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DOI: 10.3791/59731-v
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This article presents a protocol for preparing apoptotic thymocytes and peritoneal macrophages, focusing on the efficiency of efferocytosis and the effects of specific inhibitors on the engulfment of apoptotic thymocytes. The method has broad applications in studying cell-mediated clearance of various particles, including artificial beads and bacteria.
Aqui, nós apresentamos um protocolo para preparar timócitos apoptóticos e macrófagos peritoneais e para analisar a eficiência do macrófagos e do bloqueio inibidor-negociado específico do engulfment apoptóticas dos timócitos. Este protocolo tem uma aplicação larga no afastamento Cell-negociado de outras partículas que incluem grânulos e bactérias artificiais.
Nosso corpo gera de 1 a 10 bilhões de células apoptóticas todos os dias. O desembaraço eficiente dessas células ajuda na remoção de detritos celulares e na manutenção dos estoques. Este método pode ser usado em muitas aplicações para caracterizar a ligação celular apoptótica e a ingestão por muitos outros tipos de células fagocíticas.
Demonstrando este procedimento será Yuxuan Zhen, um técnico sênior do meu laboratório. Para colher timócitos, depois de abrir a cavidade torácica de um rato preto C57 6 ingênuo, use fórceps finos curvos para puxar o timo. Coloque o órgão em um prato de cultura tecidual contendo 10 mililitros de RPMI 1640 Medium.
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