Name: Fabricação do estágio do microscópio para a observação vertical com função de controle da temperatura (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 21 s
Description: Aprenda a fabricar um estágio de microscópio vertical com controle de temperatura para observar dinâmicas de amostras biológicas sob influência da gravidade. Este método permite estudar comportamentos dependentes de temperatura em diversas amostras.

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Os autores não têm agradecimentos.

<ol><li>Drum, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+Microscope+Observations+of+Diatos%5BTitle%5D)+AND+%22Osterreichische+Botanische+Zeitschrift%22%5BJournal%5D)">Electron Microscope Observations of Diatos.</a> Osterreichische Botanische Zeitschrift. 116, 321(1969).</li>
<li>McBride, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparing+Random+Distributions+of+Datom+Values+on+Microscope+Slides%5BTitle%5D)+AND+%22Limnology+and+Oceangraphy%22%5BJournal%5D)">Preparing Random Distributions of Datom Values on Microscope Slides.</a> Limnology and Oceangraphy. 33, 1627-1629 (1988).</li>
<li>Liu, X. Y., Lu, Z., Sun, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orientation+Control+of+Biological+Cells+Under+Inverted+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE-ASME+Transactions+on+Mechatronics%22%5BJournal%5D)">Orientation Control of Biological Cells Under Inverted Microscopy.</a> IEEE-ASME Transactions on Mechatronics. 16, 918-924 (2011).</li>
<li>Kahle, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+a+Compact%2C+Easy-to-Use+Inverted+Fluorescence+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22American+Laboratory%22%5BJournal%5D)">Applications of a Compact, Easy-to-Use Inverted Fluorescence Microscope.</a> American Laboratory. 43, 11-14 (2011).</li>
<li>Prunet, N., Jack, T. P., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. , 114-120 (2016).</li>
<li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 10(2017).</li>
<li>Hedde, P. N., Malacrida, L., Ahrar, S., Siryaporn, A., Gratton, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((sideSPIM+-+selective+plane+illumination+based+on+a+conventional+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">sideSPIM - selective plane illumination based on a conventional inverted microscope.</a> Biomedical Optics Express. 8, 3918-3937 (2017).</li>
<li>Crowe, W. E., Wills, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+Method+for+Monitoring+Changes+in+Cell+Height+using+Fluorescent+Microbeads+and+an+Ussing-type+Chamber+for+the+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archiv-Europian+journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A simple Method for Monitoring Changes in Cell Height using Fluorescent Microbeads and an Ussing-type Chamber for the Inverted Microscope.</a> Pflugers Archiv-Europian journal of Physiology. , 349-357 (1991).</li>
<li>Bavister, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Minichamber+Device+for+Maintaining+a+Constant+Carbon-Dioxide+in+Air+Atmosphere+during+Prolonged+Culture+of+Cells+on+the+Stage+of+an+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cellular+%26+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">A Minichamber Device for Maintaining a Constant Carbon-Dioxide in Air Atmosphere during Prolonged Culture of Cells on the Stage of an Inverted Microscope.</a> In Vitro Cellular & Developmental Biology. 24, 759-763 (1988).</li>
<li>Makler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+version+of+the+10-MU-M+Chamber+and+its+use+for+Semen+Analysis+with+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Andrology%22%5BJournal%5D)">A New version of the 10-MU-M Chamber and its use for Semen Analysis with Inverted Microscope.</a> Archives of Andrology. 13, 195-197 (1984).</li>
<li>Xu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flexible+microassembly+methods+for+micro%2Fnanofluidic+chips+with+an+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Microelectronic+Engineering%22%5BJournal%5D)">Flexible microassembly methods for micro/nanofluidic chips with an inverted microscope.</a> Microelectronic Engineering. 97, 1-7 (2012).</li>
<li>Datyner, N. B., Gintant, G. A., Cohen, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Versatile+Temperature+Controlled+Tissue+Bath+for+Studies+of+Isolated+Cells+using+an+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archive-+Europian+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Versatile Temperature Controlled Tissue Bath for Studies of Isolated Cells using an Inverted Microscope.</a> Pflugers Archive- Europian Journal of Physiology. 403, 318-323 (1985).</li>
<li>Claudet, C., Bednar, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magneto-optical+tweezers+built+around+an+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Optics%22%5BJournal%5D)">Magneto-optical tweezers built around an inverted microscope.</a> Applied Optics. 44, 3454-3457 (2005).</li>
<li>Yamaoka, N., Suetomo, Y., Yoshihisa, T., Sonobe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motion+analysis+and+ultrastructural+study+of+a+colonial+diatom%2C+Bacillaria+paxillifer%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy%22%5BJournal%5D)">Motion analysis and ultrastructural study of a colonial diatom, Bacillaria paxillifer.</a> Microscopy. 65, 211-221 (2016).</li>
<li>Apoya-Horton, M. D., Yin, L., Underwood, G. J. C., Gretz, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Movement+modalities+and+responses+to+environmental+changes+of+the+mudflat+diatom+Cylindrotheca+closterium+%28Bacillariophyceae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Phycology%22%5BJournal%5D)">Movement modalities and responses to environmental changes of the mudflat diatom Cylindrotheca closterium (Bacillariophyceae).</a> Journal of Phycology. 42, 379-390 (2006).</li>
<li>Bannon, C. C., Campbell, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sinking+towards+destiny%3A+High+throughput+measurement+of+phytoplankton+sinking+rates+through+time-resolved+fluorescence+plate+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sinking towards destiny: High throughput measurement of phytoplankton sinking rates through time-resolved fluorescence plate spectroscopy.</a> PLoS One. 12, 16(2017).</li>
<li>Clarkson, N., Davies, M. S., Dixey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+motility+and+low+frequency+electromagnetic+fields+-+A+new+technique+in+the+search+for+independent+replication+of+results%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectromagnetics%22%5BJournal%5D)">Diatom motility and low frequency electromagnetic fields - A new technique in the search for independent replication of results.</a> Bioelectromagnetics. 20, 94-100 (1999).</li>
<li>Iwasa, K., Shimizu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motility+of+Diatom%2C+Phaeodactylum-Tricornutum%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Motility of Diatom, Phaeodactylum-Tricornutum.</a> Experimental Cell Research. 74, (1972).</li>
<li>Edgar, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucilage+Secretions+of+Moving+Diatoms%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Mucilage Secretions of Moving Diatoms.</a> Protoplasma. 118, 44-48 (1983).</li>
<li>Edgar, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+Locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Computer-Assisted+Analysis+of+Cine+Film+British+Phycological+Journal%22%5BJournal%5D)">Diatom Locomotion.</a> Computer-Assisted Analysis of Cine Film British Phycological Journal. 14, 83-101 (1979).</li>
<li>Iversen, M. H., Ploug, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+effects+on+carbon-specific+respiration+rate+and+sinking+velocity+of+diatom+aggregates+-+potential+implications+for+deep+ocean+export+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Biogeosciences%22%5BJournal%5D)">Temperature effects on carbon-specific respiration rate and sinking velocity of diatom aggregates - potential implications for deep ocean export processes.</a> Biogeosciences. 10, 4073-4085 (2013).</li>
<li>Riebesell, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Sinking+and+Sedimentation-Rate+Measurements+in+a+Diatom+Winter+Spring+Bloom%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Ecology+Progress+Series%22%5BJournal%5D)">Comparison of Sinking and Sedimentation-Rate Measurements in a Diatom Winter Spring Bloom.</a> Marine Ecology Progress Series. 54, 109-119 (1989).</li>
<li>Drum, R. W., Hopkins, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+Locomotion+-+An+Explanation%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Diatom Locomotion - An Explanation.</a> Protoplasma. 62, (1966).</li>
</ol>

Os autores não têm conflitos para divulgar.

A análise da trajetória de células de diatomáceas móveis é uma abordagem útil para avaliar a motilidade da diatomácea. Entretanto, quando um microscópio invertido normal observar amostras horizontalmente, não é apropriado para observações da influência da gravidade ou do movimento de flutuação na direção vertical. Desenvolvido e descrito aqui é um estágio de microscópio vertical com controle de temperatura e anexado a um microscópio invertido, que foi girado por 90 °. Este estágio do microscópio com controle de temperatu...

A microscopia óptica é uma técnica empregada para aumentar os detalhes observáveis através da ampliação de uma amostra com lentes e luz visível. Na microscopia óptica, a luz é direcionada para uma amostra, então transmitida, refletida, ou a luz fluorescente é capturada por lentes de ampliação para observação. Vários tipos de microscópio estão disponíveis que diferem no projeto para acomodar diferentes usos e métodos de observação. Os projetos diferentes incluem um microscópio ereto, que seja estruturado para iluminar uma amostra de abaixo para a observação de acima, e um microscópio invertido, que ilumine a amostra de acima para a observação de abaixo. Os microscópios eretos são o projeto o mais comum e o mais amplamente utilizado. Microscópios invertidos são freqüentemente usados para observar as amostras que não podem permitir uma lente perto da distância de cima, tais como células cultivadas aderente à parte inferior de um recipiente. Muitos grupos de pesquisa relataram observações em uma ampla gama de campos usando microscópios invertidos1,2,3,4,5,6,7. Muitos dispositivos adicionais também foram desenvolvidos que aproveitam as características dos microscópios invertidos8,9,10,11,12,13 .
Atualmente, em todos os projetos convencionais do microscópio, o estágio do microscópio é horizontal e é conseqüentemente inadequado para a observação das amostras produzindo o movimento no plano vertical, (devido à gravidade, à flutuabilidade, ao movimento, etc.). Para fazer estas observações possíveis, o estágio do microscópio e o trajeto claro devem ser girados para vertical. O estágio vertical é exigido para montar verticalmente corrediças de vidro ou recipientes da amostra tais como pratos de Petri ao estágio. Para abordar isso, um microscópio invertido lateralmente inclinado por 90 ° já foi planejado. No entanto, a fixação de amostras com fita adesiva ou outros adesivos não produz a imobilidade de longo prazo necessária. Descrito aqui é um dispositivo que pode alcançar a estabilidade necessária. Este dispositivo permite a observação sobre o tempo do movimento da amostra no plano vertical. A montagem de um calefator de borracha do silicone igualmente fêz possível observar a influência da variação da temperatura no comportamento da amostra. Os dados de temperatura são transferidos para um servidor de Internet por Wi-Fi, e as configurações de temperatura e monitoramento de log podem ser controlados remotamente a partir de um PC ou smartphone. A nosso conhecimento, o estágio Unido a um microscópio inclinado lateralmente inclinado por 90 ° não foi relatado ainda em estudos precedentes.
O estágio do microscópio é compor de três placas de alumínio. A placa de alumínio médio é montada à placa de alumínio mais baixa que atribui ao estágio. A borracha de silicone que contem o sensor de temperatura é unida entre as placas de alumínio médias e superiores. As bandas de borracha são usadas para afixar a amostra. As garras são anexadas na esquerda e direita quatro pontos da placa de alumínio superior para fixar as bandas de borracha. O circuito de controle do regulador de temperatura recebe um sinal do sensor de temperatura incorporado na borracha de silicone e modula a energia elétrica pelo método da modulação da largura de pulso (PWM). A temperatura pode gradualmente ser aumentada a 50 ° c em incrementos de 1 ° c. Este dispositivo é útil para as aplicações em que os movimentos verticais da amostra podem ser temperatura-dependentes.
Este relatório fornece exemplos de efeitos de temperatura sobre o fenômeno flutuante de diatomáceas. Como exemplos de estudos de observação de diatomáceas, medidas de velocidade de sedimentação de aglomerados celulares, análises de movimento, estudos de estrutura Ultrafina, etc. foram relatados14,15,16,17 , 18 anos de , 19 anos de , 20 anos de , 21 anos de , 22 anos de , a gravidade 23. The específica dos diatomáceas que flutuam na água com organismos fotossintética é ligeiramente mais elevada do que aquela da água, assim que tendem a afundar-se; Entretanto, levantarão se mesmo a convecção ligeira está ocorrendo. Para estudar este fenômeno, uma corrediça de vidro é afixada verticalmente a um estágio do microscópio, e os efeitos da temperatura crescente no movimento vertical do diatomáceas são observados.

<table><tbody><tr><td>Adaptador CA 12V2A</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>AD-D120P200</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>ADS1015 Substrato</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>adafruit ID DO PRODUTO: 1083</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Placa de Alminium (Placa Traseira)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&times; L 200?&vezes; T 1.5mm</td><td>Gifu, Japão</td></tr><tr><td>Alminium Plate (Placa de Frente)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&times; L 200?&vezes; T 2mm</td><td>Gifu, Japão</td></tr><tr><td>Alminium Plate (Placa Inferior Média)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&times; L 200?&vezes; T 4mm</td><td>Gifu, Japão</td></tr><tr><td>Placa de Alminium (Placa Superior Média)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&times; L 200?&vezes; T 5mm</td><td>Gifu,</td></tr><tr><td>Japão Pedestal de Alumínio (Placa Inferior)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>D 100mm&vezes; T 3mm (30&Phi;)</td><td>Gifu, Japão</td></tr><tr><td>Pedestal de alumínio (placa superior)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>D 100mm&vezes; T 3mm (30&Phi;)</td><td>Gifu, Japão</td></tr><tr><td>Solução Nutritiva Basal Basal Modificada em Negrito</td><td>Sigma-Aldrich Co. LLC</td><td>B5282-500ML</td><td>St. Louis, EUA</td></tr><tr><td>Caixa do Controlador</td><td>Marutsu Elec Co., Ltd.</td><td>pff-13-3-9</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>CPU</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>ESP-WROOM-02D</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Microscópio invertido</td><td>Olympus Corporation</td><td>CKX 53</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Adesivo de resina epóxi de endurecimento a baixa temperatura</td><td>ThreeBond Co., Ltd.</td><td>TB2086M</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Volume semi-fixo multi-voltas Tipo vertical 500 e Omega;</td><td>Fornecedor verificado - Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>3296W-1-501LF</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Módulo OLED</td><td>Akihabara Inc.</td><td>M096P4W</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Cortiça prensada (para eletrodo de suporte)</td> <td>Tera Co., Ltd.</td><td>W 42mm&vezes; L 30?</td><td>Ishikawa, Japão</td></tr><tr><td>Cortiça pressionada (disco inferior)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>D 100mm&vezes; T 0.5mm (20&Phi;)</td><td>Ishikawa, Japão</td></tr><tr><td>Cortiça pressionada (disco superior)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>D 100mm&vezes; T 2,5 mm (20&Phi;)</td><td>Ishikawa, Japão</td></tr><tr><td>Codificador rotativo com interruptor com LED de 2 cores</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>P-05772</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Aquecedor de borracha de silicone</td><td>Three High Co., Ltd.</td><td>D 100mm&vezes; T 2,5 mm (20&Phi;)</td><td>Kanagawa, Japão</td></tr><tr><td>Substrato</td><td>Seeed Technology Co., Ltd.</td><td>mh5.0</td><td>Shenzhen, China</td></tr><tr><td>Sensor de temperatura</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>NXFT15XH103FA2B050</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Regulador DC / DC de três terminais 3,3 V</td><td>Marutsu Elec Co., Ltd.</td><td>BR301</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Braço Flexível Universal</td><td>Banggood Technology Co., Ltd.</td><td>YP-003-2</td><td>Hong Kong, China</td></tr><tr><td>Cabo USB USB-A - MicroUSB</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>CABO USB A-MICROB</td><td>Tóquio, Japão</td></tr><tr><td>Vídeo Canera</td><td>Sony Corporation</td><td>HDR-CX590</td><td>Tóquio, Japão</td></tr></tbody></table>

fabricação do estágio do microscópio para a observação vertical com função de controle da temperatura

Fabrication of Microscope Stage for Vertical Observation with Temperature Control Function

As amostras são coloc geralmente em um estágio horizontal do microscópio para a observação microscópica. No entanto, para observar a influência da gravidade em uma amostra ou no comportamento do estudo à tona, é necessário fazer o estágio do microscópio vertical. Para fazer isso, um microscópio invertido lateralmente inclinado por 90 ° foi planejado. Para observar amostras com este microscópio, os recipientes da amostra tais como placas de Petri ou as corrediças de vidro devem ser fixados ao estágio verticalmente. Um dispositivo que possa fixar recipientes da amostra no lugar em um estágio vertical do microscópio foi desenvolvido e é descrito aqui. O acessório deste dispositivo ao estágio permite a observação da dinâmica da amostra no plano vertical. A capacidade de regular a temperatura usando um aquecedor de borracha de silicone também permite a observação de comportamentos de amostra dependentes da temperatura. Além disso, os dados de temperatura são transferidos para um servidor de Internet. As configurações de temperatura e o monitoramento de logs podem ser controlados remotamente a partir de um PC ou smartphone.

A Figura 2 mostra a distribuição da temperatura do aquecedor de borracha. A temperatura de superfície do calefator de borracha era uniforme em cada temperatura. A Figura 3 mostra a capacidade de resposta da temperatura medida para ajustar as mudanças de temperatura. A linha laranja mostra a temperatura definida e a linha azul mostra a mudança da temperatura da amostra. O overshoot do valor medido à mudança da configuração é peque...

É apresentado aqui um protocolo usando um estágio temperatura-controlado do microscópio que permita que um recipiente da amostra seja montado em um microscópio vertical.

Fabricação do estágio do microscópio para a observação vertical com função de controle da temperatura

Samples are usually placed onto a horizontal microscope stage for microscopic observation. However, to observe the influence of gravity on a sample or ...

Este dispositivo pode ser usado para fixar uma amostra em um estágio de microscópio vertical para permitir a observação da influência da gravidade e trabalhar na amostra de interesse. A fixação deste dispositivo ao estágio permite a observação da dinâmica da amostra no quadro vertical e permite a observação de comportamentos amostrais dependentes da temperatura. Para fabricar as placas de alumínio, use uma máquina de processamento a laser para cortar um buraco de 101 milímetros no centro de uma placa de alumínio de 150 por 200 por dois milímetros para ser usada como placa de vanguarda.Faça garras em oito pontos ao redor da placa para permitir que dois elásticos afixem através do comprimento ou da largura da placa. Em seguida, corte um buraco de 130 milímetros no centro de uma placa de alumínio de 150 por 200 por cinco milímetros para ser usada como a placa superior média, e faça oito entalhes para permitir a colocação de dois elásticos através do comprimento ou largura da placa. Em seguida, corte um buraco de 130 milímetros no centro de uma placa de alumínio de 150 por 200 por quatro milímetros para ser usada como a placa média-inferior, e corte um buraco de 30 milímetros no centro de uma placa de alumínio de 150 por 1,5 milímetros para ser usada como placa base.Para fabricar os pedestais, corte um buraco de 30 milímetros no centro de uma placa de alumínio de 100 milímetros de diâmetro e três milímetros de espessura, e faça um entalhe de 42 milímetros de largura por 30 milímetros de profundidade em um lado da placa. Em seguida, corte um buraco de 30 milímetros no centro de uma placa de alumínio de 100 milímetros de diâmetro, quatro milímetros de espessura, e faça três furos de três milímetros a 25 milímetros do centro da placa e espaçado 120 graus um do outro. Para a fabricação dos discos de cortiça prensados, use uma máquina de corte de jato de água para cortar um buraco de 20 milímetros no centro de um disco de cortiça prensado de 100 milímetros de diâmetro, de dois milímetros de espessura, e faça um de 42 milímetros de largura por 30 milímetros de profundidade e um de quatro milímetros de largura por um entalhe de 5 milímetros de profundidade em cada lado do disco.Em seguida, corte um buraco de 20 milímetros no centro de um disco de cortiça prensado de 100 milímetros de diâmetro, um milímetro de espessura, e faça um de 42 milímetros de largura por 30 milímetros de profundidade e um de quatro milímetros de largura por um entalhe de 40 milímetros de profundidade em cada lado do disco. Em seguida, corte uma placa de cortiça pressionada de 42 milímetros por 30 milímetros de profundidade de um disco de 100 milímetros de diâmetro. Para fabricar um aquecedor de borracha de silicone, corte um furo de 20 milímetros no centro de um disco de borracha de silicone de 100 milímetros de diâmetro e 2,5 milímetros de espessura com um fio de nichrome embutido.Em seguida, empilhe as peças fabricadas conforme demonstrado, fixando as peças apropriadas com parafusos ou adesivos conforme necessário. Use um cabo dedicado para incorporar o aquecedor de borracha e o aquecedor da caixa do controlador para conectar o estágio do microscópio ao sistema, e use o controlador para equipar um sinal Wi-Fi e controlar a corrente do aquecedor de borracha. Após a construção do sistema, conecte o fio do conector ao terminal do sensor na caixa do controlador e receba o sinal de temperatura medido pelo avaliador.Use o botão no controlador para alterar a temperatura definida. Em seguida, transfira a temperatura medida, definir informações de temperatura e tempo na medição do controlador para o servidor através da internet. Para analisar a amostra, coloque a amostra no estágio do microscópio perpendicular à superfície do solo e use as quatro garras longitudinalmente para fixar a amostra com dois elásticos.Use o controlador para definir a temperatura para 40 graus Celsius e verifique a temperatura no visor. Em seguida, pressione o botão para iniciar o controle de temperatura. O LED azul acenderá, indicando o início da fonte de calor.Nestes números, são mostradas distribuições representativas de temperatura do aquecedor de borracha. A temperatura da superfície do aquecedor de borracha era uniforme a cada temperatura. Aqui, um exemplo da capacidade de resposta da temperatura medida para definir as mudanças de temperatura é mostrado.A linha laranja indica a temperatura definida, e a linha azul mostra a mudança da temperatura da amostra. Se o equipamento for montado corretamente, a superação do valor medido para a mudança de configuração é tipicamente pequena, e o rastreamento é rápido. Neste experimento, o movimento vertical dependente da temperatura das diatomáceas foi registrado com sucesso, permitindo que o lócus do movimento vertical das diatomáceas fosse detectado.Os efeitos da convecção térmica no fenômeno flutuante vertical das células diatomadas poderiam então ser visualizados por observação direta. Quando o sensor estiver desconectado da amostra, ou se o microcontrolador não funcionar corretamente, verifique se a corrente do aquecedor foi cortada do microcontrolador. Usando este método, o efeito da temperatura muda sobre o movimento vertical de um organismo na água pode ser observado.Como a estrutura da parte do palco que se liga ao microscópio é complicada, estudos futuros abordarão a simplificação dessa estrutura. Para resfriar amostras a temperatura ambiente mais baixa requer um dispositivo de resfriamento complicado que também está sendo considerado para trabalhos futuros.

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Relatamos uma câmara ambiental flexível e de estágio para obtenção de imagens de lapso de tempo de células vivas usando microscopia de espalhamento Raman estimulada vertical com detecção de sinal transmitido. As gotículas lipídicas foram fotografadas em células SKOV3 tratadas com ácido oleico por até 24 h com um intervalo de tempo de 3 min.

Uma câmara flexível para imagens de células vivas com lapso de tempo com microscopia de espalhamento Raman estimulada

Este protocolo descreve a construção de um étalon de Fabry-Perot de baixo custo, discreto, acoplado a fibras e com espaço aéreo com várias aplicações, como em espectroscopia de gás traço. A fabricação é possível em qualquer instalação com equipamento de laboratório óptico padrão disponível.

Fabricação de um Etalon Fabry-Pérot de baixo custo, acoplado à fibra e com espaço a ar

Este trabalho descreve protocolos para a construção e operação de uma etapa de resfriamento para imobilizar C. elegans em suas placas de cultivo originais em massa.

Montagem e Operação de um Estágio de Resfriamento para Imobilização de C. elegans em Suas Placas de Cultura

Este protocolo descreve em detalhes como construir um microscópio de fluorescência de lâmina de luz de objetiva única e seu uso para visualizar redes de citoesqueleto.

Projeto e Construção de um Microscópio de Fluorescência de Lâmina de Luz Personalizável, de Objetiva Única para a Visualização de Redes de Citoesqueleto

Aprenda a fabricar um estágio de microscópio vertical com controle de temperatura para observar dinâmicas de amostras biológicas sob influência da gravidade. Este método permite estudar comportamentos dependentes de temperatura em diversas amostras.

Fabricação do estágio do microscópio para a observação vertical com função de controle da temperatura

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