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DOI: 10.3791/60197-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a protocol utilizing laser capture microdissection (LCM) to extract high-quality RNA from bone cells in mouse femurs, facilitating gene expression analysis. While focused on mouse bone tissues, the method is adaptable for examining gene expression in hard tissues across various species.
Um protocolo da microdissecção da captação do laser (LCM) foi desenvolvido para obter a quantidade suficiente de RNA de alta qualidade para a análise da expressão de gene em pilhas de osso. O estudo atual centra-se em seções do fêmur do rato. Entretanto, o protocolo de LCM relatado aqui pode ser usado para estudar a expressão de gene nas pilhas de todo o tecido duro.
Você já pensou em aproveitar o poder da microdisseção de captura a laser para análise da expressão genética em células ósseas específicas dentro de seu ambiente natural? Aqui, descrevemos um protocolo que lhe permitirá obter quantidades suficientes de RNA de alta qualidade a partir de criosections de ossos de rato. Esta tecnologia é uma ótima ferramenta para examinar mudanças na expressão genética em células ósseas específicas em modelos de camundongos geneticamente modificados ou em modelos de doenças.
O protocolo descrito aqui é focado em ossos de camundongos, mas pode ser usado para estudar in situ uma expressão genética em células de qualquer tecido duro em qualquer espécie. Ajudando a demonstrar este procedimento, será Christiane Schueler, uma técnica do meu laboratório. Depois de eutanásia camundongos por exsanguinação sob anestesia geral, remova os fêmures inteiros rapidamente.
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