July 9th, 2020
A lesão do balão carótida do rato imita o procedimento clínico de angioplastia realizado para restaurar o fluxo sanguíneo em vasos ateroscleróticos. Este modelo induz a resposta à lesão arterial distending da parede arterial, e desnuding a camada intimal de células endoteliais, causando, em última análise, remodelação e uma resposta hiperplástica intimal.
A lesão do balão carotídeo segmentar controlado por pressão. É um procedimento experimental usado no laboratório que imita o procedimento de revascularização da angioplastia com balão realizado em pacientes humanos com doença aterosclerótica grave. É usado no laboratório para estudar vários aspectos da resposta à lesão arterial.
Este modelo de reestenose é realizado de maneira semelhante à angioplastia com balão no ambiente clínico, permitindo que uma área definida de lesão vascular e reendotelização completa dentro de duas semanas após a lesão seja alcançada. Após a realização de todos os procedimentos pré-operatórios, de acordo com os padrões IACUC da universidade, confirme a falta de resposta ao reflexo pedal em um rato adulto anestesiado. Coloque o rato sob um microscópio de dissecação e use uma tesoura para fazer uma incisão superficial reta de 1,5 a dois centímetros na pele longitudinal ao longo da linha do pescoço entre os ossos da mandíbula.
Faça uma segunda incisão através do tecido conjuntivo sob a pele até que a camada muscular esteja exposta. E deslocar as glândulas salivares sob a pele para acessar o tecido muscular. Insira as pontas fechadas da tesoura entre a camada muscular e o tecido conjuntivo e abra suavemente a tesoura enquanto puxa a pele para cima para separar sem rodeios o tecido conjuntivo do músculo.
Disseque os músculos esterno-hióideo e esternomastóideo longitudinalmente ao longo do lado esquerdo da traqueia até que o músculo omo-hióideo que corre perpendicularmente aos dois músculos superficiais seja observado. Use uma pinça para criar suavemente uma janela separando o músculo omo-hióideo perpendicular do músculo esterno-hióideo longitudinal que corre sobre a traqueia. E alcance a pinça sob o músculo omo-hióideo para separar os músculos esterno-hióideo e esternomastóideo para expor a artéria carótida comum.
Para isolar a artéria carótida comum, disseque a artéria próxima à bifurcação até que as artérias carótidas interna e externa fiquem expostas. Usando suturas de Prolina pré-cortadas, ligue as artérias tireoidiana superior e carótida externa perto de suas respectivas bifurcações. Deixando a maior parte da sutura para um lado do aceno e agarrando cada sutura com um hemostático curvo.
Termine de dissecar ao redor da artéria carótida interna e alcance a pinça sob e ao redor da artéria. Use uma pinça vascular não esmagadora para prender cuidadosamente ao redor da artéria occipital com a artéria carótida interna para obter o controle distal sem dobrar os vasos. Dissecar a artéria carótida comum proximal à bifurcação, tendo o cuidado de separar o nervo vago da artéria.
E alcance a pinça sob e ao redor da artéria carótida comum. Em seguida, use uma pinça vascular não esmagadora para obter o controle proximal, colocando a pinça a pelo menos cinco milímetros da bifurcação. Para induzir a lesão por balão, manobre os hemostáticos curvos que seguram cada ramo da artéria litigada para expor a bifurcação entre a artéria carótida externa e o ramo superior.
Disseque suavemente o tecido na bifurcação para limpar o local da arteriotomia o máximo possível. E use uma tesoura de microdissecção para fazer uma incisão de arteriotomia entre a artéria carótida externa e o ramo superior. Tome cuidado para limpar o local antes de inserir a microtesoura e certifique-se de que uma lâmina da microtesoura esteja totalmente dentro da artéria antes de fazer a incisão.
Use um cotonete para empurrar todo o sangue para fora da artéria carótida comum e limpar o local da arteriotomia. Insira o cateter de balão não inflado através da arteriotomia levantando a arteriotomia com uma pinça. E avance o balão para dentro da artéria até que a extremidade proximal do balão passe pela bifurcação.
Se o balão não avançar facilmente para a carótida comum, reposicione o ângulo do balão antes de tentar novamente. Prenda o cateter no cone nasal da anestesia para que o balão não escorregue para fora da artéria durante a insuflação. E encha lentamente o balão até cinco atmosferas de pressão.
Deixe o balão na artéria por cinco minutos para induzir a lesão arterial antes de esvaziar e remover suavemente o balão através da arteriotomia. Aperte suavemente o grampo para lavar a artéria. E ligar a artéria carótida externa proximal à arteriotomia.
Remova as pinças das artérias carótidas comum e interna para restaurar o fluxo sanguíneo. E aplique 50 microlitros de gel terapêutico periadventiatialmente ao longo dos lados esquerdo e direito da artéria lesionada. Em seguida, use suturas de Vicryl 4-0 ou 6-0 interrompidas para fechar o tecido conjuntivo.
E feche a pele com uma sutura de náilon 4-0. Aqui, imagens representativas de seções transversais arteriais coradas com H e E de artérias saudáveis, lesionadas e tratadas são mostradas. Utilizando a imagem J, o perímetro da neoíntima, bem como a lâmina elástica interna e externa, podem ser traçados para quantificar suas respectivas áreas.
A microscopia de fluorescência de folha de luz também pode ser usada para visualizar toda a região da lesão ao longo do comprimento da artéria. As imagens podem então ser renderizadas usando um software para quantificar a relação íntima-média. Certifique-se de colocar as pinças da carótida interna para não dobrar a carótida comum e limpar completamente o local da arteriotomia antes de inserir a tesoura de microdissecção.
Muitas abordagens terapêuticas podem ser usadas no final da cirurgia para tentar mitigar a resposta patológica que está ocorrendo dentro da artéria carótida.
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O modelo de lesão da artéria carótida do rato por balão simula a angioplastia clínica para estudar as respostas à lesão arterial. Este procedimento induz hiperplasia intimal e remodelação ao danificar a parede arterial.
This pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model provides a preclinical platform to study restenosis mechanisms following angioplasty, enabling evaluation of periadventitial therapeutic strategies. By mimicking clinical vascular injury and supporting quantitative histological and 3D imaging analysis, the model aids in target validation and mechanistic de-risking for cardiovascular drug development. It supports predictive confidence in lead identification by allowing assessment of neointimal hyperplasia inhibition in a disease-relevant system.
The model fits within the discovery continuum from target validation through lead identification to preclinical efficacy testing, particularly for cardiovascular indications involving vascular injury response.