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DOI: 10.3791/60060-v
Kristi J. Warren1,3, Todd A. Wyatt2,3,4
1Department of Internal Medicine,University of Utah, 2Research Service,VA Nebraska Iowa Health Care System, 3Department of Internal Medicine,University of Nebraska Medical Center, 4Department of Environmental, Agricultural & Occupational Health,University of Nebraska Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Neste protocolo, os linfócitos são colocados na câmara superior de um sistema de transmigração, separados da câmara inferior por uma membrana porosa. A quimiocina é adicionada à câmara inferior, o que induz a migração ativa ao longo de um gradiente de quimiocina. Após 48 h, os linfócitos são contados em ambas as câmaras para quantificar o transmigration.
Transmigração linfócito é uma característica importante de qualquer resposta imune. Portanto, esse protocolo é significativo porque permite que um pesquisador avalie a mobilidade de linfócitos em um sistema in vitro bem definido. A principal vantagem desta técnica é que várias quimiocinas podem ser avaliadas para determinar sua eficácia de induzir a migração em células recentemente definidas, como o grupo duas células linfoides inatas, ou ILC2.
Uma segunda vantagem é que inibidores ou terapias biológicas destinadas a bloquear caminhos específicos de quimioterapia podem ser testados por este método antes de fazer experimentos mais caros com animais. Comece excisando pulmões e baços de camundongos machos e fêmeas tratados com ovários eutanizados usando dois a três animais por grupo. Coloque tecidos excisados em tubos separados de dissociação de acordo com o tipo de tecido e o sexo animal.
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