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DOI: 10.3791/59966-v
Kyla A. Britson1,2, Aaron D. Black2,3, Kathryn R. Wagner1,2,3,4, Thomas E. Lloyd1,2,4
1Graduate Program in Cellular and Molecular Medicine,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Neurology,Johns Hopkins University School of Medicine, 3Kennedy Krieger Institute, 4Department of Neuroscience,Johns Hopkins University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Doenças humanas complexas podem ser desafiadoras para modelar em sistemas de modelos laboratoriais tradicionais. Aqui, nós descrevemos uma aproximação cirúrgica para modelar a doença do músculo humano com a transplantação de biópsias humanas do músculo esqueletal em ratos immunodeficientes.
Este protocolo é significativo porque pode ser usado para criar xenoenxertos musculares esqueléticos humanos, que podem ser usados para modelar doenças musculares e realizar testes terapêuticos pré-clínicos. Este modelo de xenoenxerto permite que os pesquisadores estudem os músculos humanos in vivo para entender melhor a biologia celular muscular humana e desenvolver novos modelos para doenças musculares raras ou adquiridas. Após a obtenção de uma biópsia muscular humana, coloque a amostra em uma placa de Petri de 100 por 15 milímetros contendo meio muscular, e use um microscópio estéreo e uma tesoura cirúrgica para remover qualquer fáscia restante ou tecido gorduroso.
Disseque a biópsia muscular em pedaços de aproximadamente sete por três por três milímetros, tomando cuidado para que as fibras sejam dispostas longitudinalmente dentro da amostra. Em seguida, transfira a placa de Petri contendo o músculo dissecado no gelo, e coloque suturas sintéticas e não absorvíveis em uma placa petri de 100 por 15 milímetros de 70% de etanol. Depois de confirmar a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé em um rato de oito a 12 semanas de idade, anestesiado NOD-Rag-gamma, aplique pomada aos olhos do animal imunodeficente, e use um aparador para remover o cabelo sobreposto do tibialis anterior do tornozelo ao joelho.
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