Manipulação de padrões de cores em aranhas pulando para uso em experimentos comportamentais

Para entender como e por que as cores evoluem, precisamos de experimentos onde manipulamos padrões de cores animais. Animais minúsculos são frequentemente subestudados porque suas cores são difíceis de manipular. A principal vantagem de manipular diretamente as manchas de cor é que esse método não afeta o aparecimento do resto do animal, nem altera seu ambiente de iluminação natural.

Mostramos como pesquisas podem aplicar tintas de esmalte e maquiagem a aranhas saltadoras. Esses mesmos métodos também funcionam em uma variedade de outros pequenos, coloridos e subestudados artrópodes. Eu aconselharia primeiro a tentar pintar um espécime morto para que não haja pressa para obter a consistência e quantidade perfeita da tinta no micro pincel.

A demonstração visual deste método é essencial porque é difícil explicar qual é a consistência correta da pintura, como aplicar a tinta, qual ângulo o pincel teria, por exemplo. Para começar, conecte um microscópio dissecando a uma câmera e computador, para tirar mais facilmente fotos do resultado. Ligue os três dispositivos e inicie o software que processa a entrada da câmera.

Em seguida, selecione o zoom relevante no qual a imagem final será tirada. Coloque um pino de montagem de insetos ou uma unha pequena em uma bola de argila modeladora não endurecedora que é aproximadamente do tamanho de uma uva. Coloque a configuração de argila e pino de modelagem sob o microscópio e ajuste os objetivos para que eles se concentrem aproximadamente na cabeça do pino onde a aranha será montada.

Em seguida, coloque um pino de montagem de insetos extra fino em uma nova bola de argila de modelagem não endurecedora, e coloque isso ao lado do microscópio. Coloque os seguintes materiais de forma organizada ao lado do microscópio. Um pequeno pedaço de papel absorvente, um pedaço de papel de impressora branco, as tintas sendo aplicadas, recipientes separados de diluente de tinta para cada cor que está sendo aplicada, mais um para ser mantido transparente e limpo, micro pincéis individuais para cada cor, e um microparto para ser usado apenas com fino limpo.

Usando um palito, adicione uma gota de tinta a um prato de plástico aberto. Adicione o diluente de tinta e use o palito para misturar os dois à consistência certa, onde a tinta é completamente homogeneizada, mas não muito escorrendo. Use um micro pincéis para testar a tinta mista no papel branco da impressora.

Em seguida, coloque uma gota de cola à base de ervilha em um canto do papel da impressora. Primeiro, adicione uma quantidade muito pequena de cola na cabeça do pino de montagem ou prego que foi previamente preparado e colocado sob o microscópio. Deslize suavemente a aranha anestesiada de seu frasco para a mesa com seu lado ventral para cima, certificando-se de não tocar ou soltar a aranha sobre a mesa.

Segure a argila de modelagem com ambas as mãos, certificando-se de que ambas as mãos estão firmemente firmemente contra a mesa. Em seguida, pressione suavemente a cabeça-de-alfinete com cola no esterno da aranha, de tal forma que a aranha saltará ligeiramente e estenderá as pernas sob a pequena pressão aplicada. Reposicione a configuração de montagem sob o microscópio, de modo que a área a ser pintada esteja voltada para cima e em foco.

Primeiro, testamos a consistência da tinta e ajustamos novamente, se necessário. Primeiro tente aplicar a tinta no papel da impressora, para controlar a qualidade da tinta contida nos pelos da escova. Antes de tocar na aranha, é fundamental ter certeza de que a tinta tem a consistência certa, e que há apenas a quantidade certa de tinta no microfúldmo.

Ao olhar através do microscópio, use a mão dominante para trazer a ponta do pincel para o campo de visão, e garantir, mais uma vez, que os pelos da escova não contenham muita tinta. Se houver muita tinta no pincel, limpe um pouco no papel da impressora. Em seguida, toque o pincel na aranha na maior área que precisará ser pintada.

Isso revelará se a consistência e quantidade da tinta está certa, que é quando a tinta ligeiramente e lentamente mergulha no cabelo ou escamas da aranha. Se nenhuma tinta for aplicada, mergulhe o pincel na tinta e repita esse processo, começando com o teste da tinta no papel da impressora. Se a tinta absorver rapidamente e derramar em uma área que não deve ser coberta por tinta, limpe o pincel sobre o papel absorvente e repita o processo desde o início, testando a tinta no papel da impressora.

Se pintar o rosto da aranha, use o pino extra fino na mão não dominante, para segurar as pernas dianteiras e pedipalps. Dependendo dos pincéis e da tinta, considere pintar ambos os lados do rosto antes de tentar pintar a área central entre os olhos, pois a pintura nas áreas laterais pode ser juntada segurando o pincel paralelo ao rosto da aranha e induzindo a ação capilar. Ao pintar os pedipalps ou pernas, certifique-se de não tocar em nenhuma junta com uma tinta de endurecimento, e certifique-se de não aplicar tinta aos órgãos de entrega de esperma masculino na parte inferior do segmento distal das pedipalps.

Depois de pintar um lado do rosto da aranha, é útil girar a aranha sob o microscópio, para que o outro lado do rosto possa ser pintado com a mesma mão dominante. A pintura deve ser feita com cuidado e rapidez, antes que a aranha acorde da anestesia. Finalmente, amplie com o microscópio para inspecionar a manipulação geral de cores e prepare-se para tirar uma foto.

Primeiro, mude o objetivo para o modo de câmera. Usando o software do computador, tire uma foto enquanto certifica se o zoom selecionado é o selecionado no microscópio, para que uma barra de escala seja adicionada. Quando a aranha começar a se mover, segure o pino para que as pernas dianteiras da aranha toquem o frasco da aranha.

Se necessário, incline-se suavemente o pino para ajudar a aranha a se afastar da cola seca e deixar a aranha se soltar. Neste estudo, os rostos minúsculos dos machos habronattus pirrithrix são manipulados por cores. Usando as técnicas aqui demonstradas, vários graus de manipulação de cores são eficazes.

Incluindo ocultar completamente as cores, ou reduzir ou aumentar sua intensidade. Para os machos aqui mostrados, o objetivo é aumentar ou diminuir o número de manchas vermelhas exibidas pelos machos durante o namoro. Alguns machos têm seus rostos vermelhos naturais escondidos com tinta de esmalte cinza, enquanto outros têm suas cores mantidas pela pintura sobre o vermelho natural com tinta de esmalte vermelho como controle.

Da mesma forma, uma vez que algumas aranhas têm manchas vermelhas adicionadas aos pedipalps para aumentar a quantidade de manchas de cor vermelha exibidas, a tinta cinza é usada para cobrir o pedipalp dos outros machos para que todos os machos tenham tinta aplicada à área sensível. No entanto, ter aranhas de diferentes grupos pintadas exatamente nas mesmas áreas, para controlar qualquer possível efeito negativo da tinta, nem sempre é viável. Em um estudo diferente, a coloração vermelha é removida usando um delineador preto que tem as mesmas propriedades espectrais que a cutícula subjacente do macho, enquanto as outras cores masculinas são deixadas intactas e naturais.

Para os machos de aparência natural, a mesma quantidade de delineador é aplicada na área em cima da carapaça, logo atrás dos olhos medianos anteriores, para controlar qualquer odor potencial ou toxicidade geral do produto. O comportamento de ambos os tipos de machos é comparado em um determinado contexto para avaliar quaisquer diferenças sutis que possam sugerir toxicidade ou efeitos não intencionais das tintas. Machos e machos tratados com vergonha cujos rostos são pintados com delineador, são colocados dois por dois na presença de uma fêmea, e comportamentos masculinos específicos são observados.

Neste caso, todas as comparações não revelam diferenças entre os tratamentos. Portanto, pode-se concluir que nenhum viés é introduzido para nenhuma das categorias de tratamento. Da mesma forma, quando introduzidos de forma singly a uma gaiola feminina, machos pintados com tinta de esmalte cinza ou vermelho e machos não manipulados, não apresentam diferenças de comportamento.

Portanto, pode-se concluir que os machos pintados agiram naturalmente. Para não desabilitar a aranha de forma alguma, é importante evitar completamente adicionar tinta na parte da boca ou nos órgãos de entrega de esperma. Deve-se também não adicionar ou deixar qualquer tinta nos olhos ou articulações da aranha.

Aranhas manipuladas por cores ou outros artrópodes podem ser usados em experimentos comportamentais para entender o papel da cor em uma variedade de contexto, que vai desde o namoro, até as interações masculinas, até evitar predadores. O campo da coloração animal é impulsionado principalmente pelo trabalho em vertebrados maiores, como pássaros. Com técnicas de manipulação de cores dimensionadas, agora podemos fazer mais perguntas sobre cor em animais minúsculos.