se ocorrer sangramento, é provável que seja incontrolável. Se o IVC tem filiais laterais distintas, coloque um 8-0 sutura distalmente aos ramos.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Criação de AVF
	<ol>
<li>Dobre uma agulha de 25 G para um ângulo de 45 – 60 ° em um ponto ~ 4 mm da ponta da agulha.</li>
		<li>Prenda a aorta infra-renal e o IVC aplicando um grampo microsurgical.</li>
		<li>Gire a aorta medialmente e caudalmente agarrando o tecido conjuntivo em torno da bifurcação para expor o local de punção da aorta esticou-o ligeiramente para o lado ventral.</li>
		<li>Segurando a aorta em uma posição apropriada, perfure através da aorta no IVC usando a agulha preparada de 25 G (Figura 1C).</li>
		<li>Libere a aorta e cubra o local da punção com o tecido circundante puxando do lado esquerdo da aorta. Retire a agulha e pressione o local da punção suavemente usando um cotonete com ponta de algodão para hemostasia.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Criação da estenose do IVC
	<ol>
<li>Coloque uma ponta de um cateter de 22 G IV (veja a tabela de materiais) no IVC longitudinalmente. Ligate o cateter IV e o IVC junto com um 8-0 sutura (Figura 1D) e, em seguida, retire o cateter IV.</li>
		<li>Confirme a hemostasia primária (Figura 1e) e depois Desaperte a aorta e o IVC. Cubra o local da punctura 1 minuto mais para assegurar o hemostasis. Nota: não prenda por muito tempo para evitar trombose de VCI distal à estenose.</li>
		<li>Retorne órgãos a suas posições originais e feche o abdômen com 6-0 suturas.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. procedimentos pós-operatórios
<ol><li>Após o fechamento da ferida abdominal, interrompa a inalação de isoflurano. Põr o rato em uma gaiola cama-livre individual e coloc a gaiola em um dispositivo térmico da sustentação para impedir a hipotermia. Nota: o rato é observado até atingir e manter a recumbência esternal. Aplique cuidados pós-operatórios, incluindo analgesia e tratamento de feridas, de acordo com as recomendações do IACUC local. Para analgesia utilizamos buprenorfina a 0,1 mg/kg intrasmuscularmente a cada 12 h por 48 h após os procedimentos cirúrgicos e, posteriormente, conforme necessário.</li>
	<li>Confirme o patência de AVF postoperatively usando o ultra-som de Doppler (veja a tabela dos materiais). Além disso, meça outras características da embarcação e do fluxo conforme necessário.</li>
</ol>

<ol><li>Dember, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+clopidogrel+on+early+failure+of+arteriovenous+fistulas+for+hemodialysis%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial.</a> JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).</li>
<li>Dixon, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+don%27t+fistulas+mature%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Why don't fistulas mature?</a> Kidney International. 70 (8), 1413-1422 (2006).</li>
<li>Wilmink, T., Hollingworth, L., Powers, S., Allen, C., Dasgupta, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+History+of+Common+Autologous+Arteriovenous+Fistulae%3A+Consequences+for+Planning+of+Dialysis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Vascular+and+Endovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Natural History of Common Autologous Arteriovenous Fistulae: Consequences for Planning of Dialysis.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 51 (1), 134-140 (2016).</li>
<li>Al-Jaishi, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patency+rates+of+the+arteriovenous+fistula+for+hemodialysis%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Patency rates of the arteriovenous fistula for hemodialysis: a systematic review and meta-analysis.</a> American Journal of Kidney Diseases. 63 (3), 464-478 (2014).</li>
<li>Rocco, M. V., Bleyer, A. J., Burkart, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+inpatient+and+outpatient+resources+for+the+management+of+hemodialysis+access+complications%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Utilization of inpatient and outpatient resources for the management of hemodialysis access complications.</a> American Journal of Kidney Diseases. 28 (2), 250-256 (1996).</li>
<li>Roy-Chaudhury, P., Sukhatme, V. P., Cheung, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodialysis+vascular+access+dysfunction%3A+a+cellular+and+molecular+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Hemodialysis vascular access dysfunction: a cellular and molecular viewpoint.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 1112-1127 (2006).</li>
<li>Quencer, K. B., Arici, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arteriovenous+Fistulas+and+Their+Characteristic+Sites+of+Stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22AJR%3A+American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">Arteriovenous Fistulas and Their Characteristic Sites of Stenosis.</a> AJR: American Journal of Roentgenology. 205 (4), 726-734 (2015).</li>
<li>Kian, K., Asif, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cephalic+arch+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Dial%22%5BJournal%5D)">Cephalic arch stenosis.</a> Semin Dial. 21 (1), 78-82 (2008).</li>
<li>Agarwal, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+vein+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Central vein stenosis.</a> American Journal of Kidney Diseases. 61 (6), 1001-1015 (2013).</li>
<li>Glanz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axillary+and+subclavian+vein+stenosis%3A+percutaneous+angioplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Axillary and subclavian vein stenosis: percutaneous angioplasty.</a> Radiology. 168 (2), 371-373 (1988).</li>
<li>Yamamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+aortocaval+fistula+recapitulates+human+arteriovenous+fistula+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">The mouse aortocaval fistula recapitulates human arteriovenous fistula maturation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 305 (12), H1718-H1725 (2013).</li>
<li>North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods%2C+patient+characteristics%2C+and+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Methods, patient characteristics, and progress.</a> Stroke. 22 (6), 711-720 (1991).</li>
<li>Kuwahara, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD44+Promotes+Inflammation+and+Extracellular+Matrix+Production+During+Arteriovenous+Fistula+Maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CD44 Promotes Inflammation and Extracellular Matrix Production During Arteriovenous Fistula Maturation.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (6), 1147-1156 (2017).</li>
<li>Protack, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eph-B4+regulates+adaptive+venous+remodeling+to+improve+arteriovenous+fistula+patency%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Eph-B4 regulates adaptive venous remodeling to improve arteriovenous fistula patency.</a> Scientific Reports. 7 (1), 15386(2017).</li>
<li>Payne, H., Brill, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stenosis+of+the+Inferior+Vena+Cava%3A+A+Murine+Model+of+Deep+Vein+Thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis.</a> J Vis Exp. (130), (2017).</li>
<li>Nam, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow%2C+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 297 (4), H1535-H1543 (2009).</li>
<li>Ene-Iordache, B., Remuzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+flow+in+radial-cephalic+arteriovenous+fistulae+for+haemodialysis%3A+low+and+oscillating+shear+stress+locates+the+sites+of+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology%2C+Dialysis%2C+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Disturbed flow in radial-cephalic arteriovenous fistulae for haemodialysis: low and oscillating shear stress locates the sites of stenosis.</a> Nephrology, Dialysis, Transplantation. 27 (1), 358-368 (2012).</li>
<li>Yamamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+shear+stress+reduces+Klf2+expression+in+arterial-venous+fistulae+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+reports%22%5BJournal%5D)">Disturbed shear stress reduces Klf2 expression in arterial-venous fistulae in vivo.</a> Physiological reports. 3, (2015).</li>
<li>Remuzzi, A., Ene-Iordache, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+paradigms+for+dialysis+vascular+access%3A+upstream+hemodynamics+and+vascular+remodeling+in+dialysis+access+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Novel paradigms for dialysis vascular access: upstream hemodynamics and vascular remodeling in dialysis access stenosis.</a> Clinical Journal of the American Society of Nephrology. 8 (12), 2186-2193 (2013).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

O modelo murino AVF tem sido utilizado para estudar os mecanismos básicos e eventos moleculares que levam à maturação da fav13,14. Neste estudo, nós modificamos um modelo murino estabelecido de AVF para criar um modelo murino novo da fístula do aortocaval com um stenosis de IVC no intervalo da saída da fístula. Nosso modelo da ligadura é similar a diversos modelos murino previamente descritos que usam a ligadura vascular. Um modelo murino de trombose venosa profu...

As fístulas arteriovenosas (fav) são os acessos mais comuns para hemodiálise, com patência superior e infecção reduzida em comparação com outros acessos, como enxertos ou cateteres venosos centrais. No entanto, até 60% das AVF não amadurecem1,2,3; uma revisão sistemática recente relatou que as taxas preliminares do patência em 1 ano eram somente 60%4. A estenose ao longo do fluxo venoso causa predominantemente falência da maturação da fav5,6. Existem certos locais característicos propensos a estenose proximal à fístula: o segmento de balanço justaanastomose para a fístula radiocefálica, a região do arco cefálico para a fístula Braquiocefálica e a veia central para a fístula com previamente cateteresdeveia jugular interna ou subclávia ipsilateral7,8.
O stenosis venoso central é frequentemente assintomático nos pacientes sem um AVF, mas pode causar o edema ipsilateral da extremidade pela hipertensão venosa assim como a falha da maturação da fístula quando desafiado pelo fluxo9da fístula. A patofisiologia do stenosis venoso central é mais provável relacionada à inflamação e à cascata ativada da coagulação após a colocação do dispositivo. Além disso, o movimento constante da ponta do cateter, bem como o aumento do fluxo da fístula podem alterar o estresse de cisalhamento, resultando em deposição plaquetária e espessamento da parede venosa10. Para compreender os mecanismos básicos que subjacentes à falha AVF causada pelo stenosis venoso central, um modelo animal que imita o stenosis venoso central com um AVF é exigido.
Nós estabelecemos um modelo murino da fístula do aortocaval que seja fácil de executar e dominar e recapitula o curso clínico do AVF humano. 11 nós aplicamos os conceitos e a técnica de diversos modelos murino previamente estabelecidos para criar um modelo murino novo de AVF com stenosis venoso. Nós introduzimos um modelo murino do aortocaval da fístula com um stenosis de IVC na fístula do saída que pode ser usada para o estudo do stenosis venoso central.

<table><tbody><tr><td>Cabeça de varredura de 20-60 Mhz</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>RMV-704</td><td></td></tr><tr><td>8-0 Micro Sutura Estéril, 6mm (140 &micro;), 3/8 Círculo, Agulha de Ponta TAP</td><td>AROSutura</td><td>T06A08N14-13</td><td>suturas de monofilamento de poliamida</td></tr><tr><td>Câmara de Indução, 2 Litros 3.75"W x 9.00"D x 3.75"H</td><td>VetEquip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Isoflo, Isoflurano líquido</td><td>Zoetis</td><td>26675-46-7</td><td></td></tr><tr><td>Camundongos, C57BL/6J</td><td>The Jackson Laboratório</td><td>664</td><td></td></tr><tr><td>Pet Bed Microondas Almofada de Aquecimento</td><td>Snuggle Safe</td><td>6250</td><td></td></tr><tr><td>Agulha PrecisionGlide 25G</td><td>BD</td><td>305122</td><td></td></tr><tr><td>Surflo Cateter IV 22G</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2225CA</td><td>0,85 mm de diâmetro externo</td></tr><tr><td>Braçadeira vascular</td><td>Roboz Instrumento Cirúrgico</td><td>RS-5424</td><td></td></tr><tr><td>Vevo770 Sistema</td> <td>de Imagem de Alta ResoluçãoVisualSonics Inc.</td><td>770</td><td></td></tr></tbody></table>

modelo murino de estenose venosa central usando fístula aortocaval com estenose de saída

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

O stenosis venoso central é uma entidade importante que contribui à falha arteriovenosa da fístula (AVF). Um modelo murino de AVF foi modificado para criar uma ligadura parcial da veia cava inferior (IVC) na saída da fístula, imitando o stenosis venoso central. Os aspectos técnicos deste modelo são introduzidos. A aorta e o IVC são expostos, seguindo uma incisão abdominal. A aorta infra-renal e o IVC são dissecados para o aperto proximal, e a aorta longe do ponto de origem é expor para a punctura. O IVC no ponto médio entre a veia renal esquerda e a bifurcação aórtica é dissecado com cuidado para coloc um 8-0 sutura o IVC. Após o aperto da aorta e da VCI, uma fav é criada perfurando a aorta infra-renal através de ambas as paredes para o IVC com uma agulha de 25 G, seguida de ligando um cateter intra-venoso (IV) de 22 G e IVC juntos. O cateter é então removido, criando uma estenose venosa reprodutível sem oclusão. A aorta e o IVC são apalpe após ter confirmado o hemostasis preliminar. Este modelo novo do stenosis da veia central é fácil de executar, reprodutível, e facilitará estudos na falha de AVF.

Os ratos machos submeteram-se à operação mencionada acima para criar um AVF e um stenosis de IVC. Os ratos do controle submeteram-se somente à laparotomia e à dissecção dos tecidos que cercam o IVC, por exemplo, um procedimento Sham, ou somente a criação de um stenosis de IVC sem criação simultânea de um AVF.
O IVC foi observado com ultrassonografia Doppler no 7º dia após o procedimento cirúrgico (Figura 2</...

Uma fístula aortocaval foi criada puncionando a aorta infra-renal murino através de ambas as paredes na veia inferior oca e foi seguida pela criação de um stenosis em seu saída através da ligadura parcial da veia inferior oca. Este modelo reprodutível pode ser usado para estudar a estenose venosa central.

Modelo murino de estenose venosa central usando fístula Aortocaval com estenose de saída

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Estenose venosa central pode causar tanto fístula aortocaval, ou AVF, falha primária de maturação, bem como falha posterior em uma fístula de trabalho. Esta técnica usa uma versão modificada de um modelo AVF murine estabelecido que recapitula o curso clínico do AVF humano e é facilmente dominado através de várias etapas críticas. Antes de iniciar o procedimento, confirme a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé em um rato C57-Black/6 de nove a 11 semanas de idade e coloque o rato na posição supina na área cirúrgica.Aplique pomada nos olhos do animal e remova a pele do lado ventral do pescoço para o abdômen inferior. Em seguida, limpe e desinfete o local cirúrgico com três esfregões sequenciais de 10% de povidona e 70% isopropanol, e coloque uma cortina cirúrgica sobre o animal. Para a exposição ao local do grampo e punção, coloque o rato sob um microscópio dissecando e, usando técnica estéril e um bisturi, faça uma incisão abdominal profunda, midline, da borda do fígado inferior até um pouco acima do púbis.Corte a musculatura com uma tesoura para abrir a cavidade abdominal e insira um retrátil no abdômen. Mova as entranhas para o lado direito, e enrole-as em uma gaze salina encharcada. Mova a bexiga e as vesículas seminais para o lado caudal do animal, e use um suporte de microaguléce para dissecar o mesentery entre o reto e o retroperitoneum para garantir uma visão completa da aorta e da veia cava inferior, ou IVC.Em seguida, use o suporte de microaréde para dissecar a aorta infrarenal e iVC em bloco a partir dos tecidos retroperitoneais laterais e dorsais ao redor para cruzar os tecidos juntos, e dissecar os tecidos circundantes para expor o local de punção aórtica a aproximadamente três quartos da distância da veia renal esquerda à bifurcação aórtica. Para o isolamento do IVC, dissecar entre o IVC infrarenal e a aorta imediatamente distal à veia renal esquerda e estender a dissecção distally para a metade entre a veia renal esquerda e a bifurcação aórtica para observação de IVC infra-operatório pós-operatório. Faça uma janela para separar o IVC da aorta e dissecar o IVC do tecido circundante.Em seguida, cuidadosamente colocar um 8-0 sutura de monofilamento de poliamida sob o IVC e a aorta antes de puxar a extremidade da sutura através da janela para posicionar a sutura abaixo apenas do IVC. Para criar o AVF, primeiro dobre uma agulha de calibre 25 para um ângulo de 45 a 60 graus a quatro milímetros da ponta da agulha e aperte a aorta infrarenal e o IVC com um clipe microcirúrgico. Agarrando o tecido conjuntivo ao redor da bifurcação, gire a aorta mediada e caudalmente para expor o local de punção da aorta esticada ligeiramente para o lado ventral, e use a agulha de calibre 25 para perfurar através da aorta no IVC.Quando o tecido for perfurado, solte a aorta e puxe para cima do lado esquerdo da aorta para cobrir o local da punção com o tecido circundante. Em seguida, remova a agulha e pressione o local da punção suavemente com um cotonete com ponta de algodão para hemostasia. Para a criação de estenose IVC, coloque a ponta de um cateter intravenoso de 22 bitolas longitudinalmente sobre o IVC e liga o cateter para o IVC com um 8-0 Sutura.Quando a sutura tiver sido colocada, remova o cateter e confirme a hemostasia primária antes de desordenar a aorta e o IVC. Cubra o local da punção por mais um minuto para garantir a hemostasia, e devolva os órgãos à cavidade abdominal antes de fechar o abdômen com suturas de 6-0. Em seguida, coloque o mouse em uma gaiola individual livre de cama em um dispositivo de suporte térmico com monitoramento até a recuperação completa, e use ultrassom Doppler para confirmar a patência da fístula.No sétimo dia após o procedimento cirúrgico, as áreas de fístula e estenose do IVC são facilmente detectadas na visão longitudinal. Em camundongos com estenose sem AVF, o segmento de estenose exibe uma forma de onda venosa com mais ampliação espectral do que ratos operados por vergonha, mas sem muita pulsatilidade. Em camundongos com um AVF, bem como uma estenose, o segmento de estenose mostra uma forma de onda pulsante, além da ampliação espectral, e a velocidade máxima média de tempo do fluxo na estenose em camundongos com um AVF com estenose é significativamente maior do que em camundongos com estenose apenas.O diâmetro médio de IVC na estenose em camundongos apenas com estenose é semelhante ao observado em camundongos com um AVF e estenose. Além disso, usando o segmento upstream ou downstream como referência, a estenose percentual é significativamente maior em camundongos com um AVF, além de uma estenose. Quando você liga o cateter IV e o IVC juntos, é importante amarrá-los firmemente para criar uma estenose reprodutível.A aplicação deste procedimento ao modelo de implantação de enxerto venoso murine poderia responder como superar a oclusão da estenose venosa do enxerto.

murine-model-central-venous-stenosis-using-aortocaval-fistula-with-an

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

O objectivo é o de produzir uma fístula artério-venosa que é simples e reprodutível. Este método não utiliza suturas ou cola adesiva. Por conseguinte, as amostras podem ser usadas, com a menor quantidade de materiais estranhos para análise.

Aspectos técnicos da artocava Fístula Rato

Descreve-se um método para a criação de um modelo de confiança de hipertensão venosa cerebral no rato adulto. Este modelo tem sido amplamente descrita e testada em ratos. Este novo homólogo nos ratinhos abre a possibilidade de utilização de animais geneticamente modificados e, assim, alarga a aplicação do modelo.

Adulto Rato venoso Hipertensão Modelo: artéria carótida comum para External Jugular Vein anastomose.

Modificações histológicas e bioquímicas após aneurisma endograft exclusão ainda não são claras. Descreve-se um novo modelo de implantação de endoprótese em aneurisma murino. Através da análise de trombo com e sem circulação persistente interface de fluxo de sangue, e nova avaliação biomateriais endovascular, este modelo vai ajudar a entender melhor endovascular pathobiology exclusão do aneurisma.

Um novo modelo murino de reparação endovascular de aneurisma da aorta

Aqui apresentamos um modelo murino de falha de fístula arteriovenosa (FAV) no qual uma configuração anastomótica clinicamente relevante é incorporada. Este modelo pode ser usado para estudar a fisiopatologia e testar possíveis intervenções terapêuticas.

Um Modelo murino Novel de Fístula Arteriovenosa Falha: O procedimento cirúrgico em Detalhe

Descrevemos aqui estenose na veia cava inferior como um modelo murino de trombose venosa profunda. Este modelo recapitula a restrição do fluxo de sangue, um dos principais gatilhos de trombose venosa em seres humanos.

Estenose da veia Cava Inferior: um modelo murino de trombose venosa profunda

Aqui, apresentamos um protocolo de transplante heterotópico da aorta em camundongos usando a técnica de manguito não sutura em um modelo de urina cervical. Este modelo pode ser usado para estudar a patologia subjacente da vasculopatia aloenxerto crônica (CAV) e pode ajudar a avaliar novos agentes terapêuticos, a fim de evitar a sua formação.

Murine Modelo de Transplante de Aorta Cervical usando uma técnica de manguito não sutura modificada

O presente protocolo visa criar experimentalmente hiperplasia intimal venosa submetendo veias à pressão arterial arterial para o desenvolvimento de estratégias para atenuar a hiperplasia intimal venosa após cirurgia de revascularização usando enxertos venosos.

Um modelo de interposição venosa de coelho imitando cirurgia de revascularização usando enxertos de veia para avaliar hiperplasia intimal sob pressão arterial

Este protocolo detalha os passos cirúrgicos da criação da fístula arteriovenosa ilíaca comum murina. Desenvolvemos este modelo para estudar a fisiopatologia do membro relacionada ao acesso hemodialítico.

Um modelo murino de disfunção da mão relacionada ao acesso para hemodiálise

Este protocolo apresenta o estabelecimento e a confirmação de um modelo de sobrecarga de volume (VO) do ventrículo direito pós-natal em camundongos com fístula arteriovenosa (FAV) abdominal, que pode ser aplicado para investigar como a VO contribui para o desenvolvimento cardíaco pós-natal.

Estabelecimento e Confirmação de um Modelo de Sobrecarga de Volume do Ventrículo Direito Pós-Natal em Camundongos

Aqui apresentamos um modelo murino para anastomose da artéria femoral, oferecendo aos pesquisadores um modelo animal valioso para estudar e simular a estenose da anastomose vascular. Esse desenvolvimento é crucial para avançar nossa compreensão da fisiopatologia subjacente a essa condição e facilitar pesquisas mais precisas e eficazes sobre doenças vasculares.

Desenvolvimento de um modelo murino para estenose anastomótica da artéria femoral

Aprenda a criar um modelo murino de estenose venosa central usando fístula aortocaval com estenose de saída. Esta técnica reproduz o curso clínico da fístula arteriovenosa humana para estudar falhas de maturação.

Modelo murino de estenose venosa central usando fístula Aortocaval com estenose de saída

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