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DOI: 10.3791/60233-v
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A integridade da barreira hematoencefálica é fundamental para a função do sistema nervoso. Na Drosophila melanogaster, a barreira hematoencefálica é formada por células gliais durante a embriogênese tardia. Este protocolo descreve métodos para o ensaio para a formação e a manutenção da barreira do sangue-cérebro em embriões do melanogaster do D. e em larvas do terceiro instar.
Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre a regulação genética da formação e manutenção da barreira hemencefálica durante múltiplos estágios de desenvolvimento de drosophila. Este método também pode ser adaptado para examinar a permeabilidade de outras barreiras, como o epitélio intestinal em uma variedade de organismos. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite a avaliação da função de barreira hemencefálica em tecidos vivos.
A demonstração visual deste método é fundamental, pois as manipulações da amostra podem ser difíceis e muitas etapas requerem muita atenção aos detalhes. Para a coleta de embriões coloque no mínimo 50 fêmeas virgens com 20 a 25 machos por garrafa com alimentos ágar de farinha de milho e incubar essas moscas por um a dois dias antes de iniciar as coletas. Um dia antes da coleta, aqueça pratos de ágar de suco de maçã a 25 graus Celsius durante a noite.
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