Isolamento, Transfecção e Cultura dos Monócitos Humanos Primários

A infecção pelo HIV causa disfunção imunológica mesmo em indivíduos submetidos à terapia antirretroviral sem vírus detectável. Este método permite o estudo da função monócito que são os principais reguladores da resposta imune. Otimizamos essa técnica para o isolamento, cultura e transfecção de monócitos primários humanos.

Usamos este método para entender os mecanismos moleculares de disfunção imunológica em indivíduos infectados pelo HIV, mas pode ser aplicado a quaisquer outros estudos imunológicos envolvendo monócitos. Se esta é a primeira vez que trabalha com sangue humano, lembre-se de seguir os protocolos adequados de biossegurança e tratar todas as amostras como material possivelmente infeccioso. Depois de coletar 40 mililitros de sangue inteiro humano fresco em quatro tubos de vácuo EDTA mililitros, use técnica estéril para transferir todo o sangue para um único tubo de propileno cônico de 50 mililitros em um armário de biossegurança.