Genotyping de Anemone de mar durante o desenvolvimento adiantado

Este protocolo permite que um pesquisador identifique anêmonas marinhas mutantes durante a embrigênese precoce para que o fenótipo pós-embrionário possa ser analisado. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode ser usada para genótipo de anêmonas marinhas individuais no início da ongênio sem sacrificar a vida do animal. Demonstrando esse procedimento será Miguel Silva, um estudante de pós-graduação do meu laboratório.

No dia anterior à indução da desova, coloque a anêmona nematostella vectensis em uma incubadora controlada pela temperatura e luz, programando a incubadora para que os animais sejam expostos a oito horas de luz a 25 graus Celsius. No dia seguinte, retire os animais da incubadora e deixe-os em um banco em temperatura ambiente com a luz acesa para permitir a desova, que ocorrerá dentro de uma hora e meia a duas horas. Use uma pipeta de transferência que a ponta é cortada para ampliar a abertura para colocar embalagens de óvulos do recipiente feminino em um recipiente masculino contendo esperma e deixá-los no recipiente masculino por pelo menos 15 minutos para permitir a fertilização.