Avaliação de interações proteína-proteína usando uma técnica de digestão na membrana

Pesquisar a interação proteína-proteína é indispensável para a compreensão de processos fisiológicos em diversos campos. Neste vídeo introduzimos a técnica de digestão na membrana que permite aos pesquisadores realizar uma análise abrangente das proteínas de ligação por MS de forma conveniente. A principal vantagem desta técnica é que podemos melhorar o throughput de análise proteômica para imunoprecipitantes brutos porque a separação de proteínas por eletroforese de gel de poliacrilamida não é necessária.

Comece a conjugar o anticorpo às contas magnéticas, misturando o anticorpo anti-GFP com as contas em 500 microliters de tampão fosfato citrato. Gire a mistura a 50 RPM por uma hora em temperatura ambiente. E depois lave as contas conjugadas três vezes com tampão fosfato citrato contendo 1% de polisorbato 20.