Microdissecção de captura a laser da cartilagem embrionária do rato e osso para análise de expressão gênica

A heterogeneidade das estruturas esqueléticas é um obstáculo no estudo da expressão genética no desenvolvimento de cartilagem e osso. Este protocolo fornece um método para o isolamento preciso de tecidos adjacentes, mas diferentes. Otimizamos a microdisseção de captura a laser para cartilagem e o osso usando coloração violeta de cresílico para visualizar esses tecidos para coleta precisa, mantendo alta integridade de RNA para análise posterior.

Outros tecidos podem ser isolados se a violeta de cresilho fornecer distinção suficiente do tecido alvo e a qualidade do RNA permanecer alta após nosso método de processamento. Tais tecidos incluem suturas craniofaciais e cérebro. Cryosectioning é a habilidade mais exigente neste protocolo.