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Avaliação da migração do linfócito em um sistema de transmigração ex vivo
Avaliação da migração do linfócito em um sistema de transmigração ex vivo
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JoVE Journal Immunology and Infection
Assessment of Lymphocyte Migration in an Ex Vivo Transmigration System

Avaliação da migração do linfócito em um sistema de transmigração ex vivo

Full Text
7,384 Views
10:25 min
September 20, 2019

DOI: 10.3791/60060-v

Kristi J. Warren1,3, Todd A. Wyatt2,3,4

1Department of Internal Medicine,University of Utah, 2Research Service,VA Nebraska Iowa Health Care System, 3Department of Internal Medicine,University of Nebraska Medical Center, 4Department of Environmental, Agricultural & Occupational Health,University of Nebraska Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Neste protocolo, os linfócitos são colocados na câmara superior de um sistema de transmigração, separados da câmara inferior por uma membrana porosa. A quimiocina é adicionada à câmara inferior, o que induz a migração ativa ao longo de um gradiente de quimiocina. Após 48 h, os linfócitos são contados em ambas as câmaras para quantificar o transmigration.

Transmigração linfócito é uma característica importante de qualquer resposta imune. Portanto, esse protocolo é significativo porque permite que um pesquisador avalie a mobilidade de linfócitos em um sistema in vitro bem definido. A principal vantagem desta técnica é que várias quimiocinas podem ser avaliadas para determinar sua eficácia de induzir a migração em células recentemente definidas, como o grupo duas células linfoides inatas, ou ILC2.

Uma segunda vantagem é que inibidores ou terapias biológicas destinadas a bloquear caminhos específicos de quimioterapia podem ser testados por este método antes de fazer experimentos mais caros com animais. Comece excisando pulmões e baços de camundongos machos e fêmeas tratados com ovários eutanizados usando dois a três animais por grupo. Coloque tecidos excisados em tubos separados de dissociação de acordo com o tipo de tecido e o sexo animal.

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Imunologia e infecção problema 151 CCL17 (C-C Motif chemokine 17)/TARC (Timo e chemokine relacionado à ativação) CCL22 (chemokine do Motif C-C 22)/MDC (chemokine macrófago-derivado) CCR4 (receptor 4 do chemokine de CC) pilha de T CD4 (pilha do ajudante de CD4 + T) ILC2: (grupo 2 células linfóides inatas) OVA (ovo de galinha Ovalbumin)

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